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3种方法对尿标本中红细胞与白细胞检测结果比较

2结果
式细胞分析仪、配套试剂、配套质控液;长春迪瑞实业公司生产 的H一300尿液分析仪、配套试剂、配套质控液;Olympus普通光 学显微镜;河北保定白洋离心机厂生产的白洋离心机。 1.2标本来源随机留取本院门诊患者1 109份尿液标本,其 中男486份,女623份,收到后2 h内检测完毕。 1.3质控Sysmex公司提供的原装质控液,每天对UF一1000i 尿流式细胞分析仪进行质控,长春迪瑞公司提供的原装质控 液,每天对H-300尿液分析仪进行质控,结果均在控。 1.4方法将门诊患者采集的尿液标本分别倒人2支洁净干 燥的离心管,各10 ml。一管用于UF一1000i法检测;另一管用于 尿干化学法检测,完毕后,用白洋离心机400 g离心5 min,离心
万方数据

输血传染【2 J。感染与社会经济、卫生条件有关,经济不发达、卫 生条件差的地区感染率高。大多数的初次感染发生在幼儿时 期,且多数感染后无明显症状,或引起轻症咽炎和上呼吸道感 染,但终生携带病毒。EBV感染后,在口咽部和涎腺的上皮细 胞内增殖,然后感染B淋巴细胞,B淋巴细胞大量进人血液循 环而至全身症状,并可终生潜伏在人体淋巴组织中。当机体免 疫功能低下时,这些潜伏在淋巴组织中的EBV再度活跃而形 成复发感染‘3 J。临床症状以发热、咽喉痛、肝脾和淋巴结肿大、 外周血淋巴细胞增多并出现单核样异型淋巴细胞等为其特征。 由于其症状、体征的多样化和不典型病例在临床上逐渐增多, 给诊断治疗带来一定困难I 3l。因此,准确的检测EBV感染,以 区别其它感染原因(巨细胞病毒、腺病毒、肺炎支原体、风疹病 毒均可有类似症状)所致疾病,就显得非常重要。临床上检测 EBV的方法有病毒分离、血清学试验、抗体检测、荧光定量PCR 等。对于EBV急性感染如传染性单核细胞增多症,最早出现
doi:10.3969/j.issn.1002—7386.2011.08.083
・临床检验・
3种方法对尿标本中红细胞与白细胞检测结果比较
杨雪梅齐红梅赵景李宝琴 【关键词】
UF一1000i尿流式细胞分析法;5-4e.学试带法;显微镜镜检法;红细胞;白细胞
R 446.12
【中图分类号】
【文献标识码】

【文章编号】
1254
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于临床标本中的是病原体本身,采用高灵敏度高特异性的实时 荧光PCR进行检测,可以在感染的早期明确病因旧1。用于检 测EBV—DNA可有鼻咽分泌物(咽拭子)、血液、尿液等。但EB 病毒大量存在于唾液腺及唾液中‘3 o,且早于血液等其它体液, 因此,咽拭子标本(鼻咽分泌物)更好,阳性率更高,且标本采集 方便,易被患儿及家长接受。本文的检测结果就证明了这一 点。另外,对既往有EB病毒感染史者,出现类似症状时,要排 除EB病毒感染复发。 参考文献

丛玉隆.尿液沉渣检查标准化的建议.中华检验医学杂志,2002,25:
249-250.
2杨晓春,郝维敏,刘杰.尿沉渣分析系统与干化学检测尿红细胞白细 胞的临床应用评价.临床和实验医学杂志,2009,8:82-83. 3马金群,张爱民,张春和,等.一种尿液有形成分检验的新方案.河北 医药,2009,31:2153-2154. 4饶沃,冯泰宝,陈振宇,等.鳞状上皮细胞对尿液分析仪检测白细胞 结果的影响.现代临床医学生物工程学杂志.2004,10:61-64. (收稿日期:2010—11—07)
作者单位:050031 石家庄市,河北医科大学第一医院检验科(杨
对尿红、白细胞的检测,UF—1000i法与镜检法对红、白细胞 的检测差异无统计学意义(P>0.05),而二者与干化学法差异 均有统计学意义(P<0.05)。见表l。 3讨论 以镜检法检测结果为参照标准,UF・lOOOi法和干化学法均 存在假阳性与假阴性结果。 3.1红细胞本实验中,UF.1000i法假阳性17份,假阳性率 1.96%,其中尿中存在草酸钙结晶10份,尿中存在酵母菌孢子 4份,尿中存在大量细菌2份,原因不明l份。虽然UF一1000i 尿流式细胞分析仪经过35%加温防止尿液中结晶的干扰,但是 并不能完全避免结晶对尿红细胞的干扰,部分草酸钙结晶呈椭
1002—7386(201 1)08—1254—02
尿液检查对泌尿系统疾病的诊治和疗效观察具有很高的 临床应用价值。但是各种仪器和检测方法都有自身的优点和 局限性,常出现检测结果不完全一致的现象,给临床医生判读 带来困难。为此,本文对1 109份门诊尿液标本用UF一1000i尿 流式细胞分析仪法(UF—1000i法)、H.300尿液分析仪(尿干化 学法)、显微镜检法(镜检法)3种方法同时检测,并将结果进行 比较,报告如下。 1资料与方法 1.1仪器与试纸带 日本Sysmex公司生产的UF一1000i尿流
圆形,其形态、大小和红细胞相似,UF-1000i法不能通过染色等 手段加以区分,需显微镜法观察二者折光性的差异,进而将尿 中红细胞与草酸钙结晶加以区分;酵母菌孢子和红细胞大小、 形态均相似,其前向散射光强度接近,故易被误认为红细胞;尿 中存在大量细菌时,若细菌以分散状态存在,UF-1000i尿流式 细胞分析仪可以通过细菌染色,在细菌计数通道计数,不会干 扰尿中红细胞的检测,若细菌成堆存在于尿液时,有时会被误 认为红细胞。UF—1000i尿流式细胞分析仪的假阴性7份,假阴 性率2.89%,主要是由于该方法是对经过染色的标本进行检 测,当尿液放置时间过长,红细胞破坏,释放血红蛋白而不易着 色,致使结果出现假阴性。干化学法假阳性9l份,假阳性率 10.50%,对此91份尿液进行肌红蛋白、不耐热酶、过氧化物酶 检测,其中为含有过氧化物酶的菌尿45份,尿中含有不耐热酯 酶18份,尿中含有肌红蛋白15份,其余原因不明。尿干化学 法检测红细胞是通过红细胞内的过氧化物酶样活性的物质与 试纸带发生化学反应显色,以颜色的深浅进行半定量分析,以 上这些物质均具有类似过氧化物酶的氧化特性,可与试纸模块 发生反应,产生颜色变化,导致假阳性。尿干化学法检测红细 胞的假阴性17份,假阴性率7.02%,主要是由于高浓度VitC 所引起,VitC为还原性物质,可以竞争性的与红细胞内的过氧 化物酶发生氧化还原反应,导致假阴性结果¨J。 3.2白细胞UF—1000i法假阳性15份,假阳性率1.89%,镜 检可见小圆上皮细胞10份,尿中可见阴道毛滴虫2份,原因不 明3份。小圆上皮细胞和阴道毛滴虫经过染色后,形态、大小 及散射光强度和荧光强度和白细胞均相似,不易区分,故易被 误认为白细胞。UF.1000i法检测白细胞假阴性为10份,假阴 性率3.18%,主要由于白细胞聚集或附着于粘液丝所致。尿干 化学法检测白细胞假阳性8份,假阳性率I.0l%,主要因为尿 中混入阴道分泌物,含有大量鳞状上皮细胞,上皮细胞中含有 硫酸脂酶和磷酸脂酶,与中性粒细胞酯酶化学性质相似H』,可 造成千化学假阳性结果,其次pH值>8或高胆红素尿也会出 现假阳性结果。尿干化学法检测白细胞的假阴性率较高,达 34.08%,主要是由于干化学试纸带存在方法学的局限性,只能 检测含有粒细胞酯酶的中性粒细胞,而不能检测不含该酶的淋 巴细胞和单核细胞,其次有些尿液留取时间可能过长,中性粒 细胞酯酶失活,干化学法未能测出,再次当尿中存在先锋霉素、
庆大霉素或高蛋白尿时,也可导致假阴性结果。 式细胞
技术与核酸染色技术相结合,通过测定前向散射光强度,侧向 散射光强度,侧向荧光强度等参数来检测尿液有形成分的大 小、长度、胞内物质,从而区分各种有形成分,如红细胞,白细 胞,上皮细胞等。尿液无需离心,避免细胞因受力过大而破碎, 操作简单,结果重复性好。干化学试带法检测红细胞的原理是 细胞内的过氧化物酶样活性的物质可与试纸带发生化学反应 显色,以颜色的深浅度换算出红细胞个数,为半定量分析,干化 学试带法检测白细胞的原理是吡咯酚酯在中性粒细胞酯酶的 水解作用下,产生游离酚,游离酚与苯基重氮盐偶联,生成紫色 偶氮,以颜色的深浅换算出白细胞个数。该法具有操作简单, 快速的优点。显微镜镜检法具有直观准确的特点。但是,目前 没有任何一种尿液检测方法是没有缺陷的,UF一1000i尿流式细 胞分析仪对红、白细胞检测易受有形成分如结晶、细菌、类酵母 细胞等的干扰;干化学试带法易受多种酶类的干扰;虽然显微 镜镜检法被认为是金标准,但是也可能由于尿液在膀胱停留时 间过长或放置时间过长,细胞破裂;或者细胞在肾脏及泌尿道 被破坏,造成镜检假阴性。故我们应该结合临床综合分析,3种 方法联合应用以减少尿中红、白细胞假阳性率和假阴性率,为 临床提供快速准确的尿液检测结果。 综上所述,UF.1000i法、干化学法与镜检法,三者检测尿液 红、白细胞时各有优缺点,可以利用干化学法的简便快速性进 行筛选,当干化学法与应用UF.1000i分析仪结果一致阴性时, 可以不做显微镜镜检,减少检验人员的劳动强度,当二者不符 或者出现阳性结果时,需显微镜镜检做最后确认,三者联合对 尿液标本进行分析,给临床提供最可靠的信息,提高临床的诊 治水平。 参考文献
后倒出上清液,残留0.2 ml尿沉渣…,混匀,进行尿沉渣并记 录结果。 1.5检测标准UF一1000i法:以红细胞<25/卜1为阴性,白细 胞<30/p.1为阴性,超出参考范围上限为阳性;镜检法:以红细 胞<1/HP为阴性,白细胞<3/HP为阴性,超出参考范围上限 为阳性;尿干化学法:以干化学仪判定的阴、阳性为准。3种方 法均以镜检法为参照标准。2 J,UF.1000i法结果阳性或干化学结 果阳性而镜检法结果阴性为假阳性,UF一1000i法结果阴性或干 化学结果阴性而镜检法结果阳性为假阴性。 1.6统计学分析应用SPSS 11.0统计软件,计数资料采用 x2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
雪梅、赵景、李宝琴),精卫科(齐红梅)
万方数据
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表l 3种方法对尿中红细胞、白细胞的检测结果
n=1
1255
109
注:阳性率=(阳性数/总数)X100%;假阳性率=(诊断假阳性敬/金标准真阴性数)×100%;假阴性率=(诊断假阴性数/金标准真阳性数)X100%;与干化学法比 较.‘P<0.05
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