1目的基因分离克隆
二 PCR合成目的基因
• 定义：分离纯化出的目的片段用PCR仪扩增 （详见主要技术）
相似，防错配 引物3’末端：避免为A（易错配） CG含量：40%-60% ※未知序列时：用近缘生物对应片段参考
• RT-PCR间接合成：以mRNA为模板逆转录出 cDNA，再以cDNA为模板 PCR
※cDNA： 定义：以mRNA为模板逆转录合成的无内含子
单链环状DNA 特点：无内含子、单链环状，逆转录酶属于
DNA聚合酶，需引物三 基因分离目的基因 • 基因组的建立：
• cDNA的建立：四 基因图位克隆 • 染色体步移法：
• 染色体登陆：
※本章总结
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