三大营养物质的鉴定
脂肪的检测: 1、切片要尽可能的薄。 2、染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色。 3、观察时找最薄处,最好只有1—2层细胞。
蛋白质的检测: 1、用鸡蛋蛋白时,一定要加以稀释, 如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反 应后会粘固在试管内壁上,使反应不 彻底,且试管不易洗净。 2、双缩脲使用时,应先加A造成碱性 环境,再加B。
实验
糖类 脂肪 蛋白质 的鉴定
复习: 组成生物体的元素和化合物
组成生物体的元素
大量元素 微量元素 铁猛碰→新木桶
C H O N P S K Ca Mg Fe Mn B Zn Mo Cu 基本 主要 元素 元素
水、无机盐 无机化合物: 脂质、蛋白质 糖类、核酸 有机化合物:
组成生物体的化合物
如何鉴定这些营养物质?
实验原结果
一.实验原理
可溶性还原糖+斐林试剂
脂肪+苏丹III染液 脂肪+苏丹IV染液 蛋白质+双缩脲试剂 淀粉+碘液
50-65℃水浴加热 2min
砖红色沉淀
橘黄色
红色 紫色反应 蓝色
试剂
1、斐林试剂 (等量混合——先配现用) 甲液 质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 乙液 质量浓度为0.05g/ mL的CuSO4溶液 2、双缩脲试剂 A液 质量浓度0.1g/mL的NaOH溶液 B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液
三.实验步骤
1、还原性糖的鉴定:
制备组织样液 分别向两个试管中加入2ml组织样液
将0.1g/ml的NaOH溶液与0.05g/ mL 水浴 观察试管中 CuSO4等量混合均匀后,迅速使用,加 入到组织样液中1ml的斐林试剂 加热 的颜色变化
实验结果: 蓝色——棕色——砖红色沉淀
2.脂肪的鉴定:
制作临时装片,横切花生
向试管内注入2ml 待测组织样液
加入2滴碘液
观察颜色
实验结果:变蓝
实验注意事项:
糖类的检测: 1、选材要用含糖较高、颜色为白色或近于白色的 植物组织。 2、斐林试剂不稳定,一般配成甲液(NaOH: 0.1g/mL)乙液(CuSO4:0.05g/mL)来保存,使 用时必须将甲、乙两液混合均匀后使用,切勿分 别加入组织样液中进行检测。
二.材料用具
选材标准: 1. 富含该种有机物; 2. 颜色较浅, 3.便宜、容易获得、操作简单
还原性糖的鉴定:苹果、白梨 脂肪的鉴定 富含脂肪(植物油)的种子,如花生、核桃、蓖麻等的种子 蛋白质的鉴定 (1)植物组织样液:黄豆种子(浸泡1-2天), 或用豆浆 (2)动物组织样液:鸡蛋清 蛋清:水=1:10 稀释,搅拌均匀后, 用6-7层纱布过滤
滴一滴苏丹III染液(3分钟) 或苏丹IV染液(1分钟)染 色 观察
用50%酒精漂洗
实验结果:橘黄色或红色颗粒
3.蛋白质的鉴定:
豆浆或 蛋白液 向试管中加入0.1g/ml 的NaOH溶液1ml摇匀
向试管内加入 0.01g/mL的 CuSO4溶液4滴 摇匀
观察颜色变化
实验结果:由蓝色变为紫色
4.淀粉的鉴定: