第三节
提取分离方法
答案： 1. 聚酰胺柱色谱洗脱顺序：由先到后 D，E，C，B，A 2. 用硅胶柱色谱洗脱顺序：由先到后 A，B，C，D，E
第三节
提取分离方法
3）葡聚糖凝胶色谱
常用型号：
Sephadex-G（适用于水溶性成分分离） Sephadex-LH20 （可用于亲脂性成分分离 ）
机理：
少数情况下，在加水去活化后也可用于分离极 性较大的化合物，如多羟基黄酮醇及其甙类等。
第三节
提取分离方法
2）聚酰胺色谱：
原理：聚酰胺分子中具有酰胺羰基，可与酚羟基形成氢 键，主要依据与被分离物质成氢键能力不同进行分离。 吸附强度主要取决于： ① 黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置以及溶剂； ② 黄酮类化合物酚羟基与聚酰胺之间形成氢键缔合 能力的大小。
（4）镁盐
二氢黄酮(醇)：显天蓝色荧光, 有5-OH更明显 黄酮(醇)、异黄酮：显黄~橙、黄~褐色
（5）氯化锶（SrCl2）第二节理化性质与颜色反应
三、显色反应
（三）硼酸显色反应
——鉴别5-OH黄酮和2-羟基查耳酮 在无机酸或有机酸存在下，反应生成 亮黄色。
第二节
理化性质与颜色反应
三、显色反应
O
C环还原：黄烷类
O
其它类型：花色素类、橙酮类（奥弄类）、高异黄酮、
山酮类（双苯吡酮类）
第一节 概述 双黄酮类：由两分子黄酮或两分子二氢黄酮或一分子黄酮及 一 份子二氢黄酮以C-C或C-O-C键连接而成。
另外，还有黄酮木脂类、生物碱黄酮类
第一节 绪论 例
HO O O rutinose OH O
不退色
黄绿色络合物
稳定性: 3-OH，4-酮基络合物5-OH，4-酮基络合物（仅二
氢黄酮醇除外）
第二节
理化性质与颜色反应
（2）铝盐
可用于定性或定量分析
（3）铅盐
Note：
醋酸铅（中性）：邻二酚、3-OH和4-酮基或5-OH 和4-
酮 碱式醋酸铅：一般酚羟基均可
第二节
理化性质与颜色反应
李糖，L-阿拉伯糖，D-葡萄糖醛酸
双糖：槐糖，龙胆二糖，芸香糖（Rha1— 6Glc），新橙皮糖（Rha1—2Glc）等 三糖：龙胆三糖，槐三糖 酰化糖：2-乙酰葡萄糖，咖啡酰基葡萄糖
第一节 绪论
三、黄酮类化合物的药理作用
1.对心血管系统的作用 (1)扩张冠脉：芦丁、葛根素黄酮片临床用于心绞痛、 高血压。 (2)Vip样作用：橙皮苷可降低血管脆性及异常通透性， 用作高血压辅助治疗剂。 (3)抑制血小板聚集作用：抑制ADP、胶原或凝血酶诱 导的血小板聚集，从而防止血栓形成。 (4)降低血胆甾醇作用：山楂总黄酮 2.抗肝脏毒性作用 水飞蓟素为二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合而成， 适用于急慢性肝炎、肝硬化、中毒性肝损伤。
8 7 9 1 2' 2 3 4 1' 6' 3' 4' 5'
O
C
A
6 5 10
B
C6-C3-C6
二、生物合成途径及分类：
第一节 概述
桂皮酸－莽草酸途径
查耳酮
第一节 概述
分类依据：母核中三碳链的氧化程度，三碳链是否成 环以及B环的连接位置
C3-位：有OH 黄酮醇
无OH 黄酮
C2－3饱和：二氢黄酮（醇） C3与B环相连：异黄酮、二氢异黄酮 C环开环：查耳酮、二氢查尔酮
理化性质与颜色反应
提取分离方法
黄酮类化合物的检识
与结构测定
结构研究实例
第二节
理化性质与颜色反应
一、一般性状
形态：多为结晶，少数为无定形粉末。
颜色：结构存在交叉共轭体系和助色团，因此化合
物多有颜色。
黄酮（醇）及其苷：呈黄色-灰黄色 查耳酮：黄-橙色 二氢黄酮（醇）：无色 异黄酮：微黄色 花色素可随着pH值的变化颜色有所不同：
HCl-Mg反应 • HCl-Zn反应 • NaBH4反应 • 锆-枸橼酸反应 • SrCl2反应 • 硼酸+草酸反应• Molish反应 •
（ +） （ +） （ -） 黄色，加枸橼酸,褪色 （ +） （+）黄色 （ +）
本 章 内 容
第一节 绪论
第二节
理化性质与颜色反应
提取分离方法
第四节
第三节
水 中 溶 解 度 增 加
二氢黄酮
第二节
理化性质与颜色反应
二、酸碱性
酸性：来源分子中的酚羟基；
可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲
酰胺。
酸性强弱的比较：取决于羟基的数目和位置：
7,4′-OH > 7-或4 ′ -OH > 一般Ar-OH > 5-OH
OH HO O OH OH OH O
100oC/ 7hr a-L-arabinopyranosyl
OH O isoschaftoside
第二节
理化性质与颜色反应
OH
HO O 练习：下面的一个化合物可能发生的反应
OH
OH OH HO O O rutinose OH O
OH O OGlc___Rha
芦丁(rutin)
• • • • • • •
第三节
提取分离方法
习题：下列黄酮化合物， （1）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱， （2）用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱， 分别写出洗脱顺序
OH
HO
O
OH
HO
O
OH
OH GlcO O
OH O A
OH
O B
OH
OH
O
C
O Rha-GlcO O O Rha-GlcO
O
OH OH
OH
O
D
OH O
E
2）
先后顺序：C > A > B
第三节
提取分离方法
（二）梯度pH萃取法
应用：分离酸性强弱不同的黄酮苷元 酸性比较：7,4 ’-OH > 7-或4’-OH > 一般OH > 5-OH 溶于 NaHCO3
依次
Na2CO3
不同浓度的NaOH
样 乙醚 乙醚 品 液 萃取
各 5%NaHCO3 分别 部 5%Na2CO3 分 酸化 0.2%NaOH 黄 4%NaOH 酮
红色（pH<7），紫色(pH8.5)，蓝色 (pH>8.5)
第二节
理化性质与颜色反应
溶解度
苷元：难溶于水，易溶于乙酸乙酯，乙醚等有 机溶剂中 苷：易溶于水、乙醇、甲醇中，糖链越长水溶 性越大。

?
黄酮(醇), 查耳酮： 平面型分子 二氢黄酮(醇)： 非平面型分子 离子 花色素：
H O H O H
黄酮类化合物的检识
与结构测定
第五节
结构研究实例
第三节
提取分离方法
一、提取精制 根据化合物的性质，可采取以下提取方法 化合物： 极性——溶剂萃取 酸性——碱提酸沉 解离性—离子交换 碳粉吸附法 1.溶剂萃取法：
被分离物质与混入的杂质性质不同，选用不同极性 溶剂萃取达到去杂质目的。 例如：醇提液用石油醚萃取可除去油脂、蜡、叶绿素；
第五章
黄酮类化合物
（Flavonoids）
本 章 内 容
第二节
第一节 第三节
绪论
理化性质与颜色反应
提取分离方法
第四节 第五节
黄酮类化合物的检识
与结构测定
结构研究实例
第一节 概述 一、定义： 以前，黄酮类化合物(flavonoids)主要是指基本母核2-苯基 色原酮(2-phenyl-chromone)类化合物， 黄酮类化合物是泛指两个苯环通过三碳相互连接而成的一 系列化合物。
• 优点：可使含酚羟基化合物成盐溶解，另一方面 可使含COOH的果胶、粘液质、蛋白质等杂质形 成沉淀而除去。
• 注意：碱性不宜过强，以免破坏黄酮母核； 酸化时，酸性不宜过强，pH3~4即可，以免形 成佯盐而溶解。
第三节
提取分离方法
3. 离子交换
原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；采用阴离子
交换树脂交换，加酸后析出，用有机溶剂回流提 取。
第三节
提取分离方法
（三）利用分子中的特定基团
醋酸铅沉淀法：
邻二酚羟基黄酮＋醋酸铅 沉淀 不具有邻二酚羟基＋碱式醋酸铅 沉淀
硼酸沉淀法：
邻二酚羟基＋硼酸 它黄酮分离。
络合物溶于水，与其
第三节
提取分离方法
习题：从某植物中分离出四种化合物，其结构如下：
R2O O OR1 OH O OH
A B C D
（可用于提取、分离及鉴定工作）
第二节
理化性质与颜色反应
碱性： 来源：1-位氧原子的未共用电子对，显微弱的碱 性；可与强酸（如：浓硫酸，盐酸等）生成（） 盐而溶于酸水中。
第二节
理化性质与颜色反应
三、显色反应
（一）还原反应（可用于各类化合物的鉴别）
(1) HCl-Mg 反应:
多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化 合物显橙红—紫红色，少数显紫—蓝色。查耳酮、 橙酮、儿茶素类不显色。异黄酮类一般不显色。
(2) HCl－Zn: （同HCl-Mg 反应） (3) 四氢硼钠（NaBH4)反应： NaBH4是对二氢黄酮
（醇）类化合物专属性较高的一种还原剂。 颜色多为橙红-紫红
第二节
理化性质与颜色反应
三、显色反应
（二）金属盐类试剂的络合反应
黄酮类化合物分子结构中多具有下列结构：
O O OH
OH OH O O
第一节 绪论
三、黄酮类化合物的药理作用
3.抗炎作用 黄酮类化合物可抑制脂氧化酶，从而抑制前列腺 素的生物合成，达到抗炎目的。 4.雌性激素样作用