药理学动物实验基本方法
使用excel对试验对象完全随机分组的操作步骤如下:
LOGO
1.在单元格A1、B1、C1中分别键入编号、随机号、分组号, 随后在A2、A3中分别键入 1、 2,然后拖动鼠标利用 excel 的自动填充功能完成1~30的编号。
2.在B2单元格键入“=RAND() ”后回车产生一个随机数
对象:大、小鼠等。
特点:中等血量(0.2~0.3ml,小鼠;0.5~1.0ml,大白 鼠),避免动物死亡。
LOGO
3
断头采血
方法:左手以拇指和食指保持动物的头颈部,使
其头略下倾,右手持剪刀猛力剪断鼠颈,让血液
滴入盛器。
对象:大、小鼠等。
特点:需要血量较大(小白鼠可采血0.8~1.0ml,
右手将开口器 从一侧口角插 入口腔并固定。
胃管经开口器 的孔插入,向 前推进约15cm, 可达胃内。
在插管时应将 胃管另一端泡 在水中确认没 有冒气泡,即 可用注射器经 胃管注入药 液。
豚鼠灌胃同 家兔
LOGO
•皮下注射给药——大小鼠
颈背部、腋下、 腹侧和后肢的皮 下
实验动物的捉 拿.MPG
LOGO
•灌胃给药——大小鼠
剂量:小鼠约0.1-0.5ml/10g体重。最大体积为1.0ml/只 大鼠约1-2 ml/100g体重,最大体积为1.0ml/只
用右手食指将 针栓慢慢往下 压,将注射器 中的药液灌入 动物的胃中。
左手捉持动物, 使头部向上。
LOGO
•大鼠的捉持
以左手拇指和 食指捏住大鼠 两耳后部的头 颈皮肤,其余 三指和手掌握 住大鼠背部皮 肤,完成抓取 固定。
首先戴好防护 手套
用右手拇指和 食指抓住大鼠 尾巴中部将大 鼠提起,放在 大鼠饲养盒的 面罩上。
左手顺势按、 卡在大鼠躯干 背部,稍加压 力向头颈部滑 行。
药理学动物实验基本方法
药学院药理学科组
LOGO
Contents
1 2 3 4
实验动物的捉持与给药 实验动物的采血 实验动物的编号和分组 实验动物的麻醉
LOGO
小鼠
大鼠
一、捉持与给 药
豚鼠
家兔
犬
LOGO
回抽注射器针 栓,如有回血, 则证明针尖在 血管内,即可 推注药液。
LOGO
•静脉注射给药——兔
兔放在固定架内, 酒精消毒并揉搓 血管,使兔的耳 缘静脉充盈。
用左手食指和中 指夹住兔的耳缘 静脉的近端,拇 指绷紧静脉的远 端,无名指和小 指放在耳郭下作 垫。
字,然后同样利用其自动填充功能在 B2~B31生成一列随
机数。需注意的是这里产生的随机数是会随着单元格的操 作而变化的。故需选中“B2”至“B31”单元格区域,复制
所选中的区域,并以数据格式进行选择性粘贴。
LOGO
3.选中A 列、B 列,单击菜单栏“数据”→“排序”,在弹出的对话框中,选择以‘’随机数”为排 序的“主要关键字”,按“确定”按扭,则按B 列随机数字的大小完成A 列、B 列的排序。 4.分别在C2~C11、C12~C21 和C22~C31 单元格中,依次键入“1”、“2”、“3”;用鼠标同时
注射时,以左 手拇指和中指 捏住鼠尾两侧, 用食指从下面 托起尾,
右手持4号针 头的注射器, 使针头与 静脉平行 (小于30度角)
大鼠亦可用 舌下静脉注 射
LOGO
•静脉注射给药——犬
先将注射部位毛 剪去 。
前肢皮下头静脉 或后肢小隐静脉 注射 。
在静脉血管的 近心端,用乳 胶管扎紧肢体, 使血管充盈, 注射器针头向 静脉血管的近 心端方向穿刺 。
1、将灌胃针连 接在注射器上, 吸入一定量的 药液。
右手持针,把 灌胃针头的前 端放进动物的 口腔,顺着上 腭部插入咽部, 顺咽后壁轻轻 往下推。
LOGO
•灌胃给药——兔
将兔放进固 定架 内,灌胃者用左 手拇指和中指挤 压兔两颊,将下 颌挤开使兔被动 张口。
LOGO
•豚鼠的捉持
先用左手轻轻 扣、按住豚鼠 背部。
顺势抓紧其肩 胛上方皮肤, 拇指和食指环 箍其颈部。
用右手轻轻托 住其臀部, 即可将豚鼠抓 取固定。
LOGO
•兔的捉持
用左手托住兔 的臀部
家兔的固定方 式有腹卧式和 仰卧式两种
2
眼眶静脉丛采血
方法:用左手捉鼠,拇指及中指抓住头颈部皮肤,食指按
于眼后,使眼球轻度突出,眼底球后静脉丛淤血。右手持
取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管(临用前折断成1-1.5cm长的毛细管 段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用)刺入深度小鼠2~3mm,大
鼠4~5mm。当感到有阻力时再稍后退,得到所需要的血量 后,拔出。
三、实验动物编号与分组
(二)分组: 1、组别的要求: 正常对照组 模型组 阳性药组 药物不同剂量组
LOGO
(1)正常对照组 ① 要求 不加任何处理,指在正常条件下进行观察和对照,给药组如是灌
胃给药,对照组应用灌胃溶剂。 ② 目的 对比观察模型是否成功;观察被试药能否使病理改变恢复正常。
LOGO
6
静脉采血
方法:将家兔放在固定箱内,剪去拟采血耳壳上的毛,用电灯照射
加热或用二甲苯棉球涂擦耳壳,使耳部血管扩张。用粗针头刺破耳缘
静脉或以刀片在血管上切一小口,让血液自然流出,滴入已放有抗凝 剂的盛器中。采血完毕,用干棉球压住出血口,以待止血。如一时不
5
心脏采血
方法:将动物背位固定,在左胸第2至第4肋间剪毛一块,用碘酒和
酒精消毒。然后用配有7号针头的10ml注射器,在心跳最明显处作穿
刺。针头刺入心脏后即见血液流入注射器;或边刺边抽,直至血液流 入注射器。取得所需血量后,迅速将针头拔出,这样心肌上的穿刺孔
较易闭合。
对象:兔、豚鼠等。
特点:采血量较大,继续保存动物生命。
(5)尾巴根为10号。
(6)额部为20号
LOGO
2、双色涂染法: 在每组动物不超过100只的情况下用。
实验动物:大鼠、小鼠。
常用染色剂:
(1)3-5%苦味酸溶液,可染成黄色。
——作为“个”位数。
(2) 0.5%中性红或品红溶液,可染
成红色。——作为“十”位数。
选中A、B、C 列,单击菜单栏“数据”→“排序”命令,在弹出的“排序”对话框中,选择以“编号”
为排序的“主要关键字”,这样就可以得到各个实验对象的分组编号。(见表1)
LOGO
随机区组分组
随机区组分组是按照一定条件,将几个条件相同的试验对象分为一个区组,然后在每个区组内
注射针头取一 锐角角度刺入 皮下。
将针头轻轻向 左右 摆动,易 摆动则表示已 刺入皮下。
再轻轻抽吸, 如无回血, 可缓慢地将 药物注入皮下
LOGO
•静脉注射给药——大小鼠
将大小鼠放在金 属笼或小鼠固定 器 中,通过金属 笼或大小鼠固定 器的孔拉出鼠尾 巴
用左手捏住鼠 尾巴中下部, 用75% 酒精棉球反 复擦拭尾部
小剂量差以2~3的等比级数为宜;
LOGO
LOGO
(二)分组的方法
完全随机分组时将试验对象完全按随机原则分组。它的设计、
完全随机分组
分组、和统计处理都比较简单,但试验效率较低。 例:将30只SD 大鼠随机分配到甲、乙、丙3组。
(2)阳性药对照组 ① 要求 所选药必须是药典所有的或国家批准的药,如用西药,则采用公
认的,疗效可靠的。
② 目的 说明所用方法的可靠性;对比新药的优劣和特点。
(3)模型对照组 ① 要求 ② 目的 除不用药外,其他处理同给药组,模型要符合中医证或病的模型。 对比观察受试药的药理作用。
LOGO
大白鼠可采血5.0~8.0ml) ,且不需要继续保存
动物生命时用本法。
LOG
对象:大、小鼠等。
腹主动脉采血
方法:动物要麻醉后进行,用针管在腹主动脉分
特点:需要血量较大,且不需要继续保存动物生
命时用本法。
LOGO
右手拿注射器, 针尖的斜面朝 上,将针 头从远心端插 入血管
回抽有血即可 注射,拔针后 用棉球止血
豚鼠可用足 背静脉注射
实验动物的 给药.MPG
LOGO
二、实验动物的采血
尾尖采血 眼眶静脉丛采血 断头采血 腹主动脉采血 心脏采血 静脉采血
腹主动脉采血
1 2 3 4 5 6
(4)药物组
■一般应设三个剂量组,大动物,操作特殊困难者可设两
个剂量组;
■能够测出LD50的受试药物,动物试验给药剂量一般为
1/10~1/5 LD50;
■很多中药制剂毒性甚小,无法测出LD50者,一般常用人
用剂量(g或mg生药/kg体重)来折算动物用量;
■正式实验时常以等效剂量作为中剂量或小剂量,大、中、
LOGO
1
尾尖采血
方法:固定动物并露出鼠尾,将尾部在45℃的温水中 浸泡数分钟(或以二甲苯棉球涂擦),使尾部血管扩
张。将鼠尾擦干,用锐器切去尾尖0.3~0.5cm,让血
液滴入盛器或直接以血红蛋白吸管吸取。
对象:大、小鼠
特点:小量采血,可以多次采血。
LOGO
部按随机化原则,将每个对象分配到各组。
例:将SD大鼠32只,体重180g~220g,按体重大小配成8 个单位组,每个单位组中的4 只大鼠随 机分配接受A、B、C、D 4 种处理,试给出随机化分组的结果
LOGO
3、穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺
口表示一定号码的方法,原则是:左耳代表十位,右耳代
表个位。实验动物:兔、犬、猪 4、标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或 实验动物:犬、猴 5、烙印法 6、剪毛法