(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910267376.1
(22)申请日 2019.04.03
(71)申请人 上海交通大学
地址 200240 上海市闵行区东川路800号
(72)发明人 贺安乐　孙佳楠　王新华　陈捷　
(74)专利代理机构 上海汉声知识产权代理有限
公司 31236
代理人 庄文莉
(51)Int.Cl.
G01N 27/04(2006.01)
G01N 27/06(2006.01)
C12Q 1/18(2006.01)
C12R 1/77(2006.01)
(54)发明名称
玉米品种镰孢菌穗腐病抗性快速鉴定方法
(57)摘要
本发明公开了一种玉米品种镰孢菌穗腐病
抗性快速鉴定方法；本发明采用已知的抗性和感
病品种，将不同品种的籽粒分别在一定温度下催
芽，石英砂磨擦造成机械伤口，接种镰孢菌悬液，
保湿培养，测定电导率，计算不同玉米品种籽粒
电导率校正值。

田间种植不同抗性品种，并在灌
浆期的果穗人工接种镰孢菌，计算不同品种果穗
籽粒被镰孢菌侵染的病情指数，计算不同抗性品
种果穗籽粒电导率校正值与穗腐病病情指数相
关性，形成基于电导率的玉米品种抗镰孢菌穗腐
病评价分级标准；根据籽粒抗性离体评价分级标
准和标准化的籽粒电导率测定方法，实现玉米品
种抗镰孢菌穗腐病快速鉴定与评价。

权利要求书2页 说明书6页CN 110018201 A 2019.07.16
C N 110018201
A
权　利　要　求　书1/2页CN 110018201 A
1.一种玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
S1、选取对穗腐病抗性不同的玉米品种；
S2、玉米籽粒催芽至籽粒露白；
S3、将每品种玉米籽粒平分为两份，一份加入ddH2O，另一份通过石英砂摩擦造成玉米籽粒胚微伤口、接种镰孢菌孢子悬液；
S4、将步骤S3的玉米籽粒取出进行保湿培养；
S5、测定所述保湿培养后的玉米籽粒的电导率，计算玉米品种籽粒电导率校正值：电导率校正值＝接种镰孢菌的籽粒电导率值-未接种镰孢菌的籽粒电导率值；
S6、田间种植步骤S1中选取的玉米品种，在灌浆期接种镰孢菌孢子悬液，以自然发病为对照，调查不同品种发生穗腐病发生情况，按穗腐病抗性分级标准统计病情指数；
S7、对品种电导率校正值与穗腐病病情指数进行相关性分析，形成玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准。

2.如权利要求1所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S1中，所述玉米品种包括抗病品种和感病品种。

3.如权利要求1所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S3中，所述镰孢菌孢子悬液的浓度为1.0×108～1.0×109CFU/mL。

4.如权利要求1所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S3中，通过石英砂摩擦造成玉米籽粒胚微伤口、接种镰孢菌孢子悬液具体为：将籽粒放入盛有与所述ddH2O等量的镰孢菌孢子悬浮液的锥形瓶中，按砂、种质量比为1:4～1:5向锥形瓶中加入2～7目灭菌石英砂，25～28℃、150～180rpm/min摇床震荡1～2h。

5.如权利要求4所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S3中，不同品种玉米籽粒通过石英砂摩擦造成玉米籽粒胚微伤口、接种镰孢菌孢子悬液时，采用的灭菌石英砂细度、用量、摇床震荡温度、摇床震荡时间以及摇床转数均相同。

6.如权利要求1所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S6中，接种的镰孢菌孢子悬液同步骤S3中的镰孢菌孢子悬液。

7.如权利要求1所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S6中，所述穗腐病抗性分级标准依据的是NY/T 1248.8-2016玉米抗病虫性鉴定技术规范中的第8部分：镰孢穗腐病。

8.如权利要求1所述的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准的构建方法，其特征在于，步骤S7中，所述玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准为：高抗品种电导率校正值(病情级别1级以下)：≤15μs/cm，
中抗品种电导率评价值(病情级别1-3级)：>15μs/cm，且≤27μs/cm，
感病品种电导率评价值(病情级别5-7级)：>27μs/cm，且≤39μs/cm，
高感品种电导率评价值(病情级别7-9级)：＞39μs/cm。

9.一种玉米品种镰孢菌穗腐病抗性鉴定方法，其特征在于，根据如权利要求1所述方法构建得到的玉米品种镰孢菌穗腐病抗性电导率评价分级标准进行鉴定，鉴定步骤、参数与标准构建相应步骤、参数相同；具体包括如下步骤：
2。