食品中人工合成着色剂的测定
列号：DM-P107
1、适用范围
本方案适用于糕点、果酱、水果罐头、黑芝麻糊、果冻、冰淇淋、乳饮料、糖果和红酒中人工合成着色剂的检测；检出限：亮蓝是1.0 mg /kg，其他的是0.2 mg /kg；
2、提取
2.1 糕点、果酱
(1) 取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(2) 取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(3) 将下层残留物用10mL提取液A* 按照步骤(2)重复提取一次，合并三次上清液；
(4) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。

2.2 水果罐头、黑芝麻糊
(1) 取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(2) 取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，合并两次上清液；
(3) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。

2.3 冰淇淋
(1) 取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
(2) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约7 mL，再加入1.5 mL甲酸
混匀，待净化。

2.4 果冻
取1.0 g样品，加入10 mL水，40℃水浴超声提取15 min，加入5 mL甲
醇和3 mL甲酸混匀，待净化。

2.5 乳饮料、糖果
取1.0 g样品，加入10 mL水、5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀，待净化。

2.6 红酒
取1.0 mL样品，加入0.5 mL甲醇和0.3 mL甲酸混匀，待净化。

*提取液A：取100 mL乙醇和50 mL乙腈，混匀，取140 mL乙醇：乙腈（2：1）混合溶液，加
入60 mL水和2 mL氨水，混匀。

3、净化
ProElut PWA-2 150 mg/6 mL（Cat.#65815）
a活化：依次用5 mL甲醇、5 mL10%甲酸水活化；
b上样：加入待净化液，弃去流出液；
c淋洗：加入5 mL甲醇，弃去流出液；
d洗脱：加入5 mL15%氨水甲醇溶液，收集流出液；
e重新溶解：将洗脱液在50 ℃下氮吹至约300 μL，用流动相定容至1 mL，供HPLC分析。

4、色谱条件
色谱柱：Inspire C18，250 mm×4.6 mm，5μm（Cat# 81006）
流速：1.0 mL/min 进样量：20 μL 柱温：35 ℃
检测器：PDA 254 nm
流动相：A：乙腈 B：0.02 mol/L 乙酸铵溶液
梯度设置
时间
020303140
（min）
A（%）5303755
B（%）9570639595
5、添加回收结果
食品中人工合成着色剂的HPLC检测（添加水平10 mg / kg）的添加回收结果
柠檬黄新红苋菜红靓蓝日落黄诱惑红亮兰
糕点97.4595.4792.8092.7097.6999.7787.80
果酱96.7995.3194.2194.0795.2398.3693.91
果冻107.12101.29103.2996.04103.18103.96100.36
冰淇
99.5597.66106.9893.44101.45102.22100.16淋
乳饮
100.3796.5583.2396.2699.70101.48102.00料
糖果98.4198.6195.4794.8399.9399.0295.28
水果
97.64100.4098.6694.4799.51100.09100.77罐头
黑芝
101.51105.5692.7696.07106.67103.43114.44麻糊
红酒97.3496.1997.6388.2997.8296.6496.87
人工合成着色剂标准(10 mg/L)液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
添加水平为10 mg/kg糕点中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
糕点中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
1 柠檬黄
添加水平为10 mg/kg果酱中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
果酱中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg果冻中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
果冻中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 亮兰
添加水平为10 mg/kg冰淇淋中人工合成着色剂检测的液相色谱图
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
冰淇淋中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
1 苋菜红
2 亮兰
添加水平为10 mg/kg乳饮料中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
乳饮料中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg糖果中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
糖果中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg水果罐头中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
水果罐头中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg黑芝麻糊中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
黑芝麻糊中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
1 新红
添加水平为10 mg/kg红酒中人工合成着色剂检测的液相色谱图
1 柠檬黄
2 新红
3 苋菜红
4 靛蓝
5 日落黄
6 诱惑红
7 亮兰
8 赤藓红
红酒中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图。