腿色斑Chlorotic spoting
黄化Yellowing
斑驳Mottle
脉明症Vein-clearing
条斑Leaf streak
变色
腿色斑驳Chlorotic mottle
seed coat mottling
yellow dwarf
花变色—碎色症color breaking、花瓣变绿virescence
• P3实验室——研究的是高度危险的病毒，传染性很强，而且没
有疫苗，试验人员的保护措施要比P1/P2实验室严密得多；
• P4实验室——全球级别最高的生物安全实验室，研究的是极度
危险的病毒，如令人谈之色变的埃博拉病毒、马尔堡病毒，进入 这种实验室的工作人员，处于防护服的严密保护之下，连空气都 不能在实验室内呼吸，红色螺旋状管子，是专门用来向室内输送 新鲜空气的，试验人员一进入实验室，要先屏住呼吸，马上接上 这种管子，然后才能呼吸。
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• rinse off the carborundum • excess sap from the leaf with water to remove compounds that
could interfere with the infection process
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• The indicator plants are placed in the greenhouse and checked daily for symptoms.
郁 金 香 碎 锦 花 叶 病
杂色花郁金香、香石竹、紫罗兰、虞美人、唐菖蒲
Testing for Soybean Viruses with Indicator Plants
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• Hypersensitivity——Some plants are predictably sensitive to a specific virus.
病毒学研究的主要方法
• 生物学特性测定:在寄主上的反应——症状、传播等
• 病毒分离与培养：提纯与纯化、二元培养法 • 光镜与电镜观察：病毒粒子和病毒与相应抗血
清的特异免疫吸附情况
• 免疫学技术：以血清学和组织免疫化学方法检测
材料带毒情况、多克隆抗体、单克隆抗体
• 分子生物学技术：核酸分子杂交、PCR等
• If characteristic symptoms appear, we know that virus particles were present
鸡胚接种
卵黄囊接种：用5~8d鸡胚，以细长针由气室端刺入卵黄
囊，孵育后收集卵黄囊膜检查。常用于一些嗜神经病毒
羊膜腔：用12~14d鸡胚，将检材注入羊膜腔，孵育后取羊
• The hypersensitive plants are called indicator plants, and are used as a bioassay to test for the presence of virus in an unknown sample
2
• Materials : gloves, sterile cotton swabs, rinse bottle, tissue grinding bags and carborundum - silicon carbide which is us毒的初次分离
尿囊腔：用9~12d鸡胚，将标本接种于尿囊腔，孵育后取
尿囊液检查。常用于培养流感病毒和腮腺炎病毒等
绒膜尿囊膜：用10~12d鸡胚，无菌下开一小窗，将材料
滴在绒毛尿囊膜上，孵育后观察膜上有无斑点病变。常用 于培养单纯疱疹病毒，天花病毒和痘病毒
第八章
病毒学研究方法简介
生物安全实验室
根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为４级， 一级最低，四级最高。
• P1实验室——研究的病毒危险性较低，试验人员连口罩都不用
带，穿上白大褂就可以了，试验人员在这里很放松；
• P2实验室——研究的是中度危险的病原，像肝炎、流行性感冒
等等，要求戴防护性较好的口罩；
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Plant sap is made from the plant to be tested for virus by pulling off a symptomatic upper leaf
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• placing the leaf in a sterile plastic bag. • adding buffer solution to the bag. • grind the leaf tissue to release the virus particles into the
buffer.
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• sprinkle a bit of carborundum on the plant to be inoculated. • Just a light dusting is sufficient to provide enough abrasion
to introduce virus into the plant cells.
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• inoculate the indicator plant, a cotton swab is immersed in plant sap
• rub the surface of the test plant leaf firmly, but not with enough force to tear the leaf
一、生物学特性测定
• 在寄主上的反应
寄主范围、症状表现、传播方式等
• 病毒的理化性质
病毒粒子的形态、大小、对理化因子的耐受性、 体外存活期等
• 病毒接种方法
注射接种、病毒组织培养技术 植物病毒——汁液摩擦接种、昆虫介体接种、嫁 接接种、菟丝子接种法等
巨细胞病毒感染细胞的典型“猫头鹰眼”样核内包涵 体
冠状病毒感染——“非典” X线胸部检查可见肺部不同程度的片状阴影，少
数病人进展迅速，呈大片状阴影，大多数为 双侧改变，阴影吸收消散较慢。
病毒检测
TMV transmission by an Apis sp. A severe mosaic symptom on tomato leaf (TMV)