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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如 果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
产品说明书
植物核蛋白提取试剂盒
（蛋白质组学实验适用）
货号：BB-319906
V1.7.0
试剂盒储存条件： 2-8℃保存。
开盖后组份按要求条件保存。
试剂盒组成：
产品组成
BB-319906-1
BB-319906-2
组份编号
规格
50 assays
100 assays
试剂 A：植物核蛋白提取液 A
100ml

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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
本试剂盒采用非酶法提取，提取过程简单方便，速度快，可在 1 小时内完成，而且绝少 交叉污染，但是蛋白回收率相比酶法较低。酶法提取制备的蛋白，回收率稍有提高，蛋白纯 度高，保持天然活性，但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的 提取试剂盒，对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒（相关产品 BB-319910）。 请根据实际需要选择试剂盒。
产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3104 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3126 BB-3105 BB-3702 BB-3181 BB-3183 BB-3187
产品 磷酸化蛋白富集试剂盒 膜蛋白提取试剂盒 活性蛋白提取试剂盒 BCA 蛋白定量试剂盒 植物核蛋白提取试剂盒 细菌膜蛋白提取试剂盒 植物总蛋白提取试剂盒 植物膜蛋白提取试剂盒 蛋白酶抑制剂混合物 真菌蛋白提取试剂盒 磷酸酶抑制剂混合物 SDS-PAGE 上样 Buffer 细菌蛋白提取盒（2D 电泳用） 酵母蛋白提取盒（2D 电泳用） 线粒体蛋白提取盒（2D 电泳用）
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材： 仪器 离心机 振荡器 Dounce匀浆器 涡旋混匀器 移液器 冰箱 冰盒
耗材 离心管 吸头
试剂 PBS
（pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约 含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
相关产品：
产品 总蛋白提取试剂盒 核蛋白提取试剂盒 膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒 Bradford 蛋白定量试剂盒 ECL 化学发光检测试剂盒 细胞蛋白提取试剂盒 组织蛋白提取试剂盒 细菌蛋白提取试剂盒 酵母蛋白提取试剂盒 昆虫蛋白提取试剂盒 磷酸化蛋白提取试剂盒 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 总蛋白提取试剂盒（2D 电泳用） 植物蛋白提取盒（2D 电泳用） 细菌膜蛋白提取盒（2D 电泳用）
3. 将匀浆用 100um 细胞筛过滤。
【注】： 没有细胞筛时可以不过滤，将匀浆液静置 1 分钟，待大的没有破碎的组织块自然沉降，吸 取上清。 部分黏液较多的植物样本可能难以吸取，可以将 1ml 吸头的口剪掉一点再吸。
4. 将滤液在 1000g 条件下离心 10 分钟，弃上清，收集沉淀。 5. 在沉淀中加入 200-300ul 提取液 B，充分混匀。 6. 置振荡器振荡 30 分钟。
本试剂盒的蛋白提取组份中不含有不可透析除去的去垢剂组份，不含 SDS、Triton X-100、chaps 等可能影响质谱实验的组份，最后得到的蛋白质样品经过透析或者脱盐处理 后将不含有去垢剂、高浓度盐等影响，基本可以满足下游任意的蛋白质组学相关实验研究。
本产品的蛋白酶抑制剂混合物中不含 AEBSF，可以避免由于 AEBSF 导致的质谱峰漂移， 因此使用本产品提取的蛋白样品可以用于质谱(Mass Spectrometry, MS)检测和分析，蛋白 质组学(proteomics)等相关研究。
产品简介： 贝博 TM BBproExtraTM 植物核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各
种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在 1 小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解植物核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合 物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
避免开盖时试剂损失。 3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并
彻底清除残留清洁剂。 6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
1. 提取液制备： 将试剂 B1 和试剂 B2 混合，配成蛋白提取液 B，充分混匀备用。 每 500ul 提取液 B 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
【注】： 蛋白提取液 B 置 4℃保存，长期不用的可以分装后-20℃保存。 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取 液。 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
200ml
319906A
试剂 B1：植物核蛋白提取液 B1
22.5 ml
45 ml
319906B1
试剂 B2：植物核蛋白提取液 B2
2.5 ml
5 ml
319906B2
试剂 C：蛋白酶抑制剂混合物
100ul
200ul
319906C
使用说明书
1
1
各组份储存条件：
蛋白提取液 A、B1：2-8℃保存；
提取液 B2、蛋白酶抑制剂：-20℃保存。
【注】： 建议用 BCA 法进行蛋白定量。相关产品：BB-3401。 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
10. 将蛋白样品透析处理或者脱盐柱脱盐处理后用于下游实验。


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邮箱：bestbio@ 电话：021-33921235
【注】： 用振荡器/摇床的较低转速，保持液体有轻微晃动即可。 没有低温振荡条件可以不振荡，在 2-8℃静置，稍微延长处理时间，中间每隔几分钟用移 液器吹打混匀。
7. 在 4℃，12000g 条件下离心 5 分钟。 8. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。 9. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或用于下游实验。
质量控制： 贝博 TM 对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
技术支持： 产品技术问题可发邮件至 bestbio@ 咨询。 如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议，欢迎您随时联系我们。
知识产权： 贝博 TM BBproExtraTM 系列试剂盒及其使用方法包含专有技术。
注意事项： 1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。 2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，
产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3106 BB-3401 BB-3154 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3127 BB-3311 BB-3703 BB-3182 BB-3185 BB-3191
提取液 A 长期不用请置-20℃保存。
【注】：
蛋白提取液 B2、蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以 2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。 避免反复冻融。
有效期： 一年。
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新： 贝博 TM 会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应 的版本更新。使用产品时，请参照试剂盒中随产品附带的印刷版说明书，不能 参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。 需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有 EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。 本试剂盒提取的蛋白也可用于 Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转 录活性分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。

2. 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的 200-500mg 植物组织样本用手术剪刀尽可能剪 碎，加入 1ml 提取液 A 后用匀浆机充分匀浆或者用 Dounce 匀浆器充分匀浆。
【注】： 匀浆尽可能充分。至无明显可见固体。 培养细胞直接收集细胞后用 Dounce 匀浆器匀浆即可，匀浆后加提取液 A 混匀后直接进 行以下步骤离心。 处理叶片等组织样本如果没有匀浆机，也可先加少量提取液 A 后用 Dounce 匀浆器充分匀 浆后再加提取液 A 混匀。
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
【注】： 经透析或脱盐离心柱处理的蛋白样品不含有去垢剂盒高浓度盐。
产品说明书
常见问题分析： 蛋白浓度低？ 植物核蛋白丰度比较低，在条件允许的情况下，尽可能增加样本量。 处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当增加试剂 A 的匀 浆次数，并适当延长试剂 A 和 B 的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理， 没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。 用什么方法定量蛋白？ 建议用 BCA 法，或者 Bradford 法。 提取时出现胶状沉淀？ 蛋白提取液处理产物中有时会出现少量透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为 含有基因组 DNA 等的复合物。不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的特定蛋白的 情况下，可以直接离心取上清进行后续实验即可；如果需要检测和基因组结合特别 紧密的蛋白，则可以通过超声处理，300w/10 秒间隔 10 秒，超声 3 分钟，随后离 心取上清用于后续实验。检测一些常见的转录因子，例如 NF-kappaB、p53 等时， 不必进行超声处理。 提取的蛋白具有活性吗？ 本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的 相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。