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血清尿素UREA测定

血清尿素UREA测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理
在下述反应中,NAD+生成速率与样本中尿素(尿素氮)的浓度成正比。

通过在340 nm处测定固定时间间隔内吸光度的下降速率,即可测得样本中尿素(尿素氮)的浓度。

尿素酶
尿素 + 2H2O 2 NH4+ + 2 HCO3-
谷氨酸脱氢酶
NH4++α-酮戊二酸+NADH+H+ L-谷氨酸+NAD++H2O
3 标本:
3.1 病人准备:血清无特殊要求。

要留取24小时尿样。

3.2 类型:血清、血浆(不可使用肝素铵)、新鲜尿液。

无溶血和凝块的血清,如果必须使用血浆,建议使用无铵离子
的抗凝血剂,如EDTA和肝素钠。

用新鲜尿液作样品时,用蒸馏水作1:100稀释。

3.3标本存放:血清或血浆稳定性:4~25℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定1年。

尿液稳定性:20~25℃保存可稳定2天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定1个月。

3.4 标本运输:常温条件下保存运输。

3.5. 标本拒收标准:细菌污染的标本。

4 实验材料
4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成
试剂1(R1):α-酮戊二

7.5mmol/
L
谷氨酸脱氢

>800U/L
NADH 0.35mmol
/L
二磷酸腺苷 1.5mmol/L Tris缓冲液
115mmol/L
试剂2(R2):
Tris缓冲液115mmol/
L
尿素酶>40000 U/L α-酮戊二酸7mmol/L
4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。

4.1.5 注意事项:试剂中含有防腐剂叠氮化钠,可能存在一定的刺激作用,请勿直接接触皮肤、眼睛。

一旦接触,即用大量清水冲洗。

请勿吞服。

4.2 校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的UREA校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器
AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。

8 计算方法:以UREA复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L 报告。

9 参考值范围
成人2.5-6.4 mmol/L(注:各实验室应有自己的参考范围。


参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值2.5-6.6 mmol/L
10 临床意义
尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物。

高尿素血症或氮血症表现为血液中尿素水平升高。

鉴别肾前和肾后氮血症时可以同时检测尿素和肌酐。

因脱水、蛋白质代谢增加、皮质醇治疗或肾脏灌注减少等引起的肾前氮血症,表现为尿素水平升高而肌酐水平正常。

由泌尿管道阻塞引起的肾后氮血症,表现为尿素和肌酐水平都升高,但肌酐升高程度较小。

发生肾病时,肾小球滤过作用明显下降或蛋白质摄入量大于200 g/天都会导致尿素浓度升高。

尿素氮的检测用于诊断和治疗某些肾脏疾病和代谢紊乱。

尿素氮大约占血液中非蛋白氮的75%。

它通过肝脏中的氨进行合成,是蛋白质脱氨作用的产物。

通过肾小球从血液中过滤尿素到尿中,是消除体内多余氮的主要方法。

血液尿素氮(BUN)水平是肾功能以及肾前状态和肾后状态的度量标准,肾前因素引起的BUN的升高包括心脏代偿失调,缺水或增加的蛋白质分解代谢。

水平增加的肾脏因素有急性肾小球肾炎,慢性肾炎,多囊肾,肾纤维化和肾小管坏死。

任何类型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的肾后因素1。

肾小球清除尿素和肌酸酐,但是,尿素随后部分地被肾小管重吸收,然而肌酸酐却不会。

因此,血清尿素氮和血清肌酸酐测定经常同时用于肾功能的不同诊断中。

11 操作性能
11.1试剂空白:。

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