2，4一二硝基苯肼分光光度法
原理： 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被 氧化成脱氢抗坏血酸 反应式：
2，4一二硝基苯肼分光光度法
pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂，形成二酮古 洛糖酸 二酮古洛糖酸
H H O C H H O C C H O O C O C O C O O H
H H
马占玲等用钼蓝比色法测定青椒中还原 型维生素C含量的基本原理和方法。 测定波长839 nm，维生素C含量在 0．004～0．024 mg／mL范围内呈 线性关系，回收率为97．2％。该方 法简单、快速、准确。
钼蓝比色法
逯家辉等提出了一种测定维生素C的新方
法，它是基于Folin B试剂与抗坏血酸在 pH=3的三氯乙酸酸性介质中反应生成脱 氢抗坏血酸，反应产物在910 nm波长处 有最大吸光度进行定量分析。该方法的 线性范围为0～50．0μg／mL，相关系数 r=0．999 86，回收率为98．12％～ 102．15％。
Байду номын сангаас 薄层扫描法
原理
维生素C具有 较强还原性，可使蓝色染料2，6-二
氯靛酚钠定量地还原成无色的酚亚胺，而本身被
氧化成去氢抗坏血酸，利用此特征进行薄层扫描 法测定含量。
结束语

总之，维生素C的测定方法很多，各种方法 各有特点，常用的滴定法方法简单，但在 滴定有色物质终点不易判断，分光光度法 操作费时，高效液相色谱法是目前发展较 快的一种方法，方法灵敏，选择性好，有 较好的发展前景。毛细管电泳n51是近几年 新兴的分析方法，具有效率高、分析时间 短、样品处理简单等特点，但有待于进一 步完善。
——差示旋光法
选定pH为 2.2和6.2
3 高效液相色谱法测定维生素C
3.1
HYPERSIL—C8色谱柱
法 3.2 VenusilXBP —C18柱法 3.3 其他方法
HYPERSIL—C8色谱柱法
采用HYPERSIL—C 8色谱柱，用 0．1％低浓度的草酸作流动相，陈 昌云等采用0．05 mol／L磷酸二氢 钾缓冲液：甲醇=80：20 (v／v)作 流动相。流速为1．0mL／min，二 极管阵列检测器，检测波长为254 nm。
维生素C （氧化型）
2,6-二氯酚靛酚 （还原型）

2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色， 在酸性溶液中呈红色，被还原后红色消失。
碘量法
原理：由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的
还原性，能被碘氧化，用碘滴定VC EC6H6O6/C6H8O6=0.18 ,EI2/I-=0.535 终点
靛酚染料。 维生素C具有还原性 的烯二醇基，我们通 过氧化还原滴定来测 定维生素C
OH C
OH C
O C HO HO H HO C C C C H O
Cl
O Cl
O O
C
Cl
OH Cl
C C HC
O
N
N
O
====
+
+
HO
OH
CH CH2OH
OH
CH2OH
维生素C （还原型）
2,6-二氯酚靛酚 （氧化型，粉红色）

电位滴定法

右图：电位滴定法基本 仪器装置

计算式：(与碘量法相
同) Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m (vc ) *100%



优点：
解决了滴定分析中遇到 有色或浑浊溶液时无法 指示终点的问题
2 分光光度测定维生素C
2.1 2，4一二硝基苯肼分光光度 法 2.2 钼蓝比色法 2.3 其他方法

谢词

本文是在徐洁老师的精心指导下独立完成 的。为此，我首先要感谢徐老师，她对我 的论文提出了实践性的建议，徐老师教学 严谨，踏踏实实，对我的影响极大。从她 身上我知道了该如何对待自己的工作，该 如何做好自己的工作，为我以后踏上工作 岗位有很大的帮助，使我对工作有了更新 的态度，在以后的学习工作中我会加倍努 力以回报老师的辛勤。再次感谢徐老师的 言传身教。
维生素C的结构式
O C HO HO C C O
维生素C：六碳的多 羟基内酯
H C HO C H
CH2OH
测定方法
滴定法测定 分光光度测 维生素C 定维生素C
高效液相色谱法 测定维生素C
1 滴定法测定维生素C
1.1 2，6一二氯靛酚法
1.2 微量滴定法
2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量
其能还原2,6-二氯酚
维生素C含量测定 方法综述
摘要
目前研究维生素C测定方法的报 道较多，如滴定法、光度分析 法、高效液相色谱法等，各种 方法各有特点。特别是高效液 相色谱法是近年来发展较快的 一种方法。本文对近年来有关 维生素C的测定方法进行了综述。
关键词
维生素C 滴定法 光度分析法 高效液相色普法等
概述
维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子结构 最简单的维生素。维生素C有防治坏血病的功能， 所以在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C能保 持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒 作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、 蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、 柑橘等食品中含量尤为丰富。准确测定维生素C的 含量，对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的 意义。近年来报道的测定方法主要有滴定法、光 度法、高效液相色谱法等。
终点：淀粉为指示剂，溶液出现稳定的蓝色即为
反应式：
碘量法

碘的浓度由已知浓度的Na2S2O3标准溶液标定 反应式： 计算式： Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc ) *100%
I 2 2S 2O32 2I S 4O6 2

碘量法
• 注意 ！ 测定时：加HAC使溶液呈弱酸性 • 原因: • (1) Vc还原性很强，在空气中很容易被 氧化，在碱性介质中更甚 • (2)I2在碱性介质中会发生歧化反应 • 加HAC可减少VC的副反应，避免实验 误差
参考文献
[11]王爱月，张向兵，李发生．高效液相色谱法测定食品 及保健品中维生素C含量的研究[J】．中国卫生检验杂志， 2006，16(10)：1175-1176． [12]雍莉，等．高效液相色谱法快速测定保健食品和果蔬 中的VitC[J]．现代预防医学，2005，32(3)：247—248． [13]胡志群，王惠聪，胡桂兵．高效液相色谱测定荔枝果 肉中的糖、酸和维生素C[J]．果树学报，2005，22(5)： 582． [14]张秀梅，等．高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C 含量[J]．福建果树，2oo7，140(1)：20—21． [15]杨建洲，张荣莉．毛细管区带电泳分析果蔬中的维生 素C含量[J]．分析化学，2oo2，30(1)：120
电位滴定法

原理：根据滴定过程中电池
电动势的变化来确定反应终 点. Pt为指示电极，甘汞作参比 电极 E池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I+k(常数)


电位滴定法
原理(具体来说:)
随着滴定剂的加入，由于发生化学反应， 待测离子浓度将不断变化； 从而指示电极电位发生相应变化； 导致电池电动势发生相应变化； 计量点附近离子浓度发生突变；引起电位的 突变，因此由测量工作电池电动势的变化就 能确定终点。
参考文献
[1]吴春艳．水果中维生素C含量的测定及比较[J]．武汉理 工大学学报，2oo7，29(3)：90—91． [2]王元秀，庄海燕．微量滴定法测定猕猴桃中维生素C的 含量[J1．济南大学学报(自然科学版，2001，15(4)：374， [3]张颖，等．不同产地枸杞子中维生素C含量测定[J]．中 国医院药学杂志，2004，24(8)：500—501． [4]袁叶飞，甄汉深，欧贤红．分光光度法测定大枣中的 维生素C含量[J]．安徽中医学院学报，2006，25(2)：40-41． [5]马占玲，等．青椒中还原型维生素C含量的测定[J]．渤 海大学学报(自然科学版)，2006，27(2)：111-113．

参考文献


[6]逯家辉，等．F0lin B分光光度法测定蔬菜中维生素C的 含量[J]．分析检测，2oo5，26(8)：171—172． [7]王艳颖，等．高效液相色谱法测定草莓中维生素C含量 [J]．大连大学学报，2006，27(2)：21—22． [8]姜波，范圣第，刘长建，花艳红．菠萝中维生素C的高 效液相色谱分析[J]．大连民族学院学报，2003，5(1)： 52—53． [9]刘长建．青椒中维生素C的高效液相色谱分析[J]．大连 轻工业学院学报，2004，23(3)：229—230． [10]陈昌云，李小华，刘莉莉．高效液相色谱法测定蜜柚 中维生素C的含量[J]．化工时刊，2oo7，21(8)：19— 21．
2, 4一二硝基苯肼分光光度法
• 脱氢抗坏血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝
• •
基苯肼生成可溶于硫酸的脎 脎在500nm波长有最大吸收 脎的结构：
H
R
R
C C
N N
N N H
分光光度法
样品溶液与VC标准溶液按上述方法同样处 理 500nm处测吸光度 下图：721型分光光度计
钼蓝比色法
3.2 VenusilXBP—C18柱法
系统采用VenusilXBP—C18柱 (4．6x250 mm，5μg)，用0．2％ 的偏磷酸的水溶液作为流动相，流 速1 ml／min，检测波长240 nm； 维生素C浓度在0．1-1．0 mg／ mL范围内有良好的线性关系。该 方法回收率99．89％，标准偏差 0．91，操作简便、灵敏、可靠