【规范解答】 PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比
自 主
料管，请问此实验中能否用玻璃管来代替塑料管？为什么？
预
习
提示：不能，玻璃管对DNA具有吸附作用，如果用玻璃
管，DNA会吸附到管壁上，使反应无法进行。
课 时
作
要
业
点
导
学
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专题五 课题2
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自 主 预 习 要 点 导 学
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课标版·生物·选修1
要点导学
课 时
作
业
专题五 课题2
DNA拷贝 。
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专题五 课题2
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2．原理
自 主
(1) DNA的热变性：在 80～100 ℃的温度范围内，DNA
预
习 双螺旋 结构解体， 双链 分开，这个过程称为 变性 。
当温度缓慢 降低 后，两条彼此 分离
的DNA链又会重新
课 时
作
要 点
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结合成 双链
。
业
导
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要点一 PCR反应与体内DNA复制的比较
自 主 预 习
要 点 导 学
课标版·生物·选修1 课 时 作 业
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自 主 预 习 要 点 导 学
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自主预习
课 时
作
业
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专题五 课题2
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学习目标
目标解读
自 主
1.通过与细胞内的DNA复
预
习 制对比说明PCR的原理。
1.说明PCR的原理。(重点) 2．用流程图表示PCR的操
课 时
要 点
作步骤。
导
2．尝试PCR的基本操作。(重点) 作
业
3．理解PCR的原理。(难点)
作 业
导
学
(5)需要能严格控制 温度 的温控设备PCR仪。
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专题五 课题2
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问题思考1：什么是引物？若要克隆DNA，应加入几种特
自 主
定的引物？
预
习
提示：所谓引物是指两段与待扩增的DNA序列互补的一小
段DNA或RNA片段。DNA是由两条反向平行排列的脱氧核苷酸
课 时
作
要 点
长链构成的。在DNA扩增时，DNA聚合酶不能从头开始合成
业
导
学 DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链，因此克隆DNA时应加
入两种引物。
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专题五 课题2
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二、PCR反应过程
自 主
1． 变性 ：当温度上升到 90 ℃ 以上时，双链DNA
预
习 解聚 为单链。
预
习 峰，峰值的大小与DNA含量有关。
课
时
作
要
业
点
导
学
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专题五 课题2
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(2)测定方法
自 主 预 习 要 点 导 学
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专题五 课题2
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问题思考2：PCR反应通常使用的微量离心管是一种薄壁塑
自 主
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专
题 五
DNA和蛋白质技术
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专题五 DNA和蛋白质技术
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自 主 预 习
课题2
要 点 导 学
多聚酶链式反应扩增DNA片段
课 时
作
业
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自 主 预 习 要 点 导 学
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三、实验操作
自
主
预 习
作用：自动调控温度，实现DNA
的扩增
PCR仪替代者：用3个恒温水浴锅代替，操
课 时
要 点 导 学
1.
实验 用具
作时按程序在3个水浴锅中来回转 移PCR反应的微量离心管即可
作 业
微量离心管：总容积为0.5 mL，实际是进行
PCR反应的场所 微量移液器：用于定量转移PCR配方中的液
自 主
无论DNA是在细胞内还是在体外复制的过程都需要解旋，
预
习 因为只有解旋使碱基暴露，母链才能和子链配对，进行半保留
复制。但在细胞内，解旋通过解旋酶完成。生物体外，利用
课 时
作
要 点
DNA的热变性原理：80～100℃时DNA的双螺旋结构将解体，
业
导
学 双链分开。其结果相同，但过程不同。
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专题五 课题2
学
(2)子链的合成：①需要 引物 ；②合成方向总是从子链
的 5′端向3′端延伸 。
第6页
专题五 课题2
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3．条件
自 主
(1) DNA 模板。
预
习
(2)分别与模板DNA 两条链 相结合的两种 引物 。
(3)A、T、G、C四种 脱氧核苷酸 。
课 时
要 点
(4) 耐热 DNA聚合酶，一般用Taq DNA聚合酶。
程中，DNA不需要解旋，直接以双链DNA为模板进行复制
A．③④
B．①②
C．①③
D．②④
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专题五 课题2
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【思路启迪】 审题关键点：PCR过程与细胞内DNA复制
自 主
的过程。
预
习
解题思路：
课
时
作
要
业
点
导
学
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专题五 课题2
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自
主 预
PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不
习
同，它们是( )
课
①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA
时 作
要
业
点 导
②PCR过程不需要DNA聚合酶
③PCR过程中，DNA的解旋不
学 依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的 ④PCR过
2． 复性 ：温度下降到 50 ℃ 左右， 两种
引物通
课 时
要 点
过 碱基互补配对
与两条单链DNA结合。
作 业
导 学
3． 延伸 ：温度上升到 72 ℃ 左右，溶液中的四种脱
氧核苷酸在 DNA聚合酶 的作用下，根据碱基互补配对原则合
成新的DNA链。
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专题五 课题2
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学 3．尝试PCR的基本操作。
4．讨论PCR的应用。
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专题五 课题2
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知识梳理
自
主
预 习
一、PCR原理
1．概念：PCR即 多聚酶链式反应 ，是一种 体外
课
要 迅速 扩增DNA片段 的技术，它能以极少量的 DNA 为模
时 作 业
点 导 学
板，在短时间内复制出上百万份的
体，其上的一次性吸液枪头要用一次换一次
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2．实验步骤
自 主 预 习 要 点 导 学
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专题五 课题2
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3．DNA含量的测定
自 主
(1)原理：DNA在 260 nm 的紫外线波段有一强烈的吸收