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芦丁测定

2. 1样品制备:自头翁汤加减复方以甘草、自头翁、秦皮、南山碴、粉葛根、车前子、黄连、蕾香、地榆、自芍=1 :3:2:4:3:2:115:3:3:2配制。

弄成碎末,加水两次煎熬后提取,浓缩,添加乙醇致含醇量为65 07o .离心去掉沉淀后蒸I-,添加甲醇溶解,离心,取上清液加甲醇定容到原药材量1:1a
2. 2参照品溶液制备:取芦丁参照品12毫克,精密称取,置于SOmI瓶中,加70%乙醇溶解并稀释到刻度,得质量浓度为0. 24mg/ml的芦丁参照
品溶液。

2. 3紫外一可见分光光度法扫描与标准曲线制备
2. 3. 1可见分光光度法:精密称定芦丁参照品溶液1. 00m1,2. OOmI,3. 00m1,4. OOmI, 5. OOmI, 6. OOmI分别置25 ml容量瓶中,均加水到6. OOmI,加5%的N aN 02溶液1. 00 ml,摇匀,放置6分钟,加10%的A1(N03) 3溶液1.00 ml,摇匀,放置6分钟,加4%的N a011溶液10. 00 ml.再加水到刻度,摇匀,放置15分钟。

以相应试剂为空自,在400一800 nm 范围内进行光谱扫描,得510 nm处为可见最人吸收峰。

以空自试剂为参照,将6个标准品溶液分别在510 nm下测定吸光度,得回归方程A=0. 00988 C + 0. 00523 . r = 0. 9997 a芦丁浓度在9. 6一57. 6 mg/L范围线性关系佳。

2.3.2紫外分光光度法:精密称定芦丁参照品溶液0. 10m1,0. 20m1,0.40m1,0. 60m1,0. 80m1,1. OOmI于5 ml容量瓶中,均加甲醇到刻度,摇匀。

以甲醇作为空自试剂参照,在400 - 800 nm范围内进行光谱扫描,得359nm处为紫外最人吸收峰。

以空自试剂为参照,将6个标准品溶液分别在359 nm下测定吸光度,得回归方程A = 0. 02503 C + 0. 02367 . r = 0. 9995 a芦丁浓度在4. 8 -48mg/L范围线性关系佳。

2. 4紫外一可见分光光度法测定中药复方总黄酮含量
2. 4. 1可见分光光度法:精密称定复方样品1. OOmI置于10 ml容量瓶中,加甲醇到刻度,再取1. SOmI置于25 ml容量瓶中,加水到6. OOmI,加5%的N aN 02溶液1. 00 ml,摇匀,放置6分钟,加10%的Al (N03) 3溶液1. 00 ml,摇匀,放置6分钟,加4%的N a011溶液10. 00 ml,再加水到刻度,摇匀,放置巧分钟。

平行测定吸光度3次,仪器自动计算样品总黄酮含量。

2. 4. 2紫外分光光度法:精密称定复方样品1. OOmI置于10 ml容量瓶中,再取1. SOmI 置于25 ml容量瓶中,均加甲醇到刻度,摇匀。

平行测定吸光度3次,仪器自动计算样品总黄酮含量。

3.结果
比较可见分光光度法与紫外分光光度法测定全方与缺药的黄酮含
量,如表1所示。

结果表明,可见分光光度法测定的中药复方总黄酮含量。

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