奥尔兰醋杆菌 啤酒、醋酸
氧化醋杆菌 酒类
巴氏醋杆菌 醋酸、山梨糖
恶臭醋杆菌 醋、山梨糖、二羟基丙酮
弱氧化醋杆菌 5-酮基葡糖酸、丙酮酸、山梨糖
拟胶醋杆菌 丙酮酸、山梨糖、纤维素
大肠杆菌
赖氨酸、苏氨酸、精氨酸、色氨酸、酪 氨酸、
天冬氨酸、高丝氨酸、谷氨酸脱羧酶、 酰胺酶、
天冬酰氨酶、丙酮酸、酮戊二酸，腺苷 酸、大肠菌素
简便
沙土保藏法 冷冻干燥法
干燥、无营养 产孢子微生物
1~10年
干燥、无氧、低 温、有保护剂
各大类
5~15年以上
简便有效 设备
划线培养后的细菌菌落
酿酒酵母
霉菌孢子
国内外菌种保藏机构：
菌种保藏机构的任务：广泛收集科研和生产菌种、
菌株，并加以妥善保管，使之达到不死、不衰、 不乱以及便于研究、交换和使用的目的。
一菌种与种子扩大培养
从微生物分类学的角度，分为：
细菌类：
短杆菌：氨基酸发酵（谷氨酸）
枯草芽孢杆菌：淀粉酶（BF7658）、碱性蛋白
酶等
地衣芽孢杆菌：耐高温α-淀粉酶)
苏云金芽孢杆菌：BT生物农药
梭状芽孢杆菌：丙酮、丁酸等发酵
酵母菌：
啤酒酵母：酿酒酵母、辅酶类物质的发酵
酒精酵母：酒精
汉逊酵母：食品工业，用于乙酸乙酯的发酵
属名 诺卡氏菌属 拟无枝酸菌属 分枝杆菌属
工业常用的微生物：放线菌
种名 珊瑚色诺卡氏菌 小球诺卡氏菌 鼠白诺卡氏菌 暗色诺卡氏菌 石蜡诺卡氏菌 嗜石油诺卡氏菌 东方诺卡氏菌 地中海拟无枝酸菌 黄色分枝杆菌 甲烷分枝扦菌 石蜡分枝杆菌
耻垢分技杆菌 结核分核杆菌
用
途
正烷烃→2，2-二甲基粘康酸
正烷烃→谷氨酸
（3）常用的菌种保藏方法： 斜面低温保藏法、甘油低温保藏法、砂土保藏法、麸
皮保藏法、冷冻干燥法、液氮超低温冻结法等。
几种常用菌种保藏方法的比较
方法名称 主要措施 适宜菌种 保藏期 评价
冰箱保藏法 （斜面）
低温
各大类
3~6月
简便
液氮超低温保藏 法
超低温
各类
长期
液氮
甘油低温封藏法 低温、缺氧
各大类
1年以上
特点：固态基质做载体，发酵结束后将培养基及 菌体挤压出来，载体可反复使用，如脲烷泡沫 塑料块。
⑷两步法液体深层培养：在酶制剂和氨基酸生产 中应用较多。
特点：控制菌体生长条件与产酶条件区分开来， 如先菌体生长，再改变条件产酶。
三、影响种子质量的主要因素
1.培养基
主要是碳源、氮源、无机盐、生长素和水等。
选用原则：组分简单，来源丰富，价格便宜，取材方 便等。
对于种子用的培养基，摇瓶与种子罐用的培养基不 相同，摇瓶要求培养基用的原材料精细，碳源浓度较低 而且是用微生物较易利用的碳源；对于种子罐用培养基， 要求使用接近大生产用的原材料，氮源浓度较高，有利 于菌体的增殖。例如：HASS（高温淀粉酶）
二、工业微生物的培养类型
⑴静置培养法（厌气性发酵）；少，如酒精发酵 ⑵通气培养法（好气性发酵）；主要，如抗生素等
通气培养法作为种子扩大培养的具体方法：
①液体培养法：三角瓶摇床震荡或回转式培养； ②表面法培养：液体表层，菌体生长于表面；
③固态法培养：固体培养基表面生长
大规模工业生产的培养方法及特点：
菌种保藏机构：
中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM) 美国的典型菌种保藏中心(ATCC) 英国国家典型菌种保藏所（NCTC） 法国里昂巴斯德研究所（IPL）
工业微生物 / 农业微生物 /
四、菌种选育
（1）目的：改善菌种的特性，使提高产量，改进质量，
丙氨酸、蛋白酶、3-羟基丁酮、 甾族化合物转化
鲁氏毛霉
淀粉酶、蛋白酶、丙二酸、乳酸、 丙酮酸
多刺毛霉 甾族化合物转化
三、生产菌种的保藏与选育
㈠菌种保藏
（1）目的：
①存活，不丢失，不污染； ②防止优良性状丢失； ③随时为生产、科研提供优良菌种。
（2）基本原理：根据菌种的生理生化特点，人工地创造 条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态。
假丝酵母：scp生产，石油发酵
霉菌：
黑曲霉：柠檬酸工业、酿酒业、
酶制剂工业（糖化酶）
黄曲霉：酱油生产(3042)，面酱
青霉菌：青霉素的生产
红曲霉：红曲制造，用于南方红曲酒
（女儿红）的生产；使用红色色
素的生产；豆腐乳的生产等
赤霉菌：赤霉素的生产，是一种植物生
长激素
工业常用的微生物：细菌
属名
种名
铜绿假单孢菌
利福霉素
单细胞蛋白
正丁烷→葡萄糖、糖醛酸
单细胞蛋白
万古霉素
利福霉素
石油发酵
正构烷烃→赖氨酸
属名 毛霉属
工业常用的微生物：霉菌
种名 卷枝毛雹 爪哇毛霉 东北毛霉 高大毛霉
用
途
脂肪
蛋白酶、果胶酶、甾族化合物转化
丙酮酸
草酸、丁二酸、脂肪、甾族化合物转化
微小毛霉丙氨酸、凝乳酶、蛋来自酶、 甾族化合物转化总状毛霉
⑴固体培养（曲法培养）
①浅盘固体培养 ②深层固体培养 特点：酶活力高，但劳动强度大，曲层需翻动。
⑵液体培养
①浅盘液体培养：已不用，占地面积大 ②液体深层培养：几乎所有的好气培养都采用
特点：培养条件易控制，如温度，pH等，但易染菌， 要求无菌。
⑶载体培养：
吸收了固态的曲法培养与液态培 养的优点，是近年新发展的一种培养方法。
短小假单孢菌
萤光假单孢菌 假单孢菌
属 甲烷假单孢菌
麦氏假单孢菌
卵假单孢菌
臭味假单孢菌
用途 谷氨酸、水杨酸、丙酮酸、蛋
白酶 赖氨酸
天冬氨酸、葡糖酸、2-酮基葡 糖酸、
甲烷、丙烷→粘性糖类 2-酮古洛糖酸
葡糖酸、天冬氨酸 瓜氨酸
醋杆菌属
埃希氏菌 属
纹膜醋杆菌 醋酸、丙酸、丁酸、葡糖酸、山梨醇
黑色醋杆菌 2，5-二酮基葡糖酸
①尽可能满足其营养条件、培养条件，避免有害因素 影响；
②尽量减少传代次数； ③采用幼龄菌种；
4.菌种复壮方法
①分离复壮（稀释平板法、平板划线法等）； ②若单菌落分离不行，可改变培养条件，或两者结合 进行复壮； ③诱变因素处理，再进行单菌落分离；
第二节 种子扩大培养
一、种子扩大培养的任务
1.任务：每次发酵罐的投料，要提供相当数量代谢旺盛 的种子。根据菌种生长速度快慢来决定扩大培养的级数； 2、三级发酵（50吨发酵罐）： 斜面—一级摇床—二级种子罐—三级种子罐—发酵罐
降低成本，改革工艺，方便管理及综合利用等。
（2）方法：A、自然选育；B、抗噬菌体菌株选育；C、
诱变育种；D、代谢控制育种；E、基因重组育种；
五、防止菌株衰退的措施
1、菌种退化：多次传代，发酵力、繁殖力下降； 发酵产物得率低。 2、衰退的可能原因
①菌种保藏不妥；
②培养要求未得到满足；
3.防止菌种衰退的方法