实验二 影响酶促反应的因素
➢11.试管夹
中国专业PPT设计交流论坛
➢12.滴管
➢13.白瓷板
➢14.恒温水浴箱
➢15.电炉
➢16.烧杯
【注意事项】
1.注意实验器材的干中P国o净专w业P,PeT设r计避交B流a免论r坛 杂质影响反应
结果
2.各管反应时间应严格控制,保证一致。
四、实验方法
• 稀释唾液制备 用水漱口,含蒸馏水咀嚼2分钟 后,把唾液吐进烧杯中备用。(注:唾液淀粉酶
(一)温度对酶促反应速度的影
管号
1响 2
3
缓冲液(pH6.8) 20滴
20滴
20滴
1%淀粉溶液
10滴
10滴
10滴
Power Bar 把三支管溶液摇匀,然后分别放至相应的温度中水浴预温
中国专业PPT设计交流论坛
预温温度
0℃
37℃
37℃
预温5分钟后取出,继续向各管加入相应唾液
稀释唾液
10滴
10滴
—
煮沸唾液
结果与分析
• 将各管混匀,放进37℃水浴 箱中保温。
• 取白瓷板一块,向各凹分别加
1滴碘液,每隔半分钟用P滴ow管er Bar
中国专业PPT设计交流论坛
或玻棒从2号管取溶液1滴, 加到已加有碘液的小凹中,观 察颜色变化,直至与碘不呈色 时(即只显棕黄色时),向各 管加碘液1滴,摇匀观察颜色 变化。
酶的专一性 中国专业PPT设计交流论坛
糊精
Power Bar 碘 中+国专业PPT设计交流论坛
麦芽糖和葡萄糖
+
碘
↓
紫色→红色→无色
↓
无色
• 利用淀粉及其水解产物的颜色反应,来比较唾液淀粉酶在 不同条件下催化淀粉水解的程度,从而判断温度、pH、 激动剂和抑制剂对酶的活性影响。
二、实验原理
在低温时,酶活性降低,酶促反应速度较慢,甚 至停止;随着温度升高,酶的活性恢复,反应速 度加快;当达到最适温度时,酶的活性最大,酶
3.pH6.8缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液 772ml,0.1mol/L柠檬酸溶液228ml, 混合即成.
4.pH8.0缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液 972ml,0.1mol/L柠檬酸溶液28ml混合即成.
➢5.0.9%NaCl溶液
➢6.1% CuSO4溶液
➢7.碘液 9.试管P架ower Bar
记勿摇动)。摇匀再观察。
(二)pH对酶促反应速度的影响
管号
1
2
3
1%淀粉溶液 pH5.0缓冲液 pH6.8缓冲液
10滴 10滴
Power Bar 10滴 — 中国专业PPT设计交流论坛
10滴
10滴 — —
pH8.0缓冲液
—
—
10滴
稀释唾液
5滴
5滴
5滴
把三支管摇匀,然后放至 37℃水浴10分钟,加碘2滴摇匀
促反应速度达到最大P。ow人e体r B内a大r 多数的酶的最适
温度在37℃左右。温中国度专业P过PT设高计交,流论坛酶变性失活,酶促 反应速度下降,甚至停止。
每种酶都有最适的pH值,在最适pH值时,酶的 活性最大,酶促反应速度最快;偏离酶的最适pH 均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀 粉酶的最适pH值为6.8。
实验二 温度、 pH值、 激活剂 和抑制 剂对酶
Power Bar
中国专业PPT设计交流论坛
一、实验目的
➢1.通过实验,观察温度、pH值、激活剂
Power Bar
与抑制剂对酶促反中国应专业P速PT设度计交流的论坛 影响。 ➢2.能运用所学的生化知识对实验结果进行
正确的分析。
淀粉
+
碘
↓
蓝色
二、实验原理
活性具有个体差异,中P国按o专w业下PPeT设述r计交B各流a论实r坛 验方法进行实验,
有部分同学可能失败,可重新操作,但在重做过 程中,要根据第一次实验结果改变稀释唾液的用 量,反应太慢,则增加稀释唾液用量,如果反应 太快,则减少稀释唾液的用量) • 煮沸唾液的制备 取上述唾液约5ml,放入沸水中 煮沸5分钟,取出备用。
(三)激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响
管号 1%淀粉溶液
1 10滴
2 10滴
3 10滴
4 10滴
pH6.8缓冲液 蒸馏水
10滴 10滴
Power Bar 2滴 — 中国专业PPT设计交流论坛
10滴 —
10滴 —
氯化钠溶液
—
2滴
—
—
CuSO4溶液
—
—
2滴
—
Na2SO4溶液
—
—
—
2滴
稀释唾液
5滴
5滴
—
—
10滴
把三支管摇匀,然后分别放至相应的温度中水浴10分钟,加碘2滴
水浴温度
0℃
37℃
37℃结果与分析来自• 取白瓷板一块,向各凹分别加1滴碘液,每
隔半分钟用滴管或Po玻w棒er从Ba2r号管取溶液1滴,
加到已加有碘液的中国专小业PP凹T设计中交流论,坛 观察颜色变化,
直至与碘不呈色时(即只显棕黄色时), 向各管加碘液1滴,摇匀观察颜色变化(切
激活剂与抑制剂
五、思考题 1. 什么是酶的最适温度?
2. 什么是酶的最适pH?
Power Bar 3中.国激专业活PPT设剂计交与流论抑坛 制剂对酶活性影
响实验中设置第四管的作用 是什么?
4. 什么是酶的特异性?
激活剂与抑制剂
(四) 酶的专一性对酶促反应的影响。
加入物
PH值6.8缓冲液 1%的淀粉 1%的蔗糖 煮沸唾液 稀释唾液
氯离子对唾液淀粉酶有激活作用;铜离子对唾液 淀粉酶有抑制作用。
三、实验材料
1.1%淀粉溶液 取可溶性淀粉1g, 加5ml蒸馏水, 调成糊状, 再加80ml蒸馏水, 加热并不断搅拌,
使其充分溶解, 放冷P, o最we后r用Ba蒸r馏水稀释至100ml。
中国专业PPT设计交流论坛
2.pH3.0缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液 205ml,0.1mol/L柠檬酸溶液795ml, 混合即成.
5滴
5滴
把三支管摇匀,然后放至 37℃水浴10分钟,加碘2滴摇匀
结果与分析
• 将各管摇匀,放进37℃水 浴箱中保温。取白瓷板一 块,向各凹分别加1滴碘
液,每隔半分钟用滴P管ow或er Bar
玻棒从2号管取溶液1中国滴专业,PPT设计交流论坛 加到已加有碘液的小凹中, 观察颜色变化,直至与碘 不呈色时(即只显棕黄色 时),向各管加碘液1滴, 摇匀,观察各管颜色变化。
结果与分析
1号管
20滴
Powe1r0滴Bar
中国专业PPT设计交流论坛
—— —— 5滴
2号管
20滴 10滴 —— 5滴 ——
3号管
20滴 —— 10滴 —— 5滴
(2)混匀,37 ℃水浴10min,分别加入班氏试剂20滴。 (3)各管摇匀置于沸水煮沸8-10min,观察结果并记录。
Power Bar