・　２２　・　《上海畜牧兽医通讯》２０１２年第１期　黄芪多糖在犬病的临床应用试验　刘汝文　吴海兴。　赵玲。　陈丽玲¨　（ｉ昆明医学院实验动物中心　昆明　６５００３１　２昆明市动物疫病预防控制中心　昆明　６５０２２３　３昆明市益宠堂宠物医院　昆明　６５００３１）　黄芪（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ＡＰＳ）属豆科多年生草　本植物，主要成分为黄芪皂苷、黄芪多糖、蔗糖、氨基丁酸、　叶酸、多种微量元素（硒、锰、铁、锌、铜）和钙等。现代药理　学研究证实，黄芪有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、　抗应激、降压和广泛的抗菌作用。近年来对黄芪的研究表　明，其对免疫功能有增强作用，主要因其含多糖、谷甾醇、棕　榈酸、胆碱、黄酮类等营养素，能镇静中枢神经系统，清除体　内脂质过氧化物，具有较强的抗氧化作用。本文将十余年来　临床使用黄芪治疗宠物犬细小病毒病、呼吸道疾病、病毒性　肝炎的情况报道如下　１材料与方法　１．１　试验动物　我宠物医院从ｌ９９９～２０１１年，一直用处方配合黄芪注　射液或黄芪多糖膏治疗病犬。最近收治的犬细小病毒病２９　例（３月龄～５岁）、呼吸道疾病３Ｏ例（２月龄～９岁）、病毒性　肝炎１１例（３．５～７岁）中，有杂交犬、比熊、贵宾、雪纳瑞、昆　明犬等，用药３～５　ｄ，观察犬白细胞和淋巴细胞的变化及犬　的治愈恢复情况。　１．２　药品与仪器　黄芪注射液：大理药业有限公司，国药准字Ｚ５３０２Ｊ６７７，　批号：０９０９０６；黄芪多糖膏：北京兴业久远宠物食品有限责任　公司生产。５　葡萄糖一盐水、１Ｏ　葡萄糖、犬源血浆、清开　灵、ＡＴＰ、ＣｏＡ、肌苷、ＶＢ　。仪器：Ｅｔ本光电血球仪，ＭＥＫ一　６３１８Ｋ型。　１．３　治疗方法　２９例犬细小病毒病犬，９例常规处方用药：５　糖盐水加　ＡＴＰ、ＣｏＡ、肌苷、犬源血浆输液，肌肉注射犬吐停，２Ｏ例加注　黄芪注射液或恢复期服用黄芪多糖膏。３Ｏ例呼吸道疾病　（幼犬２Ｏ例，成犬ｌＯ例），１０例常规治疗，５　糖盐水加林可　霉素、穿琥宁输液，２Ｏ例增加肌肉注射黄芪注射液治疗。病　毒性肝炎疾病ｌ１例，５例常规用药，１Ｏ　葡萄糖加清开灵注　射液，茵栀黄注射液，肌苷、ＡＴＰ、ＣｏＡ、ＶＢ　，肌注转移因子、ａ　干扰素，６例加黄芪注射液。　１．４　统计分析　ＳＰＳＳ１１．０版软件统计，单因素方差分析黄芪注射液用　药前后血液生理常数，统计差异显著性。　表１　黄芪注射液用药前后血液生理常数　

注：　为差异显著（Ｐ＜Ｏ．０５），　为差异极显著（Ｐ＜Ｏ．ｏ１）。　２结果与讨论　黄芪注射液用药前后血液生理常数见表１。２０例细小　病毒病加注黄芪注射液，治愈１９例，死亡１例，治愈率９５　；　常规用药的死亡２例，治愈率７８　。呼吸道感染的３Ｏ例，２Ｏ　例加注黄芪全部治愈，常规用药１Ｏ例，死亡２例幼犬。６例　病毒性肝炎疾病治愈４例，５例常规用药死亡３例。　黄芪为补虚类中药，有增强机体免疫功能，能促进白细　胞的产生，对淋巴细胞的生成也有一定的作用，与用药之前　相比差异显著（Ｐ＜０．０５），与常规用药组比较差异显著（Ｐ＜　０．０５）。犬细小病毒病后期Ｅｌ服黄芪多糖，血中免疫球蛋白　＊为通讯作者。　Ｍ（ＩｇＭ）、免疫球蛋白Ｅ（ＩｇＥ）、环化腺核苷——磷酸（ｃＡＭＰ）　增加显著，能促进抗体合成、诱生干扰素，提高机体抗病能　力，促进体液免疫（Ｔ细胞）功能，维持机体内外环境平　衡　。中医认为：黄芪能利水消肿，托疮生肌。黄芪中含有　糖类、叶酸、维生素Ｂ、多种氨基酸及硒、锌、铜、铁等１４种微　量元素，具有扩张血管、改善局部微循环作用，促进细胞的再　生，有利于支气管炎症的恢复及愈合。另一个重要功能是黄　芪能清除或减少氧自由基的生成，提高清除自由基酶的活　性，对肝细胞有一定的保护作用。　现已证实黄芪具有补益作用的中药，是一种免疫调节　

剂，对免疫功能具有明显的增强和调节作用。黄芪对免疫系　《上海畜牧兽医通讯》２０１２年第１期　・　２３　・　红细胞浓度对禽流感血凝和血凝抑制试＆（ＨＡ／ＨＩ）结果的影响　陶景莲　（青海省贵德县畜牧兽医站８１１７００）　高致病性禽流感是由Ａ型禽流行性感冒病毒引起的一　种禽类（家禽和野禽）的急性、高度接触性的传染病。高致病　性禽流感因其在禽类中传播快、危害大、病死率高，可以直接　感染人类，被世界动物卫生组织列为Ａ类动物疫病，我国将　其列为一类动物疫病。由于高致病性禽流感对畜牧业和人　身安全的危害及对一个国家的政治、经济的影响，各国都积　极采取了预防和控制该病的措施。高致病性禽流感有效控　制的关键在于定期免疫和早期检测，准确的检测是防控高致　病性禽流感的重要环节。　１材料与方法　１．１　器材　天平，普通离心机，恒温箱，冰箱，微型振荡器，微量移液　器，吸头，９６孔一次性血凝板。　１．２　试剂　１．２．１禽流感病毒Ｈ５亚型ＨＩ试验抗原、禽流感病毒Ｈ５　亚型阳性血清，均购自哈尔滨维科生物技术开发公司，抗原　批号２０１００７，阳性血清批号２Ｏ１００２。　１．２．２阿氏液、ｐＨ　７．２的０．０１　ｔｏｏｌ／Ｉ　磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）。　１．２．３　ｉ　鸡红细胞悬液（Ａ、Ｂ、Ｃ）。配制方法：采集３羽无　禽流感和新城疫抗体的健康公鸡血液与等体积阿氏液混合　（准备相同的三份，分别标号Ａ、Ｂ、Ｃ），用ＰＢＳ液洗涤３次。　其中Ａ管每次以２　０００　ｒ／ｍｉｎ离心１　ｒａｉｎ，洗涤后用ＰＢＳ配　成１　红细胞悬液Ａ，４℃保存备用。Ｂ管以２　０００　ｒ／ｒａｉｎ离　心３　ｍｉｎ，洗涤后用ＰＢＳ配成１　红细胞悬液Ｂ，４℃保存备　用。Ｃ管以２　０００　ｒ／ｍｉｎ离心５　ｍｉｎ，洗涤后用ＰＢＳ配成１　红细胞悬液Ｃ，４℃保存备用。　１．３待测样品　鸡群免疫２１　ｄ后采血，无菌分离血清，分装，编号。　１．４试验方法和判定标准　按照ＧＢ／Ｔ　１８９３６—２００３采用血凝和血凝抑制试验检　测，个体ＨＩ价≥１：１６（即４１ｏｇ２）为免疫合格，群体免疫合格　率≥７Ｏ　为合格。　２　结果　２．１相同的转速，不同的离心时间洗涤红细胞后测定红细　胞数（ＲＢＣ）和红细胞压积（ＨＣＴ），得到的结果不同。Ａ管：　ＲＢＣ　５．３２×１Ｏ”／Ｌ，ＨＣＴ　８３．６　；Ｂ管：ＲＢＣ　５．５８×１０”／Ｌ，　ＨＣＴ　８９．２　；Ｃ管：ＲＢＣ　６．２５×１０　／Ｌ，ＨＣＴ　９９．５　。用相　同的转速，不同的离心时间洗涤的红细胞制备的１　红细胞　统的作用是多方面的，它能够明显地提高白细胞的免疫功　能，促进吞噬作用，增强自然杀伤细胞（ＮＫＣ）和Ｔ淋巴细胞　的转化，调节细胞内环磷鸟苷（ｃＧＭＰ）／环化腺核苷——磷酸　（ｃＡＭＰ）比值。在淋巴细胞分化成熟过程中，胸腺的某些激　素诱导Ｔ细胞成熟是通过升高细胞内ｃＡＭＰ水平而实现　的。黄芪多糖就有升高ｃＡＭＰ效应，诱导机体产生Ｙ一干扰　素（ｙ－ＩＦＮ）、白细胞介素一２（ＩＬ一２）以及增加免疫球蛋白的合　成；保护应激期垂体一肾上腺功能，减少其分泌，进而有利于　垂体一肾上腺功能的恢复；黄芪是以黄芪多糖为主要有效成　分来影响免疫应答，对机体的非特异免疫系统和特异性免疫　系统发挥调节作用，因此在犬病治疗中能够提高治愈率。　悬液中所含的红细胞数目不同（浓度不同），１　红细胞悬液　Ａ中的红细胞数目为５．３２×１Ｏ　／Ｌ，１　红细胞悬液Ｂ中的　红细胞数目为５．５８×１０　／Ｌ，１　红细胞悬液Ｃ中的红细胞　数目为６．２５×１０　／Ｌ，浓度由高到低为Ｃ液、Ｂ液、Ａ液。　２．２　使用不同浓度的１　红细胞悬液后的试验结果不同。　（１）平均血凝价和４单位抗原不同。使用Ａ液（低浓度）后的　平均血凝价为１：５１２（２。），４单位抗原稀释比例为１：１２８；使　用Ｂ液（中浓度）后的平均血凝价为１：２５６（２　），４单位抗原　稀释比例为１：６４；使用Ｃ液（高浓度）后的平均血凝价为　１：６４（２　），４单位抗原稀释比例为１：１６。由此可见，１　红细　胞悬液中红细胞数目越多（浓度越高），平均血凝价越低，抗　原稀释比例越小。（２）平均抗体滴度不同。使用Ａ液（低浓　度）和１：１２８的４单位抗原后的平均抗体滴度为１：２５６（２　）；　使用Ｂ液（中浓度）和１：６４的４单位抗原后的平均抗体滴度　为１：１２８（２　）；使用ｃ液（高浓度）和ｌ：１６的４单位抗原后的　平均抗体滴度为１：３２（２　）。由此可见，１　红细胞悬液中红　细胞数目越多（浓度越高），平均抗体滴度越低。（３）群体免　疫合格率不同。使用Ａ液（低浓度）和１：１２８的４单位抗原　后的群体免疫合格率为９２．５　，使用Ｂ液（中浓度）和１；６４　的４单位抗原后的群体免疫合格率为８５　，使用ｃ液（高浓　度）和１：１６的４单位抗原后的群体免疫合格率为７２．５　。　由此可见，１　红细胞悬液中红细胞数目越多（浓度越高），群　体免疫合格率越低。详见表１。　表１使用不同的红细胞悬液后的试验结果　（单位：份、　）　

３讨论　３．１　加入１　红细胞悬液时应先将其充分摇匀，以免每孔　中加入的红细胞悬液浓度不同，造成差异。　３．２　试验要严格按照ＧＢ／Ｔ　１８９３６—２００３操作，在洗涤鸡　红细胞时要选择适宜的转速和离心时间，以２　０００　ｒ／ｍｉｎ的　速度离心，第１、２次３　ｍｉｎ和第３次５　ｍｉｎ离心时间为宜。　参考文献　［１］林爱华，李予蓉．黄芪对小鼠免疫功能的影响［Ｊ］．第四军医大学　学报，２００３，２４（１７）：２３．　［２］邱培勇，徐自超，陈正跃，等．黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响　’［Ｊ］．新乡医学院学报，２００６，２３（０６）：５８５～５８６．　［３３　Ｃｌｅｍｅｎｔ　Ｋｒｕｚｅｌ　Ｓ，Ｈｗａｎｇ　Ｓ　Ａ，Ｋｒｕｚｅｌ　Ｍ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｅ　ｍｏｄｕ—　ｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ　Ｐｒｏ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｂｙ　ｇｏｌｄｅｎｓｅａｌ　ａｎｄ　Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ　ｅｘｔｒａｃｔｓ．Ｊ　Ｍｅｄ　Ｆｏｏｄ，２００８，１１：４９３～４９８．　（４３张万义，陈维娟，邱云卿．升补宗气法论治老年充血性心力衰竭　［Ｊ］．山东中医杂志，２００７，２２（８）：４５４．　［５３王迎霞，郭全合，韩卫坤．黄芪、丹参联合治疗慢性乙型肝炎肝纤　维化的临床研究［Ｊ］．中国民康医学杂志，２００５，１７（７）：３６８￣３６９．