看书范围：P5-P6 不看模拟操作 完成P7 思考与探究
议
判断：1.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2.质粒上有细菌生活所必需的全部基因 3.没有限制酶就无法使用质粒运载体 4.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的 5.质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行 6.质粒必须具有抗生素基因以便筛选 7.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的双链DNA分子，不与蛋白质结合 8.质粒是存在于拟核中能够自主复制的小型环状DNA分子 9.载体能够在受体细胞中进行自我复制，但不能整合到染色体DNA上 10.运载体具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 11.运载体具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合 12.细菌的质粒、棉花的拟核、动植物病毒都可作为基因工程的载体 13.抗性基因可用于检测目的基因是否表达 14.抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 15.DNA连接酶只能连接两个末端具有互补碱基的DNA分子片段 16.DNA连接酶可连接双链的氢键,使双链延伸 17.DNA连接酶、解旋酶、RNA聚合酶和逆转录酶都能催化形成磷酸二酯键 18.相同的黏性末端能够按照碱基互补配对的原则通过氢键相连接，但这个过 程必须在DNA连接酶的催化条件下进行
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3.7对
判断：1.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2.质粒上有细菌生活所必需的全部基因 3.没有限制酶就无法使用质粒运载体 4.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的 5.质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行 6.质粒必须具有抗生素基因以便筛选 7.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的双链DNA分子，不与蛋白质结合 8.质粒是存在于拟核中能够自主复制的小型环状DNA分子 9.载体能够在受体细胞中进行自我复制，但不能整合到染色体DNA上 10.运载体具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 11.运载体具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合 12.细菌的质粒、棉花的拟核、动植物病毒都可作为基因工程的载体 13.抗性基因可用于检测目的基因是否表达 14.抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 15.DNA连接酶只能连接两个末端具有互补碱基的DNA分子片段 16.DNA连接酶可连接双链的氢键,使双链延伸 17.DNA连接酶、解旋酶、RNA聚合酶和逆转录酶都能催化形成磷酸二酯键 18.相同的黏性末端能够按照碱基互补配对的原则通过氢键相连接，但这个过 程必须在DNA连接酶的催化条件下进行
与拟核的共同点：
本质 环状 具有遗传效应 具有自我复制能力等
5.标记基因： （1）常见：抗生素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因、荧光 蛋白基因等 （2）作用：供重组DNA的鉴定和选择
下图左：可用含氨苄青霉素或四环素的培养基鉴定，导入重 组DNA的受体能存活
不能破坏标记基因（至少要保留一个标记基因） 题：抗氨苄青霉素基因和抗四环素抗性基因被称为标记基因 外源基因插入点有a、b、c，然后将三种重组DNA导入受体细胞， 其中能在加入氨苄青霉素的培养基中存活的是插入（a、b、c）点 的受体细胞,能在加入四环素的培养基中存活的是插入 （a、b、c） 点的受体细胞，若想受体细胞在四环素的培养基中存活就不能将外 源基因插入到 b点。
导
甲中限制酶的切点是鸟嘌呤脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸 之间 乙中限制酶的切点是胸腺嘧啶脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸之间 限制酶的作用特点是
基因突变后，限制酶不能识别切割位点。
①限制酶 ②DNA连接酶 ③解旋酶 ④DNA聚合酶
相邻碱 基如何 连接？
a：限制酶 DNA连接酶 DNA聚合
酶
b：解旋酶
导
2.作为载体的必备条件及原因 a.有一个或多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入； b.具备自我复制能力，且能在受体细胞中复制并稳定保存； c.有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择； d.对宿主细胞无害；e.大小合适，便于操作
评
病毒载体作为基因工程的工具，除具备 普通“质粒载体”的条件外，还应具有？ de
（3）载体与用于主动运输的载体本质是否相同？
4.质粒：是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并
具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。
本质：DNA
基本单位：脱氧核苷酸
被切割一次前后分别有0、2个游离的磷酸，
存在部位：许多细菌和酵母菌等生物中
不是只存在于细菌体内
注意：真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。
评 P6寻根问底：DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？
作用的底物分别是？作用的化学键都是 ，需要模板的是 ， 形成DNA子链的是 。基因工程是否需要DNA聚合酶？
二、“分子运输车” — 基因进入受体细胞的载体
1.作用：①作为运载工具，将目的基因导入 受体细胞。 ②在受体细胞内对目的基因进行大量复制
每种酶的酶切位点最好只有一个
（目的：防止切掉目的基因）
3.种类： 质粒（常用、不唯一）、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒
（1）能将目的基因导入大肠杆菌的是质粒 λ噬菌体的衍生物
专一性
（2）用做载体的动植物病毒不能灭活。
侵染性
题：将目的基因导入家蚕,在噬菌体和昆虫病毒这两种材料中,不选
用噬菌体作载体。
原因：噬菌体的宿主细胞是细菌，噬菌体不侵染家蚕
用做载体的动植物病毒能否灭活？
载体与用于主动运输的载体本质是否相同？
3.质粒：是一种裸露的、结构简单、独立于细菌 之外,并具有
能力的很小的 链 状 分子，本质 ，
基本单位
，被切割一次前后分别 个有 游离的磷酸，
是否只存在于细菌体内？
4.抗氨苄青霉素基因和抗四环素抗性基因在质粒DNA上被称为__
，作用？
评 一、 DNA连接酶——“分子缝合针”
①种类：
②作用：催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键，将两个双链 DNA片段缝合起来。
注意：连接具有相同末端的双链DNA片段 DNA连接酶能否连接氢键？能否连接单链DNA？ 对所连接的DNA片段是否具有选择性？对所缝合的序列是否进行特 异性识别？
评
• _（__1_）__和__（__5_）_能连接形成_________； • _（__2_）__和_（__7_）__能连接形成______； • _（__3_）__和_（__6_）__能连接形成______； • _（__4_）__和_（__8_）__能连接形成______．
能，二者具有相同的黏性末端
目的基因被切割两次，破坏4个磷酸二酯键
检
整体回顾，反刍内化，自我建构，自我检验
检
1. DNA连接酶种类：
根据
不同，可将其分为
和
，其中后者既可以
连接黏性末端，又可以连接平末端，且对 的效率比较低，其
来源于
。
2中能将
目的基因导入大肠杆菌的是 ，