甲酯化方法
1、精炼纯种油
取油样100~250mg左右于25mL容量瓶中,加入(1:1)石油醚:乙醚2mL,振摇,再加入0.4mol/L KOH-甲醇溶液1mL,振摇,放置30min,注水至瓶颈,等待分层,取上清液加入适量无水硫酸钠,微量进样针取1ul上机测试。
2、饲料(参考《饲料脂肪酸组成的分析测定》第13卷增刊)
首先,提出粗脂肪。
然后,取100~250mg左右于25mL容量瓶中,加入(1:1)石油醚:乙醚2mL,振摇,再加入0.4mol/L KOH-甲醇溶液1mL,振摇,放置30min,注饱和盐水至瓶颈,等待分层,取上清液加入适量无水硫酸钠,微量进样针取1ul上机测试。
3、磷脂
取样品100~250mg左右于25mL容量瓶中,加入正己烷2mL,振摇溶解,再加入0.4mol/L KOH-甲醇溶液1mL,振摇,放置30min,注饱和盐水至瓶颈,等待分层,取上清液加入适量无水硫酸钠,微量进样针取1ul上机测试。
4、溶血磷脂
第一种方法:取样品100~250mg左右于25mL容量瓶中,加入正己烷2mL,振摇溶解,再加入0.4mol/L KOH-甲醇溶液1mL,振摇,放置30min,注饱和盐水至瓶颈,等待分层,取上清液加入适量无水硫酸钠,微量进样针取1ul上机测试。
第二种方法:取样品100~250mg左右于25mL容量瓶中,加入0.5mol/L氢氧化钠甲醇溶液4mL,70℃水浴10min,趁热加入14%三氟化硼甲醇溶液5mL,70℃水浴10min,趁热加入正己烷2mL,取出容量瓶,加入适量饱和盐水,振摇,继续加入至瓶颈,静置分层。
取上清液加入适量无水硫酸钠,微量进样针取1ul上机测试。
警告:1、三氟化硼有毒,试验必须在通风厨进行,且带上防护口罩、防护手套、穿大白褂。
2、玻璃器具用后,应立即用水冲洗。
5、鱼油
取油样100~250mg左右于25mL容量瓶中,加入正己烷2mL,振摇,再加入0.4mol/L KOH-甲醇溶液2mL,振摇,放置30min,注饱和盐水至瓶颈,等待分层,取上清液加入适量无水硫酸钠,微量进样针取1ul上机测试。
注:
1、0.5mol/L氢氧化钠甲醇溶液:将2g氢氧化钠溶于100mL甲醇中。
该溶液存放长时间时,会形成少量白色的碳酸钠沉淀,但不会影响甲酯的制备。
2、油样若凝固,可水浴加热,使其流动性较好,再进行称样。
甲酯化过程中也可稍微低温水浴,以防凝固降低甲酯化效率。