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常见血液病的实验室检查及应用

骨髓检查的临床应用首都医科大学北京安贞医院左大鹏骨髓细胞学检查是一种特殊的临床检验,是血液细胞形态学研究和血液病诊断的主要方法,其重点是发现血液细胞量和质的异常,并结合临床和血象等资料所分析的结果,作出明确的诊断。

骨髓细胞学检查主要用于(适应证):1 、诊断造血系统疾病;2 、诊断某些感染性疾患;3 、协助诊断恶性肿瘤骨髓转移;4 、协助诊断某些代谢障碍性疾病,如Niemann-Pick 病(可在骨髓中找到其特殊细胞)。

一、血细胞发育过程中形态演变的一般规律所有血细胞均起源于骨髓中的多能造血干细胞,在骨髓微环境和各种造血因子作用下发育成不同类型的细胞。

血细胞在骨髓中的发育成熟一般要经过原始、幼稚和成熟三个阶段。

红细胞系统、粒细胞系统又可人为地分为原始细胞、早幼细胞、中幼细胞和晚幼细胞四个具体阶段。

淋巴细胞和单核细胞只分为原始、幼稚和成熟三个阶段。

巨核细胞在发育中的阶段命名为原始巨核、幼稚巨核、颗粒巨核和产板巨核。

PPT4 显示的是血细胞发育示意图,可以看出造血功能干细胞最后发育成红细胞、粒细胞(包括中性、嗜酸、嗜碱)、单核细胞、血小板、淋巴细胞。

PPT5 用图表显示骨髓血细胞的发育规律(从原始- 幼稚- 成熟过程)。

PPT7 显示的是红细胞发育中各阶段形态变化规律示意图。

可以看到从原红到早幼红到中幼红到晚幼红、网织红到成熟红细胞,细胞体的变化,核的变化,核仁及染色体的变化。

二、血细胞的正常形态学特点(一)红细胞系统各阶段细胞形态学特点1 、原始红细胞直径15- 20um ,多为圆形或微椭圆形边缘常有瘤状突起,胞核多呈圆形,约占细胞直径的4/5 ,位于中央或稍偏于一侧,染色质为粗颗粒状,核仁1-2 个,胞浆量少呈油墨蓝色,胞浆中不含颗粒。

PPT8 的图片显示的是原始红细胞。

2 、早幼红细胞直径10—18um ,细胞形态与原红相同,胞核变小,核染色质开始聚集,常出现部分的浓染区域,核仁模糊或消失,胞浆量增多,呈深蓝色,局部可有少量血红蛋白产生。

PPT9 显示的是早幼红细胞。

3 、中幼红细胞直径8-15 μm ,圆形。

胞核圆形或椭圆形,约占细胞体积的1/2 。

核染色质凝集成索条状或块状,其中有明显空隙。

核仁消失。

由于血红蛋白的形成,胞浆可呈不同程度的嗜多色性。

PPT10 显示的是中幼红细胞。

4 、晚幼红细胞直径7-10 μm ,圆形。

胞核圆形,居中或偏位,占细胞体积的1/2 以下。

核染色质聚集成数个大块或凝缩成紫黑色团块状。

胞浆量多,染成浅灰或成熟红细胞色。

PPT11 显示的是晚幼红细胞。

(二)粒细胞系统各阶段细胞形态学特点1 、原始粒细胞〈myeiobiast 〉直径10-18um 圆形或椭圆形。

胞核呈圆形或椭圆形位于中央或偏位,染色质呈均匀细薄沙状,核仁2-5 个,胞浆量少呈水彩蓝色,胞浆中无颗粒。

PPT12 显示的是原始粒细胞,可以看到以上特点。

2 、早幼粒细胞〈promyelocyte 〉直径12-20μm ,较原始粒细胞大,圆形或椭圆形。

胞核大,圆形或类椭圆形,位于中央或偏位。

核染色质开始聚集,较原粒粗糙。

核仁可见或消失。

胞浆量增多,呈蓝色。

胞浆内开始出现大小,形态和多少不一的紫红色非特异性天青胺蓝颗粒,分布不均。

过氧化物酶阳性。

PPT13 显示的是早幼粒细胞。

3 、中幼粒细胞(myelocyte )此阶段胞浆中开始出现特异性颗粒(嗜中性,嗜酸性及嗜碱性颗粒)嗜中性中幼粒细胞(neutrophilic myelocyte ),直径10-18μm ,圆形。

胞核椭圆形或一侧开始扁平,可有凹陷,占细胞体积2/3-1/2 。

核染色质聚集呈索块状,核仁消失。

胞浆量增多,染成淡红色,并带淡蓝色。

胞浆中含有中等量,大小较一致的特异性红色嗜中性颗粒。

PPT14 显示的是嗜中性中幼粒细胞。

4 、嗜中性晚幼粒(neutrophilic metamyelocyte )直径10-16μm ,圆形。

胞核呈肾形,马蹄形,半月形,但核的凹陷程度不超过核假定直径的一半。

核染色质粗糙,排列更紧密。

胞浆量多,染成浅红色,胞浆中充满嗜中性颗粒。

PPT15 显示的是嗜中性晚幼粒细胞。

5 、杆状核粒细胞(stab granulocyte )直径10-13um ,圆形,胞核呈带形,S 形等,染色质粗糙致密,胞质中有散在分布的粉红色颗粒。

PPT16 显示的是嗜中性杆状核粒细胞。

6 、嗜酸性中幼粒细胞(eosinophilic myelocyet )直径15-20μm 。

胞核与嗜中性中幼粒细胞相似。

胞浆内充满粗大,均匀,排列密集,橘红色特异性嗜酸性颗粒。

7 、嗜酸性晚幼粒细胞(eosinophilic metafyelocyte )直径10-16μm 。

胞核在中央或偏一侧,呈肾形或椭圆形。

胞浆充满嗜酸性颗粒,但有时也可看到深褐色或紫棕色颗粒。

PPT17 显示的是嗜酸性中幼粒细(上)和嗜酸性晚幼粒细(下)。

8 、嗜碱性中幼粒细胞(basophilic myelocyte )直径15-20μm 。

胞核椭圆形,轮廓不清楚,核染色质较模糊。

胞浆含有数量不多,排列凌乱,大小不等紫黑色特异性嗜碱性颗粒,这些颗粒常常分布在细胞核上,以至细胞核模糊不清。

9 、嗜碱性晚幼粒细胞(basophilic metamyelocyte )直径10-14μm 。

胞核固缩成肾形,轮廓模糊。

胞浆及核上分布少量,分布不均的嗜碱性颗粒。

PPT18 显示的是嗜碱性杆状核细胞(上)和嗜碱性中幼粒细胞(下),箭头指的是嗜碱性的颗粒,粗大的紫黑色覆盖在细胞核上。

(三)淋巴细胞系统形态学特点1 、原始淋巴细胞(lymphoblast )直径10-18um 圆形,胞核呈圆形或椭圆形,染色质呈颗粒状较原粒粗且核膜较厚。

核仁1-2 个,胞浆量少,蓝色透明并可见环核淡染带,胞浆中无颗粒。

PPT19 显示的是原始淋巴细胞。

2 、幼稚淋巴细胞(prolymphocyte )直径10-16μm ,圆形或椭圆形。

胞核圆形或椭圆形,偶有小凹陷,核仁模糊不清或消失。

核染色质仍较细致。

胞浆较少,淡蓝色,偶有少许深染紫红色天青胺蓝颗粒。

PPT20 显示的是幼稚淋巴细胞。

3 、淋巴细胞(lymphocyte )圆形,胞质可多(大淋巴细胞)、可少(小淋巴细胞),为天蓝色,可有少数嗜天青颗粒,细胞核大,染色质致密、浓缩。

PPT21 显示的是成熟淋巴细胞。

PPT21 显示的是原淋、幼淋和成熟淋巴细胞的鉴别特点。

将原始粒,幼稚粒跟成熟粒做比较,强调在成熟淋巴细胞里面可能出现假核仁,这时候需要和幼稚淋巴细胞及原始淋巴细胞鉴别。

(四)单核细胞系统形态学特点1 、原始单核细胞(monoblast )直径15-20um 圆形或不规则形,胞核圆形或不规则形有折叠,染色质纤细疏松呈细网状,核仁1-3 个,胞浆呈蓝色或灰色,胞浆量少无颗粒。

PPT23 显示的是原始单核细胞。

2 、幼稚单核细胞(promonocyte )直径15-25μm ,圆形或不规则形。

胞核圆形或不规则,呈扭曲折叠现象。

核仁模糊不清或消失。

核染色质仍较细致。

胞浆较少,淡蓝色或灰色,胞浆中偶有少许深紫红色嗜天青颗粒。

PPT24 显示的是幼稚单核细胞。

3 、单核细胞(monocyte )胞体不规则,胞质为灰蓝色、胞核不规则,呈“山”字形,笔架形,有明显折叠。

PPT25 显示的是成熟单核细胞。

(五)浆细胞系统形态学特点1 、原始浆细胞(plasmablast )直径14-18μm ,圆形或椭圆形。

胞核圆形,占细胞体积的2/3 以上,居中或偏位。

核染色质呈粗颗粒网状。

核仁2-5 个。

胞浆量多,染深蓝色,不透明,核附近较淡,无颗粒。

PPT26 显示的是原始浆细胞。

2 、幼稚浆细胞(proplasmacyte )直径12-16μm ,多呈椭圆形。

胞核圆形或椭圆形,占细胞体积1/2 ,居中或偏位。

核染色质粗糙紧密,开始聚集,染深紫红色。

核仁不清或消失。

胞浆量多,染深蓝色,不透明,核周围有淡染区。

胞浆内有空泡和少数天青胺蓝颗粒。

PPT27 显示的是幼稚浆细胞的特点。

3 、浆细胞(plasmacyte )直径8-15μm ,圆形或椭圆形。

胞核明显缩小,较圆,占细胞体积1/3 以下,偏于细胞一侧。

核染色质浓缩成块,常排列成车轮状,无核仁。

胞浆丰富,蓝色或红蓝相混的蓝紫色,有泡沫感。

核的外侧有明显的淡染区,胞浆内有空泡,偶见天青胺蓝颗粒。

PPT28 显示的是浆细胞的特点。

(六)巨核细胞系统形态学特点1 、原始巨核细胞(megakaryoblast )直径15-30μm ,圆形或不规则形。

胞核大,圆形,不规则或呈分叶状。

核染色质呈深紫褐色或浓紫红色,粗大网状,排列紧密。

核仁2-3 个,呈淡蓝色,常不清晰。

胞浆较少,不均匀,边缘不规则,染深蓝色,无颗粒。

PPT29 显示的是原始巨核细胞的特点。

2 、幼稚巨核细胞(promegakaryocyte )直径30-50μm ,不规则形。

胞核较大,不规则,有重叠或扭转,呈肾形或分叶状。

核染色质呈粗颗粒或小块状,排列紧密。

核仁可有可无。

胞浆量增多,常有伪足,染蓝色或淡蓝色,近核处呈淡蓝色或淡粉红色,出现少量天青胺蓝颗粒。

PPT30 显示的是幼稚巨核细胞的特征,可以看到大而不规则。

3 、颗粒型巨核细胞(megakaryocyte )直径40-70μm ,有时可达100μm ,不规则形。

胞核较大,不规则,常有层层叠叠,多叶扭曲或分叶状等。

核染色质粗糙,排列紧密呈团块状,紫红色,无核仁。

胞浆极丰富,染粉红色,夹杂有蓝色,胞浆内含有大量细小紫红色颗粒,常聚集成簇。

但无血小板生成。

PPT31 显示的是颗粒型巨核细胞。

4 、产生血小板型巨核细胞(megakaryocyte )直径40-70μm ,有时可达100μm ,不规则形。

高度分叶状。

核染色质呈团块状。

胞浆呈均匀粉红色,胞浆内充满大小不等的紫红色颗粒或血小板,胞膜不清晰,呈伪足状,其内外侧有大量血小板堆集。

PPT32 显示的是产生血小板型巨核细胞。

5 、裸核型巨核细胞(megakaryocyte )产生血小板型巨核细胞的胞浆解体后,释放出大量血小板,仅剩胞核。

PPT33 显示的是裸核型巨核细胞。

(七)其它细胞网状细胞、肥大细胞、内皮细胞、纤维细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞及一些退化细胞等。

三、血细胞的细胞化学染色细胞化学染色是根据化学反应的原理,观察细胞内部的化学成分及其变化的一种方法。

各类血细胞的化学成分、分布和含量不同,可利用化学染色的方法加以区分;在病理情况下,血细胞的化学成分可发生变化,可利用它们的变化识别不同的病态细胞。

因此,骨髓细胞化学染色是临床血液病诊断和研究中不可缺少的手段。

(一)中性粒细胞碱性磷酸酶染色1 、应用目的主要用于慢性粒细胞性白血病和类白血病鉴别诊断。

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