1.TLC法 法
采用杂质对照品与供试品溶液自身稀释对 照并用法
2.HPLC法 分离效能高、专属性强、检测灵敏性好，可 法
以准确的测定各组分的峰面积。分为外标法、 加校正因子的主成分自身对照测定法、不加 校正因子的主成分自身对照法、面积归一法。
有关青蒿素含量测定的方法有紫外分光光度法 紫外分光光度法、 紫外分光光度法 薄层扫描法、HPLC等。 薄层扫描法 高效液相色谱法在测定实际样品时，色谱柱易被污染， 并且对前处理要求严格,分析时间长；毛细管电泳法测 定青蒿素的应用较少，且都为紫外吸收检测。由于青蒿 素没有紫外吸收，需要对青蒿素进行一定的处理。
现场快速检测青蒿药材质量的方法
方法：以索氏提取一高效液相色谱法为对照，采用超声 波提取一紫外分光度法进行现场快速检测青蒿药材质量 结果：得出现场快速检测青蒿素的含量关系式为： MRD(mg ／ g)=(AXVX2.2984)／(As×3)+1.2067。结论：超 声波提取一紫外分光度法测定青蒿质量，简化了操作程 序，缩短了提取时间，在1.5h内就可完成青蒿素的含量 测定，是目前快检速测青蒿药材质量较理想的方法。
（三）色谱法
利用比较供试品溶液主峰的保留时间（tR)是否一致或比 较供试品溶液所显主斑点的位置和颜色与对照品溶液主斑点的 位置和颜色是否相同进行鉴别。 青蒿素类抗疟原料药在ChP2010中均采用HPLC法进行鉴 别，但部分制剂中也采用TLC进行鉴别。 HPLC法一般都规定在含量测定项下记录的色谱图中，供 试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
碘量法、滴定分析法、高效毛细管电泳一电导法、 HPLC—ELSD法、 SFE—HPLC法
高效毛细管电泳一电导法： 高效毛细管电泳一电导法
以Tris-H3BO3(H3BO3，浓度为1.5 mmol／L) 为电泳介 质，乙醇为有机添加剂，在15 kV高压，pH 9 .0的碱性条 件下柱端电导法检测了青蒿中的青蒿素含量，着重探讨了 缓冲溶液种类、浓度、酸碱度及其操作电压、进样时间对 检测的影响。该法的线性范围为 20～280 mg／L，检出限 为3.2 mg／L
紫外分光光度法
紫外分光光度检测方法，为筛选收购优质青蒿提供快速 紫外分光光度 检测的方法 方法：外分光光度计对青蒿素标准溶液进行波长扫描，确定 最适吸收波长，在最适吸收波长下建立青蒿素标准品的吸光 度一浓度曲线。根据标准曲线测定青蒿样品中青蒿素的含量。 结果：青蒿素的最适吸收波长为290nm，吸光度一浓度回归 方程为： Y=0.043X+0 .006，不同青蒿样品中青蒿素含量有差异。
（一） 呈色反应
1.过氧桥的反应（碘化钾试液 淀粉）： 过氧桥的反应（ 淀粉）： 过氧桥的反应 碘化钾试液-淀粉）：因其具有氧化性, 在酸性条件 下能将I-氧化成I2与淀粉指示液生成蓝紫色 示例1 ：ChP青蒿素的鉴别：取本品越5mg，加无水乙醇0.5ml 0.4ml 2.5ml 溶解后，加碘化钾试液0.4ml，稀硫酸2.5ml与淀粉指示 液4ml，立即显紫色。 2.羟肟酸铁反应 羟肟酸铁反应：含有内酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯类化合物， 羟肟酸铁反应 在碱性条件与羟胺作用，生成羟肟酸，在稀酸中与高铁离子呈色。 3.香草醛 硫酸反应 香草醛-硫酸反应 香草醛 硫酸反应：香草醛硫酸溶液又称硫酸香兰素显色剂。很多物质， 如有机酸、挥发油、甾醇、萜类等，都可与之产生显色反应。
陈丽09药学一班 陈薇潞09药学二班
青蒿素是什么？ 青蒿素是什么？
青篙素（arteannuin ）是从中药青篙 中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物。 其对鼠疟原虫超微结构有一定影响，主要 使疟原虫膜系结构改变，该药首先作用于 食物泡膜、表膜、线粒体，内质网，此外 对核内染色质也有一定的影响。
青蒿素植株
（二）吸收光谱特征
1.红外吸收光谱 2.紫外吸收光谱
主要峰的归属分别为： 1738cm-1（νC=O、δ-内酯峰），1453、 1387、1199、1115cm-1（ ν -O-O-）， 1028、993、883cm-1 （ ν -O-O-）， 831cm-1 （ ν -O-O-）。
青蒿素红外谱图
2012-4-30
SFE—HPLC测定 样品的超临界CO2萃取法制备高效液相色谱测定 色谱条件：色谱柱：SpherisorbC18(10 μL ，4.6×390 mm)； 流动相：0.01mol/LNa2HPO4，NaH2PO4缓冲液(水：甲醇=50 ：50)；检测波长：260nm；灵敏度：0.05 AU峭；流速：1 ml/min；进样10 μl。
五、液相色谱-质谱联用法测定人 血浆双氢青蒿素浓度
双氢青蒿素是青蒿素类抗疟药在体内的主要活性代谢物， 具有较强的抗疟活性。由于双氢青蒿素没有发色团，紫外吸 收很低，用紫外检测器对其检测时，要用酸碱使其开环分解， 再测定分解产物的紫外吸收，处理方法较为繁琐，灵敏度低， 国外多采用高效液相色谱-电化学检测法，灵敏度高，测定时 流动相须注意除氧，LC-MS更专属灵敏，适用于血浆中的双 氢青蒿素的测定和药代动力学研究。
HPLC—ELSD法 HPLC—ELSD法
首次建立高效液相色谱一蒸发光散射检测器 测定青蒿素含量的方法，并对大量的青蒿样品进行 含量测定。方法：采用蒸发光散射检测器(ELSD)对 青蒿药材中的青蒿素进行HPLC分析，色谱柱：迪马 公司DiamonsilC18。(250×4.6mm，5μm)；流动相 ：甲醇：水(75：25)；流速：1 ml/min；蒸发光散 射检测器漂移管温度40℃，载气压力3．5bar，放 大系数(gain)为9；进样体积20斗1。结果：青蒿素 在1～5g范围线性关系良好，回收率为99.33％ (RSD=1.97％)
523项目 项目” 青蒿素的发现——“523项目”
青蒿素的故事原来始于中国文化大革命和援越抗美战争 时期。当年在越南战争的战场上，由于疟疾的流行，作战双 方的士兵纷纷感染疟疾，严重地影响了部队战斗力。抗氯喹 的恶性疟原虫 (Plasmodium falciparum) 的出现更成为当时 疟疾防治的主要难题. 1967年5月23日，在毛泽东主席和周恩来总理的指示下， 一项具有国家机密性质、代号为“523项目”的计划就此启 动了。项目短期的目标是要尽快研制出能在战场上有效控制 疟疾的药物 ，而它的长远目标是通过筛选合成化合物和中 草药药方与民间疗法来研发出新的抗疟药物。 1969年1月，屠呦呦被任命为北京中药研究所523课题组 的组长,领导对传统中医药文献和配方的搜寻与整理。1981 年10月，屠呦呦在北京代表523项目首次向到访的世界卫生 组织研究人员汇报了青蒿素治疗疟疾的成果 。
美国纽约 举行的 拉斯克奖 颁奖仪式 上领奖
青蒿素功效的药Biblioteka 作用1．抗病原体 ．(1)抗疟原虫 (2)抗菌、抗病毒
2．抗炎 ． 3．解热、镇痛 ．解热、 4．对免疫功能的影响 ． 5．抗癌 ．
一、青蒿素类药物主要物化性质 二、鉴别试验 三、纯度检查 四、含量测定
分子式： C15H22O5 分子量： 282.33 物理性状：无色针状晶体，味苦。 溶解性： 在丙酮、醋酸乙酯、氯仿、苯及冰醋酸中易溶，在乙 醇和甲醇、乙醚及石油 醚中可溶解，在水中几乎不溶。 熔点： 156-157℃ ( 水煎后分解）
见书示例12-25
谢谢！
拉斯克－ 拉斯克－狄贝基 临床医学研究奖
2011年的拉斯克－狄贝基临床医学研究奖 (Lasker DeBakey Clinical Medical Research Award) 授予了中国科学家屠呦呦，以表彰她在青 蒿素 (artemisinin) 的发现及其应用于治疗疟疾方面 所做出的杰出贡献。这一医学发展史上的重大发现， 尤其在发展中国家, 挽救了数以百万计疟疾患者的 生命。 在基础生物医学领域，许多重大发现的价值和效益 并不在短期内显而易见。但也有少数，它们的诞生 对人类健康的改善所起的作用和意义是立竿见影的。 由屠呦呦和她的同事们一起研发的抗疟药物青蒿素 就是这样的一个例子。从上个世纪90年代末以来， 青蒿素作为治疗疟疾的一线药物挽救了无数的生命， 其中大部分是生活在全球最贫困地区的儿童。
青蒿素结构式
分子式： C15H24O5 分子量： 284.33 284 物理性状：白色针状晶体，味苦。 溶解性： 在三氯甲烷中易容，在丙酮中溶解， 在甲醇或乙醇中略荣，在水中几乎不溶。 熔点： 156-157℃ ( 熔融时同时分解）
双氢青蒿素结构式
1.氧化性 1.氧化性：过氧桥的倍半萜酯类化合物 氧化性 2.旋光性 2.旋光性 ：青蒿素的比旋光度为+75°～ +78° 水解反应： 3.水解反应 3.水解反应：仅青蒿素有内酯结构，在碱性条件 下可以发生水解 4.UV吸收特性：母核不含共轭体系，紫外吸收主要是 4.UV吸收特性： UV吸收特性 末端吸收，C-10位可因取代基不同有吸收