选 获 得 的菌 株 接种 于 液体 发 酵培 养 基 ．０ｑ培养 ４ ３ Ｃ ８ ｈ 取 １ Ｌ发 酵液 ， ２ Ｌ乙醇 ， ０ ／ ｎ离 心 ； ０ｍ 加 ０ｍ ５０ ０ｒｍｉ １ ｎ ５ｍｉ；取 上清液 ，５ｏ水浴 保温 ４ ｉ，用 １ Ｌ ９ Ｃ ０ｍｎ ０ｍ
乙醚萃取 ２ ， 次 合并萃取液 ，０℃挥干 ， 甲醇溶解 ５ 用
工业化生产苯乳酸提供可行依据 。
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料与 仪器 ． １ ． 试 验 菌株 ．１ １ 保藏 。 Ｌｐａ ｔｒｍＰ ８ １由微生 物实验 室 ．ｌ ａｕ １ ８ ｎ
１ ． 培 养基 ．２ １
种子 培养 基组成 为 ：葡 萄糖 １ ／ 。 ０ｇＬ
柱温 为 ３ Ｃ 进 样量 为 １ Ｌ ０ｏ ； ０ 。
第 ３ 总第 １９期 期 ８
２１ ０ ０年 ３月
农 业科技 与装备
Ａｇ ｉ ｕ ｔ Ｍ Ｓ ｉｎｃ ＆Ｔｅ ｈ ｌ ｇ ａ ｄ Ｅｑ ｉ ｍ ｅ ｔ ｒｃ ｌ ｕｒ ｃｅ ｅ ｃ ｎｏ ｏ ｙ ｎ ｕ ｐ ｎ
Ｎ Ｏ． ｔｌＮ Ｏ．８ ３ Ｔｏ ａ １９
Ｍ ａ ． ０１ ｒ２ ０
中 图分 类 号 ： １５５ Ｒ ５． 文 献 标识 码 ： Ａ 文 章 编号 ：６４ １６（０ ００ — ０ ８ ０ １７ — １ １ １）３ ０ ２ — ３ ２
苯乳 酸为一种 新型生 物 防腐 剂 ， 能抑制 多种食 源 性致 病菌 、 腐败 菌 ， 且具 有宽 广 的 ｐ Ｈ范 围 、 稳定性 热 等优 点 ， 已引起 了人们 的关 注 ， 受发 酵水平 低 、 量 但 产
１ ． 苯乳 酸含量 的测 定 ．１ ２
１发酵 液 处理 ： 经过 筛 ） 将
ｔ ｕ Ｐ８ １ 菌株的发酵水平不仅与其遗传性能和生 ａ ｍ １８ 。 ｒ
理特性 有关 ， 还与 其培养条 件有关 。 因此 ， 必要对遗 有 传 性 能 稳 定 的高 产 苯 乳 酸 突 变 株 ＬｐａｔｒｍＰ ８ １ ． ｎａｕ １８ ｌ 的培养 条件 进行 优化 改 良 ， 以期 提 高其 产 量 ， 从而 为
１１ 主要 试 剂 苯 乳 酸购 自 Ａ Ｆ ．． ３ Ｌ Ａ公 司 ； 其他 材料 为市售 ， 甲醇 为色谱 纯 ， 剂为分 析纯 。 试 １１ 主要仪 器与设备 日立 高效 液相 色谱 系统 ： ．． ４ 配 有 日立 Ｌ ７ ２ 一 ４０紫外 检 测 器 和 Ｋｏ ａｉ Ｃ ８反 向 色 ｒｍ ｓ — １ ｌ 谱柱 （５ ｉｘ ． ｌ ５ ｍ） ２０ｍ ４６ ｎ 。 ｎ ｍ，
１２ 试 验方 法 ＿
不高等因素的制约 ， 难以进行工业化生产＿。 １ ］
辽宁 医学 院食 品科 学与 工程 学 院实验 室 于 ２ ０ ０８
年分 离获得 一株产 苯乳 酸的乳 酸菌 ， 鉴定 为植物 乳 并
杆菌， 后经 过诱 变育 种 ． 到 一株 高产 突变 株 Ｌｐａ ． 得 ． ｎ ｌ
酵母 粉 １ ／ ０ｇＬ，蛋 白胨 １ ／ ，番 茄 汁 ３０ｍＬＬ ０ｇＬ ０ ／ ，
ｐ Ｈ６．－６４。 ２ ．
１ ． ｐ 值 的测 定 ．２ Ｈ ２
采用 Ｐ Ｓ３ Ｈ 一 Ｃ精 密 ｐ Ｈ计 测 定
ｐ Ｈ值 。 １ ． 茵体 生长 量 的测 定 ．３ ２ 菌体 生 长量 的测 定 采 用
１ ． 菌种活化 ．５ ２
从 冰 箱 中取 出 Ｌｐ ｎａｕ １８ ．ｌ ｔｒｍＰ ， 士， １８一 ， 硕 从事食品微 生物方面的
研究。
斜面 菌种 。 温静 置 ４ ｉ， 后取 两 环菌 种 接种 于 室 ０ｍｎ 然 装 有 １ Ｌ ・ 培养 基试管 中 ，０ｃ静止培 养 ２ ， ０ｍ 子 ３ Ｃ ４ｈ
并定 容 至 １ ， 箱冷 藏备 用 。２ 苯乳 酸 的测 定 ［ ０ｍＬ 冰 ） ２ ］ （ Ｐ ）流 动相 为 甲醇 和水 的混 合 液 ； 度 洗 脱 Ｈ［ Ｃ法 ： 梯 程序 为 ０ １ ｎ由 ７％甲醇线 性 变化 至 １０ １～ ～５ｍｉ ０ ０ ％．５
２ ｉ ０ｍ ｎ保持 １０ ０ ％甲醇 ．０ ２ ｉ ２ ～ ２ｍ ｎ由 １０ ０ ％甲醇线性 变化 至 ７ ％； 测 波长 为 ２ ０ｎ 流速 为 １ｍＬ ｍｉ； ０ 检 １ ｍ； ／ ｎ
比色法 ： 发酵 液用 无菌 水稀 释 至 ｌ 倍 体 积 ， ０ 以培 养
基 为空 白对 照 ， 测定 ０ 锄处 的 吸光度 。 Ｄ １ ． 残糖 的测定 ．４ ２ 残 糖 的测定采用 菲林 滴定法 ［。
基金 项 目 ： 宁 省教 育厅 资助 项 目（０ ８３ ） 辽 ２０ ４ １
备用。
通信作者 ： 王玉 田（９３ ） 男 ， １５一 ， 教授 ， 究生导师 ， 研 从事 畜产
品质 量 与 安 全 工程 技 术 方 面 的研 究。
一
株植物乳杆菌培养条件优化
柴虹宇， 王玉 田 张莉力 ，
（ 辽宁医学院 食品科 学与工程学院， 辽宁 锦 ２ １ １０ ） １ ２０ １ １
摘要 ： 采用单 因素 试验的方法 ， 优化突变株 Ｌｐ ｎａｕ １ ８ 的培养条件 。优化后的培养 条件 为： ｌ ｔ ｍ Ｐ８ １ ａ ｒ 培养时间 ４ ； ８ｈ 发酵液初始 ｐ Ｈ 值 ６５接种量 （ ／ ４ 培养温度 ３ ．； Ｖ Ｖ）％； ０℃， 此时苯乳 酸产量为 ０ ２ ／ 。 ． ４ｇ Ｌ ６ 关键词 ： 植物乳杆菌 ： 培养条件 ： 苯乳酸
发酵 培养基 组成 为 ： 葡萄糖 ２ ／ ， ５ｇＬ 酵母 浸 粉 ３ ５ ｇＩ ／，磷酸氢二钾 ２ ／， Ｓ ４ ／， Ｓ ４．ｇ１ 吐 ．ｇＩＭｇＯ ｇＬＭｎＯ ３ ／， ２ １ ０
温一 ０ Ｌ Ｌ ｐ ６２ ６ 。 ８ ３ｍ ／ ，Ｈ ． ． ～ ４
收稿 日期 ：００ Ｏ 一 ０ ２ １一 ｌ２