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微生物室自动化
按仪器厂商的要求进行血培养仪 细菌鉴定及药敏检测仪
VITEK 2
BacT/ALERT 3D 240
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纸片扩散法
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扩散法：K-B
原理：将浸有抗菌药物的纸 片贴在涂有细菌的琼脂平板 上，抗菌药物在琼脂内向四 周扩散，因此敏感细菌在纸 片周围一定距离内的生长受 到抑制，根据抑菌圈的大小 即可推知该药物的最低抑菌 浓度（MIC）。
• 4月11日起征求全国意见
• 制定《抗菌药物临床应用分
第三章 抗菌药物 级管理目录》 临床应用管理 • 4月15日期征求全国意见
第四章 监督管理
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第三章 抗菌药物临床应用管理
• 三级医院 不得超过50种，二级医院 不得超过35种 • 同一通用名称药品的品种，注射剂型和口服剂型各不得超过2种，处方组成
操作：
无菌棉签蘸取菌液，在管壁内将多余菌液旋 转挤去后，在琼脂表面均匀涂布接种3次， 每次旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1 周。 室温干燥或35℃干燥5-15分钟 用纸片分配器或无菌镊子将药物纸片紧贴于 琼脂表面 纸片间距 20mm 纸片离平板内缘 15mm
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抗生素药敏试验质控
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有关抗菌药物合理应用法规、规章、制度 2011年75号文要点（一）
75号文共6章53条，要点如下：
抗菌药物合理应用成为卫生行政部门直接职责，明确医疗机构 负责人是第一责任人（第8条）
明确提出抗菌药物ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ床应用分级权限与管理（第6条第19条50 种与35种）
明确各级医院均须成立抗菌药物管理工作组及职责（第10条及 第11条）
低 4 16
3
8
抑2
4
1
2
菌0
1
-1 0.5
浓 -2 0.25
-3 0.125
度 -4 0.06
-5 0.03
-6 0.015
12
100株临床菌株 100对MIC和抑菌圈直径 负相关（r =-0.9） 中敏：12-20mm
耐药
中敏 高敏
6 10 14 18 22 26 30 34 38 42
抑菌圈直径
意义： 药敏试验常规抗菌药物的选择： 我国根据美国CLSI（National committee for clinical laboratory standars，）制定的标准进行，抗生素分成 四组： A组：一级试验并常规首选报告的抗微生物药物。 B组：一级试验，临床使用的主要抗生素（尤其在院
内感染时）有选择报告的药物。 C组：补充试验，有选择报告的药物 U组：补充试验，仅用于泌尿道感染细菌的抗微生物药物。
葡萄球菌属 Mueller-Hinton（MH）琼脂
链球菌属 5%脱纤维羊血（马血、兔血）MH或Columbia Blood Agar
类同的复方制剂1-2种。 • 具有相似或相同药学特征的药品不得重复采购。 • 对三代及四代头孢菌素、氟喹诺酮类抗菌药物、深部抗真菌类抗菌药物进行
了限定。 • 三代及四代头孢菌素（含复方制剂）类抗菌药物口服剂型不得超过 5个品规，注射剂型不得超过8个品规 • 碳青霉烯类抗菌药物注射剂型不得超过3个品规 • 氟喹诺酮类抗菌药物口服剂型和注射剂型各不得超过4个品规 • 深部抗真菌类抗菌药物不得超过5个品规。
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关于细菌感染药物敏感试验应该知道什么？
天然耐药的抗菌药物（肯定无效） 可以选择的抗菌药物（可能有效） 细菌药敏试验可以提供哪些信息？ 如何解读细菌药敏试验结果？
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为什么要做药物敏感性试验？
供临床医师选用抗菌药物时的参考 细菌耐药性监测和耐药性变迁 评价新抗菌药物的药效学特征 对细菌耐药谱分析和分型有助于某些菌种 的鉴定 作为医院内感染流行病学调查的手段之一
明确提出在二级以上医院设立感染科与感染临床药师（第12、
13条），及临床微生物室（第14条）
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概况和制定过程
第一章 总则
第六章 附则 第五章 法律责任
共六章 53条
第二章 组织机 构和职责
• 组织医院管理、临床、药学 、微生物检验、感染等方面 专家起草《抗菌药物临床应 用管理办法》
超过75%
暂停临床应用，追踪细菌耐药监测结果， 再决定是否恢复临床应用
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药敏试验可以提供哪些信息
药物种类的选择（天然耐药的抗菌药物 不做药敏药敏试验）
检测耐药机制，根据耐药机制提示对其 他抗菌药物的敏感性
检测标志性药物，提示对其他抗菌药物
的敏感性 检测试验抗菌药物的敏感性
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如何进行药物敏感性试验？
稀释法
试管稀释法（肉汤稀释法） 平板稀释法（琼脂稀释法）
扩散法（纸片法）
Kirby-baure(K-B)法 Stockes法
E-Test
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纸片法药敏和MIC法的相关性
Log2MIC MIC
7 128
最 6 64
5 32
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第三章 抗菌药物临床应用管理
建立抗菌药物临床应用和细菌耐药监测体系
<医疗机构:定期发布细菌耐药信息，建立细菌预警机制，对接受 抗菌药物治疗患者，微生物检验样本送检率不得低于30%>
细菌耐药率
相应的措施
超过30% 及时将预警信息通报医务人员 超过40% 慎重经验用药
超过50% 参照药敏试验结果选用
抗菌药物的敏感性试验及 报告解读
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什么是抗菌药物的敏感性试验？
测定抗菌药物在体外抑制病原微 生物生长的效力，称抗菌药物对细菌 的抑菌试验，或称细菌对药物的敏感 性试验。
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抗菌药物敏感性试验 （antimicrobial susceptibility test)
纸片法 新批号药做；一般每周做； 失控时天天做，连续30天，准确度和精确 度达到后才恢复每天做； 一个药物失控时，重新测5天。
稀释法 琼脂法、微量肉汤法每次同时做质控
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培养基及药敏纸片
用分离及MH培养基
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药敏纸片
OXOID
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培养基：
肠杆菌科细菌、假单胞菌属、不动杆菌属等 Mueller-Hinton（MH）琼脂或ISO-sensitest琼脂