• 研究生开题报告
1 优势密码子对病毒基因表达调控影响的研究
10’
2 CHO细胞优势密码子与外源基因表达关系的研究 10’
• 全室工作总结
10’
王世峰 王志云 阮力
小鼠金属硫蛋白基因-I 在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用
殷慎敏 李令媛 茹炳根 (北京大学生命科学学院生物化学及分子生物学系，北京， 100871)
H 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 ( HGPRT ) 外源性途径(旁路途径)
Clone and characterization of a novel cytoplasm protein ICF45, involved in cell cycle regulation
答辩人： 郭德良 导 师： 何大澄 教授
ICF45 Research
Full-length cDNA 克隆及其生物信息学分析 ICF45 mRNA 在不同组织中表达分析 ICF45蛋白表达分析 ICF45 亚细胞定位研究 利用RNAi 研究ICF45细胞内功能
平板集落形成率的比较
平板集落形成率的比较
细胞克隆数（个）
60
50
48.3
47.3
40 31.5
30
20
10
0
返回
GES1
GAC1
GAC3
软琼脂集落形成比较
GES1 GAC1
返回
BG823 GAC3
GES1表现的正常细胞分裂周期
GAC3分裂期细胞
返回
一个新的细胞周期相关蛋白ICF45 基因克隆及其功能研究
10 王四清
※阮力做全室工作总结
2019年遗传免疫室工作年会报告题目
序号
题目
时间（分） 报告人
1.表达PreS1的CHO细胞中试培养工艺研究
10’ 杨芙蓉
2.含PreS1的新型乙肝疫苗中试纯化工艺的研究 10’ 李 军
3.含乙肝表面抗原S2SS1基因的质粒构建
10’ 王秀平
4.表达PreS1的CHO细胞致瘤性实验及新细胞系筛选 10’ 阮薇琴
性别
雌
组织来源
正常；卵巢
形态
上皮细胞
培养基和添加剂 IMDM，添加4mM L-谷氨酰胺， 1.5克/升碳酸氢钠， 及： 0.1mM 次黄嘌呤, 0.016mM 胸腺嘧啶, 100nM 氨甲喋呤,90%; 胎牛血清，10%。
H, 次黄嘌呤; A, 氨基喋呤; T, 胸腺嘧啶
(Hypoxanthine guznine phosphoribosyl transferase)
中国预防医学科学院病毒所2019年遗传免疫室工作年会报告题目
序号
题目
时间（分） 报告人
15 高效表达乙肝表面抗原转基因细胞系的构建及细胞系的 10
生长特性的研究
16 篮式生物反应器灌流培养工艺的研究
10
17 乙肝SS1融合蛋白纯化工艺的研究
10
18 高效表达细胞株的内外源污染因子的检查
10
19 CHO细胞基因表达中不同扩增系统（GS及dhfr）比较的研究 10
关键词： 金属硫蛋白(MT)；CHO-dhfr-细胞；细胞转染；基因表达 ；顺铂
细胞名称
CHO/dhFr-仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷
描述 该细胞为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。在没有HT（次黄嘌呤-胸腺嘧啶）时细 胞会死亡，细胞培液中加氨甲喋呤可以防止对药物低抗性的回变细胞的生长。
动物种别
中国仓鼠
第五部分 利用RNAi 研究ICF45 细胞内功能
1. 稳定沉默ICF45基因表达的克隆细胞株建立 2． 细胞形态和核变化 观察 3. 细胞生长和增殖能力 4. 细胞周期和DNA含量变化 5． 细胞凋亡率 6． p53表达 7. Centrosome and spindle 8. 微丝形态变化
二、动物细胞培养在生产 中的应用
流式细胞光度术（FCM）分析细胞周期 细胞间接免疫荧光实验（IEF） 免疫印迹实验（western blot）
细胞转染及稳定表达细胞株的筛选
GES1细胞G418筛选浓度的选择 （300ug/ml） 稳定表达细胞株的筛选
GAC1
GAC3
细胞生长曲线的测定
OD 570
0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
时间（天）
GES1 GAC1 GAC3
返回Leabharlann OD 570血清依赖性试验结果
0.5 0.45
0.4 0.35
0.3 0.25
0.2 0.15
0.1 0.05
0 1234567
时间（天）
GES1 10% GES1 0.5% GAC1 0.5% GAC3 0.5%
杨芙蓉 张陵林 宗芳 王文 陈红 阮薇琴 王志云
※研究生开题报告
• HPV16治疗性疫苗的研制 （博士）
10 骆卫锋
2 CpG对重组活疫苗免疫效果影响的研究（博士）
10 许洪林
3 EB病毒膜抗原基因工程疫苗的构建及其免疫效果的研究（博士）10 魏 滨
4 CpG对基因工程乙肝疫苗免疫效果影响的研究（硕士）
摘要： 将小鼠的MT-I基因插入pSV2-dhfr质粒的EcoRI位点,构建了具有SV40和MT双启 动子并正向插入MT-I基因的表达载体。用改良的磷酸钙/DNA沉淀法将表达载体 导入CHO-dhfr-细胞内，用不含次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T) 的选择培养基筛选 出稳定表达MT阳性克隆D-22，经检测10~6细胞的 MT 表达量约为1.8 μg，D22细胞对Cd2+浓度抗性较之CHO-dhfr-细胞高 14倍。为了研究金属硫蛋白对正 常细胞所具有的保护作用，将不同浓度的顺铂分别处理无 MT表达的CHO-dhfr细胞和有MT表达的D-22细胞。实验发现顺铂对D-22•细胞和CHO-dhfr~ 细胞 50%生长抑制浓度(IC50)分别是0.145 μmol/L 和0.04 μmol/L 。上述研究表明 MT 对正常细胞有一定的保护作用，因而通过诱导正常细胞提高MT的表达量， 同时使用MT阻断剂阻断肿瘤组织的MT合成，这样可能会为治疗某些顽固肿瘤 开辟一条新途径。
论文题目： 中心体蛋白centrin在人胚胃上皮细胞
GES1 的细胞增殖和癌化中的作用
答辩人：陈 娴 指导导师：王永潮 教授
实验方法
构建反义重组质粒 转染细胞并筛选细胞株 半定量RT-PCR（semi RT-PCR）
细胞生长活性测定 细胞生长曲线测定 血清依赖性实验 平板集落形成率测定 软琼脂集落形成比较