铁皮石斛分子鉴定的研究进展
刘静静 (安徽中医药大学)
摘要:铁皮石斛是中国特有的名贵药材, 生长较慢、自然繁衍率很低的兰科附生
植物,一直以来和灵芝、人参和冬虫夏草等被列为上品中药,道家养生经典《道
藏》誉其为“中华九大仙草之首”,药用价值非常高,有“救命仙草”、“药中黄
金”的美称。铁皮石斛作为我国传统滋阴名贵中药,其保健价值为人们所熟知。
本文从铁皮石斛的分子鉴定、化学成分、功能活性研究等方面进行分类综述。
关键词:铁皮石斛、分子鉴定、进展与展望
铁皮石斛为兰科石斛属植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et
Migo)的干燥茎[1],因表皮呈铁绿色而得名。自古以来被认为是滋阴补益的珍品 ,
具有益胃生津 、滋阴清热 、明目利嗓等功效 。铁皮石斛是中国特有的名贵药
材, 生长较慢、自然繁衍率很低的兰科附生植物,一直以来和灵芝、人参和冬虫
夏草等被列为上品中药,道家养生经典《道藏》誉其为“中华九大仙草之首”,
药用价值非常高,有“救命仙草”、“药中黄金”的美称。铁皮石斛作为我国传统
滋阴名贵中药,其保健价值为人们所熟知。
这些年来许多学者都在探索从分子水平寻找鉴定铁皮石斛的有效方法,如基
于PCR的DNA分子标定技术、基于DNA序列分析的分子标记技术、基因芯片技术
等。
1 基于 PCR 的 DNA 分子标定技术 如限制性内切酶片段长度多态性( RFLP)、
随机扩增多态性DNA( RAPD)、扩增酶切片段多态性( AFLP)、PCRRFLP 等[2]。张
铭等[3] 用 RAPD 技术对石斛属内 26个品种和金石斛的 1 个品种进行了基因组
DNA 多态性分析, 设计成的特异性引物能方便快捷地鉴别出铁皮石斛。丁鸽等[4]
采用 RAPD 技术对铁皮石斛8个野生居群的遗传多样性、亲缘关系以及分子鉴别
等进行研究, 结果表明, 铁皮石斛居群间遗传差异明显, 具有较丰富的遗传多
样性。虞泓等[5] 用AFLP 技术对石斛属内石斛组4个品种和1个外类群种进行基
因组 DNA 多态性分析, 构建了药用石斛的DNA分子指纹图谱。 AFLP 方法较之
RAPD方法在可信度、灵敏度和经济实用等方面具有较大的优势。
2 基于 DNA 序列分析的分子标记技术 目前用于该测序的基因主要有叶绿体
基因组的 rbcL、matK、rpoC, 核基因组的 rRNA、 ITS( 植物类) , 线粒体基因
组的 cyt-b( 动物类)[2] 。张铭等[6] 用随机扩增多态性 DNA (RAPD) 技术对石
斛属内 26 个种和金石斛属的 1 个种进行基因组 DNA 多态性分析,设计出了能
方便快捷地鉴别出铁皮石斛成的特异性引物。这项技术为各种药材的分子鉴定提
供了一个全新的思路。 丁鸽等[7] 采用RAPD分子标记技术,对中国特有濒危植物
铁皮石斛的遗传多样性进行了研究。方法筛选随机引物进行RAPD分析,通过
UPGMA聚类,研究了铁皮石斛各居群及个体间的遗传关系,结果表明铁皮石斛居
群间存在明显遗传差异,遗传具有多样性。丁小余等[8]在铁皮石斛与其他 37 种
石斛的 rD N A IT S 序列的基础上,设计了一对位 点特殊性 PC R 鉴 别引物 T
P—JB0 1S 和T P —JB01X 鉴别铁皮石斛, 当退火温度降~1166 ℃ , 只有铁
皮石斛有阳性反应。
3 基因芯片技术 由于基因芯片从遗传的角度鉴别中药的物种, 但中药药效的
作用成分大多是多次代谢产物, 所以基因芯片鉴定的是中药的真伪而不是中药
的优劣, 因而它不能取代中药化学成分指纹图谱等的鉴定, 须和其他技术结合
才能在中药学现代化系统中发挥最佳作用[9]。
4 进展与展望
随着分子生物学及分子生药学技术的不断发展,关于铁皮石斛分子鉴定的研
究成果越来越多,研究也更加地深入。近年来,铁皮石斛市场需求不断扩大,由
于无节制的滥采滥挖,导致铁皮石斛的野生资源遭到严重破坏,再加上在自然条
件下种子萌发率低,生长缓慢,严重影响了商品铁皮石斛质量的稳定性,市场上
出现较多的铁皮石斛的伪劣品。所以,铁皮石斛的真伪鉴定及石斛属不同个体鉴
定的研究受到广泛重视,建立有效的铁皮石斛鉴定体系十分重要。除本文所述的
主要方法外,像 matK 基因序列、线粒体 nad 1 内含子序列比较等已应用于其
它药用石斛质量评价及真伪鉴定的新兴技术将为铁皮石斛的鉴定研究提供新的
途径 [10,11]。在准确鉴定铁皮石斛的基础上,深入开展有效成分和药理作用的研
究,建立一个铁皮石斛化学质量控制标准体系,为推向国际市场打下坚实的基础。
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