采 自吉 林 省磐 石 市 发病 雏 鹅 。 １ ． 养 基 ．２培 １ 购 自北 京 鼎 国生 物技 术有 限责 任公 司。
１ ． Ｐ Ｋ试 剂 盒 ．３ Ｃ Ｉ
记。如Ｐ Ｒ Ｃ 仪无热盖功能 ， ０ Ｌ 取５ 矿物油覆盖在混合液上。 反应条件 ： Ｃ 扩增仪 中 ， 在Ｐ Ｒ 启动热 盖功能 ， 下述 程序和 按
２ ２ Ｄ 胶 成 像 系统 。 ００ 凝 １２ 方法 ＿
１． ． １细菌 分 离 ２
１ ． 油乳 荆疫 苗制 作 ．６ ２
Ｉ ．１ ．６ 灭活 将 检 测 合 格 的 胚 液 以４ 纱 布 和 １ ８ 目铜 纱 网过 滤 ２． 层 层 ０
与无菌瓶 中， 滤液按体 积比（ ／ ） ｖ、 加入 ｌ ， ０％的甲醛溶液 ， 边加边
条 件进 行 Ｄ Ａ 增 ：６℃预变 性 ５ｍ ９ 变 性 ４ ，４ｏ退 火 Ｎ 扩 ９ ｍ；４ Ｃ ０ｓ５ Ｃ
购 自大连 宝 生物 工 程 公 司 。 １ ． 阳性 对照 毒株 ．４ １
小 鹅 瘟 和鹅 病 毒 性 肠 炎 地 方分 离 株 ， 由吉林 省 畜牧 兽 医科 ４ ，２ｏ延伸４ ３４ 循环 ；２℃延伸１ ｍｉ； 保存。 ． ５ ７ ｓ Ｃ ０ ，ｏ ＂ ｓ ７ ０ ｎ４ｏ Ｃ
炎病 毒 两 种病 毒 ， 用此 两种 病 毒研 制成 油乳 剂 灭 活 苗 ， 果 表 明 该 油乳 剂灭 活 苗 对 小 鹅 瘟 和 鹅 病 毒 性 肠 炎 的预 防和 治 并 结
疗效 果 是 十 分理 想 的 。
关键 词 ： 小鹅 瘟 ； 病 毒 性 肠 炎 ； 治 ； 乳 剂 灭 活 苗 鹅 诊 油 中 图分 类 号 ： １ ． ￥８ ５７ 文献 标 识 码 ： Ｃ 文 章 编 号 ：０ — ７６ ２ １ Ｏ 一 ０ ５ ２ １ ０１ ０ ９（ Ｏｌ ） ｌ ０ ９ —
究结果报告如下 。
ｌ材料 与方 法
１１材 料 ． １ ． 料 ． １病 １
后收获尿囊液 ， 冷冻保存 ， 注明收获 日期 、 毒种代次。
１． ．４引物 设 计 （ １ ： ２ 表 ）
１ ． Ｐ ． ５ ＣＲ检 测 方 法 ２
采 用 ５ Ｌ 应 体 系 ，在 ０５ｍ 的 Ｅ ｐｎ ｏ 心管 中 依 次 ０ 反 ． Ｌ ｐ ｅ ｄ璃 加 １ Ｐ Ｒ 增 缓 冲 液５ Ｌ ２ ｍｏＬｄ Ｔ ｓ Ｌ ０× Ｃ 扩 、． ｍ ｌ Ｎ Ｐ ５ ／ ２ 、灭 菌蒸 馏 水 ３ Ｌ ２Ｕ ＬＴ ｑＤ Ａ聚 合 酶 １ Ｌ Ｐ 或 Ｐ Ｌ Ｐ 或 ５ 、 ／ ａ Ｎ 、Ｉ ３１ 、２ Ｐ Ｌ 待 检 样 品 Ｄ Ａ 阳 性 、 白对 照 ５ Ｌ 混 匀 并 作 好９ ６ 吉林 省磐 石 地 区大 批 雏 鹅 出现 死 亡 ， 初 经
采取 发病 雏 鹅 的 肝 、 、 ， 缓 冲盐 水 作 ５ 脾 肾 用 ％乳 剂 ， 入 青 加
步临床诊 断发现与小鹅瘟相似 。我们采取在开产前对其种鹅注 霉 素 和 链霉 素各 ２ ０ ／ ， 离 心 后取 上 清 液 备用 。 ０ ＵｍＬ 低速 ０ Ｉ
射 小 鹅瘟 疫 苗 ， 是 效 果 并 不好 ， 应 用 小 鹅 瘟 高 免 血 清 进 行 １ ． 毒 培 养 但 而且 ．３病 ２ 预 防 和治 疗 效果 很 不 理想 。为 了弄 清病 因 ， 到 有效 的防 治措 找 将 种 毒 用 灭 菌 生 理 盐 水 ｌ倍 稀 释 后 ，接 种 于９～１ 鹅 Ｏ １ １ ３龄 孵 育 （ 翻蛋 ）取 ９ —１８ 之 问死 亡 的鹅胚 ， 不 ， ６ ６ｈ 经４℃冷 藏６～１ ２ ｈ 施 ， 所 对病 死 雏 鹅 进 行 了病 原 分 离 鉴 定 和 灭 活 苗研 制 ， 将 研 胚 ， 我 现 每胚 尿囊 腔接 种 ０ Ｌ 接 种 后封 闭针 孑 ， ７ ７ ．ｍ 。 ２ Ｌ 放３ ～３ ． ５℃继 续
学研究院（ 原吉林省兽 医科学研究所 ） 自行分离 、 鉴定 、 保存。
１１ 仪 器 ．． ５
取 ８ ＬＰ Ｒ 增 产 物 与 ２ Ｌ６Ｘ Ｌａ ｉｇ ｕ ｅ溴 酚 蓝 混 Ｃ 扩 ｏｄｎ Ｂ ｆ ｒ 匀 ， 到 ｌ Ｌ 脂 糖 凝 胶 中 进 行 电泳 ， 胶 中 溴 化 乙 锭 浓 度 为 加 Ｏ ，琼 ｇ 凝
以无菌操作从发病雏鹅肝 、脾 、脑取样接种 于普通琼脂平 搅 拌 使 胚 液 中 甲醛 的最 终 浓 度 为２ ， 后 将 灭 活 胚 液倒 入 另 一 ‰ 之 板、 巧克力琼脂平板 、 麦康凯琼脂平板 ， 分别 于３ ７℃厌氧和３ ７℃ 无菌 容 器 中 ，７℃作 用 １ ８ ， ｈ ３ ２ 每２ 震荡 一 次 ， 出后 ２ ８ｏ静 ｈ 取 Ｃ
＠ 阅 毒 学 赭占 外 杖一 禽
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姆 和 毒 基 、染 ，－ 镑 豳 谚 藏 鹅 旃 冷 移 惑 薅
孙 健 ， 文智 ， 强 ， 毛 孙 白翠 ， 王锴 桦 ， 淑 贤 ， 洪泽 苑 邵
（ 吉林 省 畜 牧 兽 医科 学研 究 院 家禽 研 究 所 ， 林 长春 １ ０ ６ ） 吉 ３０ ２ 摘 要 ： 患病 雏 鹅 的 肝 、 、 用 脾 肾作 病 料 分 离病 毒 ， 临床 诊 断 和 实验 室诊 断 ， 明 了 分 离 病 毒 为 鹅 细 小 病 毒 和 鹅 病 毒 性 肠 经 证
Ｐ Ｒ仪 Ｈ Ｂ Ｉ Ｓ ０ ２ ０ ， Ｙ 一 Ｂ 稳 压 流 电 泳 仪 ｏ ５ ｇ ， 泳 缓 冲液 为Ｔ Ｅ， ５ｖ 压 电 泳 ３ ｉ， 凝 胶 Ｃ Ｙ ＡＤ ＨＢ Ｐ ５ ２ 型 Ｄ Ｙ ８ 型 ． ／ 电 ２ ｍＬ Ａ 以８ 衡 ０ｍｎ 用
（ 京 市六 一 仪 器 厂 ）ＳＧ Ｋ ０ 温 高 速 离 心 机 ，Ｉ Ｔ 成像系统观察凝胶电泳结果。 北 ，ＩＭＡ ３ ３ 低 ＢＮ Ａ