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组3（实验1） 组3 HO-1蛋白含量
项目预期
组3（实验1） 组3 miR122含量
组3（实验1） 组3 肝细胞活性
存在的问题
• HCMV与MCMV之间的差异对实验结果的影响 • 关于HO-1对肿瘤细胞生长的研究有不同的结论 • 本项目建立的小鼠肝癌模型属于早期肝癌，进行HO-1干
预的实验结果与临床上中晚期使用索拉非尼进行化疗的效 果之间可比程度如何
项目操作
实验三： 组2，3小鼠10只，分别取肝组织1g 构建miR122过表达载体，转染； 测量HO-1蛋白含量、miR122的转录水平、肝细胞/肝癌细胞 的活性；
项目操作
实验一：
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组1 组2 组3 HO-1蛋白含量
项目预期
项目设计
小鼠肝癌模型制备
MCMV感染
CMV
分组C、57B肝L/6组J 织分离
项目操作
组1：正常组：20只 组2：肝癌组：30只 组3：感染组：30只
观察指标： HO-1表达水平（免疫组化法）：表达HO-1阳性细胞百分比、 阳性显色度 肝细胞活度（MTT法）：吸光度OD值 miR122表达水平（RT-PCR）
HMOX1对巨细胞病毒感染小鼠肝 癌进程影响机制研究
• 人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）属于β疱疹病毒亚科， 是巨细胞包涵体病的病原体，人群感染十分普遍，但通常为潜伏感染， 临床上常无症状。
• 根据目前的研究进展，HCMV主要起到了肿瘤调节作用，例如在协同人 乳头瘤病毒（HPV）使人正常鳞状上皮恶变过程中起到了协同作用。
• 诸多实验观察发现，患严重肝病时，机体免疫力降低，可使体内潜伏 的HCMV被激活，造成活动性感染，同时也提示HCMV活动性感染与肝癌 发展可能存在关联性。
• 最新的研究结果显示，HCMV在PHH和HepG2细胞系中培养，可通过激活 IL-6-JAK-STAT3信号通路促进细胞增殖和生长，可能与肿瘤形成有关。
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项目思路
HO-1 expression in monocytes infected with s
control NF-kB inhibitor
项目思路
breast cancer patients: peripheral blood monocytes
• Heme oxygenase-1 could be considered as a new marker in the diagnosis of some cancers, especially hepatomacarcinoma.
• The combination of gene-silencing effect of HO-1 and chemotherapy might be considered as a new modality for the treatment of cancers in which the expression HO-1 is up-regulated.
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项目思路
control metadherin depletion
HO-1 expression in lung metastatic breast cancer cell line
抗氧化
HO-1的细胞保护作用
抗凋亡
抗增生
a)降解产物的作用； b)抑制NOS； c)影响p21的表达； d)影响Bcl-2的表达； e)存在AP-1、STAT结合位点； f)HO-1/CO→p38MAPK，NFkB通路
项目操作
实验一： 取组1，2，3肝组织各10份，每份3g，各制备成细胞悬液后 平均分成3份，分别测量HO-1蛋白含量、miR122的转录水平、 肝细胞/肝癌细胞的活性；
项目操作
实验二： 取组1，2，3肝组织各10份，每份3g，各制备成细胞悬液后 平均分为3份，加入选择性HO-1抑制剂锌原卟啉IX，分别测量 HO-1蛋白含量、miR122的转录水平、肝细胞/肝癌细胞的活 性；
Bahmani P, Hassanshahi G, Halabian R, et al. The Expression of Heme Oxygenase-1 in HumanDerived Cancer Cell Lines[J]. Iranian journal of medical sciences, 2011, 36(4): 260.
背景介绍
• 针对HCMV在肝癌早期发展过程中的作用（此种作用可能促进乙肝病毒 的感染）以及HCMV参与调节的肝癌细胞信号通路，寻找特定靶点进行 干预，可望在早期干预肝癌演进，同时配合相关治疗手段，促进肝癌 预后。
项目意义
• 现已查明，处于潜伏状态的HCMV，尽管呈组织泛嗜性，但不会感染 外周血白细胞。相反，一旦再活化，即可在外周血白细胞检测出。
项目思路
Sorafenib索拉非尼
抑制 RAF/MEK/ERK 临床治疗clinical therapy
项目思路
抗凋亡
新靶点new target
miR122 ↓
HMOX1↑
HCMV 感染
激活IL-6-JAK-STAT3 激活ERK/MAPK 以及其他可能机制
凋亡
• 基于血红素加氧酶1（HMOX1/HO-1）在肝癌中的异 常表达及其与miR122之间的关联性，观察干预HO1、miR122表达对肝癌细胞生长的影响。
项目思路
• Up-regulation of (HO-1) has contributed to tumorogenicity of some cancers.
• The examined cancer cell lines constitutively expressed different variety of HO-1 on mRNA level. Strong expression of HO-1 was observed in HepG2, MCF-7 and A549 cells.
组1 组2 组3 miR122含量
组1 组2 组3 肝细胞活性
实验二：加入HO-1抑制剂
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组1 组2 组3 HO-1蛋白含量
项目预期
组1 组2 组3 miR122含量
组1 组2 组3 肝细胞活性
实验三：诱导miR122过表达
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