（1）技术的难度
微生物细胞培养
（2）专业的切合角度
（3）关注热度和应用价值
细
细
胞
胞
培
工
养
程
细
细
胞
胞
培
工
养
程
细胞工程是现代生
物技术各环节中承 上启下的纽带。
细胞培养技术是细 胞工程的最基础、 最核心的技术。
细
细
胞
胞
培
工
养
程
动物细胞培养的发展简史
1907年：哈里森（Harrison），蛙胚神经组 织，单玻片悬滴培养法创始人。
1 细胞分裂
2 细胞分裂
细胞生长 5
3
细
胞
4
分
化
细胞分裂、生长、分化的结果
分裂：使细胞数目增多 生长：使细胞体积增大 分化：使细胞种类增多
细胞有寿命吗? 细胞能无限制的分裂吗?
细胞的衰老：
一般指复制衰老，即体外培养的 正常细胞经过有限次数的分裂后，停 止分裂，细胞形态和生理代谢活动发 生显著改变的现象。
生研 产究
医学诊断与治疗
（1）疾病诊断
羊膜穿刺术
（2）细胞植入治疗
地中海贫血
骨髓细胞
（3）药物效应检测
检测有毒物质,把致癌、致畸形 的物质加入培养液，对培养出 的细胞进行染色体的检验,进而 推断物质的毒性；
动物筛选
细胞筛选 高效、经济、特异性
生物制品的生产
动物细胞作为表达宿主，可生产蛋白质
这些都已经成为现实……类克的隆生抗物体制；品，病毒疫苗、干扰素、单
衰老细胞的主要特征
形态：细胞水分减少导致细胞萎缩， 体积变小。
结构：核增大，色素积累， 染色质固缩。
功能：新陈代谢速度减慢， 呼吸速度减慢 （线粒体功能退化、形变） 有些酶的活性降低 （酪氨酸酶） 细胞膜通透性功能改变。
遗传物质控制
自动死亡 (细胞凋亡)
细胞死亡
最主要的一种方式，受 Bcl-2家族、caspase家 族等基因控制的主动的 生理性细胞自杀行为。
生长
生长
子细胞从周围吸收营养， 合成自身的组成物质、 不断地长大的过程。
生长的 结果？
3、细胞的分化
在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生 的后代，在形态、结构、生理功能上发生稳定 差异的过程，叫细胞分化。
细胞分化的结果： 产生了各种不同形态、功能的细胞，它们 构成了生物体的各种结构，以适应环境。
1923年，卡雷尔（Carrel），卡氏瓶培养法， 细胞组织生存空间的开拓者。
1951年， 厄尔（Eagle） ，体外培养动物细 胞的人工合成培养基开发者。
波米拉（Pomerat），悬浮培养。 1957年，杜尔贝科（Dulbecco），胰蛋白酶 消化单层细胞培养法先行者。
动 生 生临 物 物 物床 育 制 基医 种 品 础学
荷兰人列文虎克（Antoni
von Leeuwenhoek,16231723）用自磨镜片做成显 微镜第一次观察了活的细 菌和原生动物。
19世纪中期细胞学说建立
施莱登 施旺
19世纪中期细胞学说建立
细胞学说的要点： 1、生物体都是由细胞构成； 2、细胞由分裂产生新细胞； 3、细胞是生物体结构和功能 （生命活动）的基本单位。
细 的细胞核
的细胞核
胞
较小
较大
的 本
只有核糖体一种 细胞器
多种复杂的细胞器
质
无染色体，有 有染色体（DNA和蛋
差
DNA分子
白质构成）
异
细胞的多样性
圆球形、 多面体形、 纺 锤形、长梭形、 管状、 长柱形、 分枝状、 不规 则性 。
巨型乌贼 神经细胞
蕨藻 鸵鸟卵
卵细胞
支原体
动、植物细胞的结构及区别
细胞培养技术与应用演示 文稿
（优选）细胞培养技术与 应用
第一节
细胞培养技术概述
细胞培养：将组织分散成单细胞，使其
在类似于体内生存环境、适宜的体外条件 下的生存、生长并维持其结构与功能的技 术。
培养过程中细胞不再形成 组织。
培养对象（培养物）是单 个细胞（群）。
课程内 容
动物细胞培养 植物细胞培养
动物个体内不同类型和寿命的细胞
I. 接近于动物的整体寿命的细胞，如神经元和肌 肉细胞等。在胚胎发育终了时，这些细胞不再增加数
量，在个体的生长期中它们可增长细胞体积，以使其与 躯体成比例。它们随着个体衰老而衰老，或者由于这些 细胞的衰老、死亡引起个体死亡。
II. 缓慢更新的细胞，它们的寿命短于动物的平均 寿命，如肝细胞，胃壁细胞等。
施莱登 施旺
非细胞结构:
病毒：HIV 、SARS、 流感病毒、噬菌体等
生 物
蓝藻
原核细胞：
细菌 放线菌 支原体 衣原体
细胞结构：
立克次氏体
真核细胞：
所有动物 除蓝藻外的植物 真菌：如蘑菇、 酵母菌、霉菌
原
核
细
胞
与 真
原核细胞
核
细
胞
的
本
质
差
异
真核细胞
原
核
细
胞
与 真 核
原核细胞
真核细胞
无以核膜为界限 有以核膜为界限
中心体
细胞质 内质网 核膜 细胞核 核仁 线粒体 高尔基体 核糖体 细胞膜 溶酶体
液泡 叶绿体 细胞壁
细胞的分裂
一个母细胞经过一 系列复杂的变化后， 分裂成两个子细胞 的过程，叫做细胞 分裂。
细胞分裂的意义？
受精卵 两个子细胞 四个子细胞
细胞团
个体数目增多
单细胞生物
细胞数目增多
多细胞生物
2、细胞的生长与生长周期
III. 快速更新的细胞，如皮肤的表皮细胞、红细胞 和白细胞等。
Hayflick界限
细胞（至少是培养的细 胞），不是不死的、而 是有一定寿命的。它们 的增殖能力不是无限的， Leonard Hayflick (1928~ ) 而是有一定界限的。
正在检查他培养的WI-38细胞
体外培养细胞增殖与个体寿命的关系
被动死亡 (细胞坏死)
外界因素
细胞凋亡过程
凋亡的起始：细胞表面的特化结构如微绒毛消 失，细胞间接触的消失，但细胞膜依然完整； 线粒体大体完整，但核糖体逐渐从内质网上脱 离，内质网囊腔膨胀，并逐渐与质膜融合；染 色质固缩，形成新月形帽状结构等形态，沿着 核膜分布。 凋亡小体形成：核染色质断裂为大小不等的片 段，与某些细胞器如线粒体一起聚集，为反折 的细胞质膜所包围。细胞表面产生许多泡状或 芽状突起，逐渐形成单个凋亡小体。 凋亡小体逐渐为邻近的细胞吞噬并消化。
疫苗Leabharlann 激素干扰素单克隆抗体
鱼类病毒学：病毒的分离、鉴定以及 病毒疫苗的制备
鱼类细胞毒理学：评价样品对鱼类细 胞的毒性等
水产生物基础理论
鱼类免疫学
第二节
细胞培养的细胞生物学知识
英国科学家胡克 （R.Hook,1635-1703),27 岁成为英国皇家学会领 导成员, 发表对木栓的观 察，命名Cell。
物种
成纤维细胞传代数 个体最长寿命（年）