一、实验名称:7S NGF 纯度检测方法建立
二、实验目的:利用HPLC检测样品纯度
三、实验方法:制样编辑检测方法运行检测方法数据分析
四、实验材料:
1.仪器设备
名称厂家/品牌型号
精密天平(千分之一)梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司ML203
pH计梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司S220
HPLC Waters E2695
2.主要试剂耗材
名称厂家/品牌批号
磷酸氢二钠国药集团化学试剂有限公司20131224
磷酸二氢钠国药集团化学试剂有限公司20131227
氯化钠国药集团化学试剂有限公司20130422
柱子TSKgel G3000SWXL
3.自制试剂
编号名称配制方法保质期A 0.5M磷酸氢二钠
称取Na2HPO4.12H2O 358.14g, 加水溶解,定容至
2L.
B 0.5M磷酸二氢钠
取NaH2PO4.2H2O 156.01g, ,加水溶解,定容至2L.
C 0.5M PB(pH6.8)量取 0.5M磷酸二氢钠溶液537ml, 0.5M磷酸氢二
钠463ml,将两种溶液混合均匀
D 50 mM PB+0.3M NaCl(PH=6.8)量取0.5M PB(pH6.8)溶液100ml,加入
NaCl8.766g溶解后定容到0.5L.
E 50 mM PB+0.45M NaCl(PH=6.8)量取0.5M PB(pH6.8)溶液100ml,加入
NaCl13.149g定容到0.5L
F 50 mM PB+0.6M NaCl(PH=6.8)量取 0.5M PB(pH6.8)溶液100ml,加入
NaCl17.532定容到0.5L
五、实验内容:
柱子信息:TSK gel/型号G3000SWXL/Column NO.S1721/Part NO.08541
A.取中试待检样品200ul放入西林瓶中。
放入A1盘
B.编辑样品组方法:流速0.8ml/min,平衡60min,进样时间依次为20、40min,检测波长214nm、
280nm、310nm,样品温度25+5 ℃,等度进样。
C.运行方法,处理数据。