pPICZα C
编号
北京华越洋生物 VECT3090
载体名称体基本信息 出品公司 : Invitrogen 载体名称 : pPICZalpha C, pPICZα C, pPICZalphaC, pPICZαC 质粒类型 : 毕赤酵母蛋白表达载体 表达水平 : 高拷贝 启动子 : AOX1 克隆方法 : 多克隆位点，限制性内切酶 载体大小 : 3598 bp 5' 测序引物及序列 : 5´ AOX1:5´-­‐GACTGGTTCCAATTGACAAGC-­‐3´ 3' 测序引物及序列 : 3´ AOX1:5´-­‐GCAAATGGCATTCTGACATCC-­‐3´ 载体标签 : C-­‐Myc, C-­‐His 载体抗性 : Zeocin 博来霉素 筛选标记 : HIS4 备注 : 插入基因是必需包含起始密码子 ATG。 产品目录号 : V195-­‐20 稳定性 : 稳定 Stable 组成型 : 组成型 Constitutive 病毒 /非病毒 : 非病毒 pPICZalpha C 载体质粒图谱和多克隆位点信息
•5'端含有 AOX1 启动子的严格调控， 利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因 （Ellis 等， 1985; Koutz 等人，1989;tschopp 等人，1987A） 。 •α-­‐因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。 •Zeocin 抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选 （Baron 等人,1992; Drocourt 等人， 1990） 。 •C-­‐端含 Myc 和 His 标签，可以用于检测和纯化重组蛋白。 •pPICZ A, B, C 三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。 pPICZalpha C 载体序列
VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR EFALRDPAGNCVHFVAEEQD" terminator 2608..2855 /gene="S. cerevisiae CYC1" /note="CYC1 terminator" /note="transcription terminator for CYC1" /note="color: #ffffff" rep_origin complement(2930..3518) /direction=LEFT /note="ori" /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" /note="color: #ffff00" ORIGIN 1 agatctaaca tccaaagacg aaaggttgaa tgaaaccttt ttgccatccg acatccacag 61 gtccattctc acacataagt gccaaacgca acaggagggg atacactagc agcagaccgt 121 tgcaaacgca ggacctccac tcctcttctc ctcaacaccc acttttgcca tcgaaaaacc 181 agcccagtta ttgggcttga ttggagctcg ctcattccaa ttccttctat taggctacta 241 acaccatgac tttattagcc tgtctatcct ggcccccctg gcgaggttca tgtttgttta 301 tttccgaatg caacaagctc cgcattacac ccgaacatca ctccagatga gggctttctg 361 agtgtggggt caaatagttt catgttcccc aaatggccca aaactgacag tttaaacgct 421 gtcttggaac ctaatatgac aaaagcgtga tctcatccaa gatgaactaa gtttggttcg 481 ttgaaatgct aacggccagt tggtcaaaaa gaaacttcca aaagtcggca taccgtttgt 541 cttgtttggt attgattgac gaatgctcaa aaataatctc attaatgctt agcgcagtct 601 ctctatcgct tctgaacccc ggtgcacctg tgccgaaacg caaatgggga aacacccgct 661 ttttggatga ttatgcattg tctccacatt gtatgcttcc aagattctgg tgggaatact 721 gctgatagcc taacgttcat gatcaaaatt taactgttct aacccctact tgacagcaat 781 atataaacag aaggaagctg ccctgtctta aacctttttt tttatcatca ttattagctt 841 actttcataa ttgcgactgg ttccaattga caagcttttg attttaacga cttttaacga 901 caacttgaga agatcaaaaa acaactaatt attcgaaacg atgagatttc cttcaatttt 961 tactgctgtt ttattcgcag catcctccgc attagctgct ccagtcaaca ctacaacaga 1021 agatgaaacg gcacaaattc cggctgaagc tgtcatcggt tactcagatt tagaagggga 1081 tttcgatgtt gctgttttgc cattttccaa cagcacaaat aacgggttat tgtttataaa 1141 tactactatt gccagcattg ctgctaaaga agaaggggta tctctcgaga agagagaggc 1201 tgaagcatcg atgaattcac gtggcccagc cggccgtctc ggatcggtac ctcgagccgc 1261 ggcggccgcc agctttctag aacaaaaact catctcagaa gaggatctga atagcgccgt 1321 cgaccatcat catcatcatc attgagtttg tagccttaga catgactgtt cctcagttca 1381 agttgggcac ttacgagaag accggtcttg ctagattcta atcaagagga tgtcagaatg 1441 ccatttgcct gagagatgca ggcttcattt ttgatacttt tttatttgta acctatatag 1501 tataggattt tttttgtcat tttgtttctt ctcgtacgag cttgctcctg atcagcctat 1561 ctcgcagctg atgaatatct tgtggtaggg gtttgggaaa atcattcgag tttgatgttt 1621 ttcttggtat ttcccactcc tcttcagagt acagaagatt aagtgagacc ttcgtttgtg 1681 cggatccccc acacaccata gcttcaaaat gtttctactc cttttttact cttccagatt 1741 ttctcggact ccgcgcatcg ccgtaccact tcaaaacacc caagcacagc atactaaatt
???2:??998?..?1195?/?#993366?/?pro?region ???3:?1196?..?1207?/?#993366 Cleavage sites after bases 997, 1195" /translation="MRFPSIFTAVLFAASSALAAPVNTTTEDETAQIPAEAVIGYSDLE GDFDVAVLPFSNSTNNGLLFINTTIASIAAKEEGVSLEKREAEA" misc_feature 1207..1281 /note="MCS" /note="multiple cloning site" /note="color: #99ccff" CDS 1280..1309 /codon_start=1 /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag" /note="Myc" /note="color: #cc99b2" /translation="EQKLISEEDL" CDS 1325..1342 /codon_start=1 /product="6xHis affinity tag" /note="6xHis" /note="color: #cc99b2" /translation="HHHHHH" terminator 1422..1668 /gene="Pichia pastoris AOX1" /note="AOX1 terminator" /note="transcription terminator for AOX1" /note="color: #ffffff" promoter 1708..2094 /gene="S. cerevisiae TEF1" /note="TEF1 promoter" /note="promoter for EF-1-alpha" /note="color: #ffffff; direction: RIGHT" promoter 2102..2149 /note="EM7 promoter" /note="synthetic bacterial promoter?" /note="color: #ffffff; direction: RIGHT" CDS 2168..2542 /codon_start=1 /gene="Sh?ble from?Streptoalloteichus hindustanus" /product="antibiotic-binding protein" /note="BleoR" /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and Zeocin(TM)" /note="color: #ccffcc" /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD