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血清蛋白电泳PPT精选课件

病理生理: Alb降低是由于肾小球滤过增加所致。α 1-球蛋白增加, 主要是小分子量的α 1糖蛋白增加,可能是为了补偿由于Alb降低引起 的低渗透压,虽然α 1糖蛋白也大量丢失于尿中,但体内合成量超过 排泄量,故仍可增高。α 2-球蛋白明显增加是由于α 2-球蛋白和低密 度脂蛋白相对增加所致。β 球蛋白降低主要是分子量小的转铁蛋白排 泄于尿中所致。γ -球蛋白降低主要是由于漏出于尿中及体内分解亢 进所造成,而慢性肾炎、狼疮性肾炎等γ -球蛋白增加,可能是由于 免疫刺激,使IgG增加所致。
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肾病型:由于肾小球受损引起低蛋白血症,蛋白尿,高脂血症
以及全身性水肿。
主要特征: Alb明显降低,α 1-球蛋白轻度增加,α 2-球蛋白明显增 加,γ -球蛋白降低、正常或增高。小儿类脂样肾病时,γ -球蛋白可 降低,有时可降低至零;成人肾病综合症时,γ -球蛋白通常增加, 特别是狼疮性肾病。
区带电泳(按支持介质):淀粉凝胶电泳 滤纸电泳 醋酸纤维素薄膜电泳 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳
按支持介质形式:水平式电泳、垂直电泳
按缓冲液pH值:连续pH和不连续pH电泳
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临床电泳项目
临床上以琼脂糖电泳法开展的电泳项目:
血清蛋白电泳 免疫固定电泳 尿蛋白电泳 同工酶电泳 脑脊液寡克隆电泳 本周氏蛋白电泳 脂蛋白电泳
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血清蛋白电泳区带
白蛋白区带:主要由白蛋白构成。 α 1-球蛋白区带: α 1-抗胰蛋白酶、 α 1-脂蛋白、 α 1-酸性糖蛋白 、甲状腺结合球蛋白、凝血酶原等。 α 2-球蛋白区带: α 2-巨球蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、 α 2-脂 蛋白、红细胞生成素等。 β -球蛋白区带:主要含铁蛋白、β -脂蛋白、补体C3、C4、β 2-微球 蛋白等。 γ -球蛋白区带含IgG、M、A、D、E免疫球蛋白。
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弥漫性肝损伤型
主要特征: Alb明显降低, α 1-球蛋白在轻度时可略增加,但肝细胞 破坏严重时,则α 1、α 2和β 球蛋白通常均降低,在胆汁郁积性肝炎 时,α 2和β 球蛋白可增高,γ -球蛋白轻度或中度增高。
病理生理: Alb虽合成减少,但其半衰期长,其浓度减少多出现于发 病后十天,随病情恢复而至正常,若为慢性则逐渐减少,其减少程度与 肝炎的严重程度相一致。α 1-球蛋白在肝炎初期,作为急性期反应物 质常增加,而肝损伤严重时则降低,在致命的肝功能衰竭时,α 1-球 蛋白可降低到很低水平。α 2-球蛋白的降低,可能是由于结合珠蛋白 合成降低所致,但胆汁郁积性肝炎时,由于脂蛋白增加,可见到α 2球蛋白部位增高,当急性肝坏死时,α 2-球蛋白则明显减少。β 球蛋 白在肝炎早期几乎无变化,当肝细胞损伤严重时合成减少。几乎所有 肝脏疾病γ -球蛋白因合成亢进均增高,其增加的范围与疾病的严重 程度相一致。
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血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳结果
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血清蛋白质的等电点、 平均相对分子量、及正常含量
清蛋白
A
α1
pI
4.88
5.06
相对分子量 6.9
20
(×104)
含量(%) 57~72 2~5
球蛋白
α2
β
5.06
5.12
30
9~15
γ 6.85~7.3 15.6~30
4~9
6.2~12 12~20
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正常血蛋白质电泳图谱
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肝硬化型
主要特征: Alb均有不同程度的降低,α 1、α 2和β 球蛋 白正常或降低,γ -G明显增高且宽度增加,可见β -γ 桥。
病理生理: 肝细胞受损导致Alb明显降低,β -γ 桥的出现 与血清免疫球蛋白,特别是IgA、IgM、IgG同时增加有关, 其中以IgA影响较大,当IgA和IgM泳动在β 和γ 之间,使β 区带与γ 区带融合而形成β -γ 桥。
电泳分析
血清蛋白电泳 血清免疫固定电泳
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电泳技术
电泳:溶液中带电粒子在电场中定向移动的现象 称为电泳(electrophoresis)。 电泳技术是利用带电粒子在电场作用下定向移动 的特性,对混合物组分进行分离、纯化和测定的 一项技术。
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电泳的分类
按分离目的:分析电泳和制备电泳 按电场强度:常压电泳和高压电泳 按电泳媒介:自由电泳和区带电泳
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原发性肝癌
主要特征: 在Alb与α 1-球蛋白之间出现一小的区带,称 为甲胎蛋白带。 病理生理; 肝癌时,血清中的甲胎蛋白浓度为正常人的 数十乃至数万倍。
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正常参考值
A:32~50g/L(60.3~71.4%) α 1:10~40g/L(1.4~2.9%) α 2:6~10g/L(7.2~11.3%) β :6~13g/L(8.1~12.7%) γ :7~15g/L(8.7~16.0%)
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临床意义
1、M蛋白(异常免疫球蛋白)血症: 在β-球蛋 白区、γ-球蛋白区或两者之间,出现区带细而浓 ,有时呈波浪状,在光密度计扫描图上呈尖陡高 峰的M蛋白带。 2、蛋白质缺乏症 3、肾病 4、急慢性炎症 5、肝病:肝硬化出现“β-γ桥”
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血清蛋白电泳(SPE)
检测蛋白质水平病理改变的方法和手段。
主要用于肝病、肾病、自身免疫病、血液病、多 发性骨髓瘤等蛋白质紊乱疾病的诊断。
电泳图谱不能直接对临床疾病进行确诊,但可通 过特征性图谱对某些疾病进行分类,评估疾病的 进程和活动状况,评价治疗方案是否有效。
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血清免疫固定电泳(IFE)
是一种包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个 过程的操作,是免疫沉淀反应的一种混合技术。 优势:将血清蛋白电泳、高分辩率、抗原-抗体特 异性免疫反应等有机结合,对蛋白进行分离和定 型,形象地观察Ig的各类重链和轻链分型。
原发性肝癌在Alb与α 1-球蛋白之间出现一小 的区带,称为甲胎蛋白带。
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异常血清蛋白电泳图谱及临床分析
急性炎症及应激型:当机体受到各种损伤或炎
症刺激时的病理现象。
主要特征: Alb减少或正常,α 1、α 2-球蛋白增高,γ 球蛋白增高不明显,当炎症转为慢性时,可明显增加。
病理生理: Alb下降主要是由于蛋白分解亢进所致,α 1和 α 2-球蛋白增加与急性时相反应蛋白α 1糖蛋白增加有关, β 区带减少是由于转铁蛋白分解代谢增加所致。新生儿由 于结合珠蛋白合成功能不完全,当有炎症病灶时,α 2区 带无明显增高,而α 1区带可明显增高。
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