• 人肿瘤细胞DNA转化鼠NIH3T3细胞，形成转 化灶，可失去接触抑制，反复转化后，细 胞恶性化增殖，从鼠细胞DNA找到有人的 Alu重复序列，而且可分离出人的C-onc基因 。
⑶原癌基因异常激活机制与肿瘤 发生的相关性
• C-onc基因本身不致癌，不含有V-onc的病毒也 可使细胞发生转化。这可能与C-onc基因被异常 激活有关。C-onc等位基因中只要有一个发生改 变，甚至因一个密码子发生突变就能致癌。这 种现象在胚系不发生，在成体中常见。因此， 这与遗传性关系不大，尽管原癌基因可通过遗 传而稳定传代，但异常激活与遗传无关。与肿 瘤发生相关可能的机制为①基因突变、②基因 扩增、③染色体易位和基因重排、④病毒的启 动因子插入、⑤病毒之间的相互作用。 • 这些机制是以实验为依据结合临床例证提出的 假说，有局限性。肿瘤发生机制复杂，除C-onc 外可能还有其他机制。
1.癌基因致癌的分子机制
• ⑴逆转录病毒与癌基因——V-onc基因 • ⑵人原癌基因C-onc与V-onc的关系
• ⑶原癌基因异常激活机制与肿瘤发生的相 关性 • ⑷原癌基因的产物（癌蛋白）及其分类
⑴逆转录病毒与癌基因——V-onc 基因
• ①逆转录病毒的基因结构 • ②RV致细胞转化的性质 • ③V-onc基因
⑵人原癌基因C-onc与V-onc的关 系
• ①人原癌基因C-onc与V-onc同源 • ②C-onc基因与特定肿瘤的关系 • ③C-onc转化试验依据
①人原癌基因C-onc与V-onc同源
• V-onc探针分子杂交，发现人正常细胞和肿瘤细 胞中均有V-onc基因存在。这种存在于正常组织 细胞中与V-onc同源的C-onc基因称原癌基因（ protooncgene） • 病毒感染细胞后，整合到C-onc基因附近由病毒 的LTR启动表达，使C-onc激活，导致肿瘤。从 细胞内装配释放时又可俘获C-onc，传播扩散。 • C-onc基因中有内含子，高度保守，表达很低， 在染色体上定位，本身并不致癌，而且已成为 正常细胞的生存，生长，发育，分化等生命活 动中不可少的基因，如：C-myc（8q24）、Cmyb（6q22）、C-mys（8q22）等。
②基因扩增
• 指某些染色体局部区域基因拷贝数增加， 产生微小染色体（DM）或均匀强染色区（ HSR）。结肠癌、小细胞肺癌和神经母细胞 瘤的HSR区中myc可扩增100多倍。RNA比正 常高10倍。此外，鳞状细胞癌中C-erbB、胃 癌、乳腺癌和卵巢癌中的C-neu、肺癌中的 L-myc都有基因扩增，过度表达。（下一表 ）
①逆转录病毒的基因结构
• 逆转录病毒基因组两端为LTR，中间为gag、pol 、env等基因。其中，pol基因编码逆转录酶， 将病毒RNA逆转录成cDNA，并整合入宿主基因 组，以原病毒形式随宿主细胞繁殖传代，称纵 向传播。而LTR为启动子启动env等基因转录表 达，形成包膜，并包装、出芽释放，传布附近 细胞，称横向传播。
②RV致细胞转化的性质
• 急性（快速）转化型：Ⅰ感染后短期内（几天/几 周）体内出现实体瘤/白血病；Ⅱ癌基因位于病毒 基因组内；Ⅲ大多可使体外培养的细胞发生细胞 转化。
• 非急性（慢性）转化型：Ⅰ感染后需较长时间才 能致瘤；Ⅱ病毒基因组内不含基因；Ⅲ体外不能 使培养的细胞发生转化。 • 现已发现，鸟类Rous肉瘤病毒导致白血病。人T细 胞白血病病毒导致T细胞白血病。
㈠恶性肿瘤细胞的生物学特性
• ⒈无限增殖能力，可在体内形成瘤块 • ⒉细胞分化幼稚、原始
• ⒊细胞寿命长，有的在体外可长期培养、 传代建系 • ⒋细胞有定居、侵袭、迁移、转移能力
• ⒌细胞的染色体核型异常，为多倍体或异 倍体，甚至有标记染色体（如表）
㈡恶性肿瘤的发生分子机制
• • • • • 1.癌基因致癌的分子机制 2.抑癌基因及其致癌的分子机制 3.抑癌基因改变的分子基础 4.其他恶性表型相关的基因 5.研究恶性肿瘤发生的分子机制的医学 C-myb：白血病，淋巴瘤，卵巢癌 C-myc：Burkitt淋巴瘤，肺癌，乳腺癌等 C-ehl：慢性粒细胞白血病 C-msh：肠癌，胰癌，肺癌 C-gip：卵巢癌，肾上腺癌 C-gsp：垂体腺癌，甲状腺癌 C-ret：甲状腺癌
③C-onc转化试验依据
④病毒的启动因子插入
• 指原癌基因被5’-LTR插入后由LTR中的启动子 产生异常激活。 • 不含V-onc的鸟类白血病病毒（ALV）感染鸡 后，可整合到鸡细胞8号染色体上的C-myc 上游。其原病毒5’-LTR启动子异常激活C-myc ，使表达增加30-100倍，细胞增生，形成鸡 淋巴瘤。
③染色体易位和基因重排
• 易位是指某一段基因从染色体正常位置转移到另 一染色体上，形成异常的标记染色体，移位后在 新染色体上发生基因重排/重组，从而被异常激活 ，表达具蛋白激酶活性的蛋白，使原癌基因异常 激活：如Burkitt淋巴瘤是t（8：14）· （8：2）· t（ 8：22）易位，使C-myc处于2q区而被激活。慢粒 白血病是C-abl t（9：22）（9q34：22q11），重 排后形成bcr-abl融合基因，使P145变为P210，表 达酪氨酸激酶，从而异常激活。（如表）
③V-onc基因
• 在病毒基因组中含有与细胞恶性转化能力密切相 关的基因，称V-onc。因含在病毒基因组中的Vonc，其编码的蛋白质使细胞失去生长控制能力而 发生转化，呈现恶性表型，有关RV的V-onc基因已 发现有100多种。其中有10多种与人类肿瘤发生有 关。不同的V-onc均呈现有组织的特异性，不同的 V-onc，一旦整合到不同组织细胞的基因组中，有 时会导致肿瘤的发生。（如表）
①基因突变
• 一个密码子突变就会导致表达的蛋白异常 。人膀胱癌细胞（EJ/T24）的C-rasH基因序 列中的GGC（甘）变为GTC（缬）而使p21 蛋白发生改变而致癌。结肠癌、肺癌细胞 株中也存在类似现象。所以，C-rasH点突变 是异常激活导致恶性转化的关键。通常， ras基因的第12、16位突变是突变热点，可 导致p21蛋白序列、空间构型改变而使功能 改变。