《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• 助色基团：是一种能使化合物以生电离作用的辅助原子团（酸碱性基团）。 它能使染色的色泽进一步加深，并使其与被染色组织具有亲和力。 助色基团的性质决定染料是酸性碱性。碱性染料具有碱性助色基团，在 溶酶中产生的带色部分为带正电荷的阳离子，易与组织细胞内带负电荷的物 质结合而显色。如细胞核内的主要化学成分脱氧化核糖核酸易被苏木素染成 紫蓝色，称嗜碱性。酸性染料具有酸性助色基团，在溶酶中产生带色部分为 阴离子，易与组织细胞内带正电荷部分结合而显色，此性质被称为嗜酸性， 如细胞浆内成分为蛋白质，易与伊红或橘黄结合呈红色或橘黄色。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
第三节 涂片的固定
• 固定的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所 致的腐败；固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破坏细胞 内溶酶体酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰， 易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清 晰，染色效果愈好。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
但数量过少，还不能完全排除癌前期病变或高度炎症增生生的可能，建议临床 重复送检。 • Ⅳ级：阳性。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（3）五级分类法 • Ⅰ级：无核异质细胞。 • Ⅱ级：少量轻度核异质细胞，但无恶性证据。 • Ⅲ级：有较多重度核异质细胞，但不能肯定为恶性。 • Ⅳ级：有大量重度核异质细胞，但仍缺乏典型恶性肿瘤细胞的证据。 • Ⅴ级：发现典型恶性肿瘤细胞，根据其细胞形态，作出初步的分类。
颗粒与核安危质结构显示较清晰。操作简便。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
第五节 涂片的观察与诊断
一、涂片观察的方法 • 为提高诊断率和防止造成差错，检查涂片前必须严格核对涂片编号，
了解送检单上填写的全部资料；阅片要全面、认真、细心观察。 • 因涂片中细胞成分分布极为分散，所以显微镜观察时必须按顺序视全
• 第二，标本采集后，应尽快做出处理、以最快的速度制片，否则标本凝固或 pH值改变，引起细胞形态变化或自溶、腐败等，影响诊断结果。
• 第三，制片时操作应轻巧，以免损伤细胞。涂片的厚薄应适宜，太厚则细胞 过多、重叠．不易染色且细胞形态不易辨别；太薄则细胞稀少，影响阳性的 检出率。一张好的涂片应是分布均匀、厚薄适宜，涂片呈舌状，分为头、体 、尾三部分，镜下各个视野均有细胞成分，红细胞无明显重叠现象。
• （1）肿块暴露较好，操作较方便。 • （2）怀疑原发性病灶的肿块。 • （3）淋巴结或肿块较大、较硬，无液化、坏死或继发感染者。 • （4）穿刺点应避开体表血管、炎症及溃疡等部位，且肿物邻近无重要神经
、血管、脏器。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
2．细针吸取细胞学的优点
• （1）穿刺抽取操作简单易片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将滴管前端平行置于 标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸 、腹水标本。 （5）喷射法：用配细针头的注射器将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片 上，此法适用于各种吸取的液体标本。 （6）印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上， 轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。
• （2）操作安全，极少发生副作用或意外，病人痛苦小，不需切开，无明显 瘢痕形成。
• （3）取样迅速、制片、诊断亦较快．一般仅需1h左右．可用于手术中的快 速诊断。
• （4）应用范围，几乎适用于任何部位。穿刺检查可到达人体不同组织器官 的病灶，并可同时对多个肿块进行穿刺提高了阳性率及准确率。
• （5）可对同—肿物进行多次穿刺，重复检在，有利于动态观察肿块的生长
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（三）灌洗法 • 此法是通过向空腔器官灌注一定量生理盐水等液体，运用冲洗、振动、揉捏
等方法，使空腔器官中的某些细胞包括癌细胞脱落于其中，然后将灌洗液取 出，经适当处理后检查。 （四）摩擦法 • 此法主要采用摩擦工具，摩揉病变区的粘膜直接涂片。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（二）自然分泌液的收集法 自然分泌液包括痰液、尿液、前列腺液、乳头溢液等。 • 1．痰液涂片检查 因痰液为支气管等呼吸道的分泌物，对支气管肺癌和呼
吸道的疾病诊断具有重要价值。 • 2．尿液涂片检查 泌尿道的上皮、炎症细胞及恶性肿瘤细胞等均可在腔内
脱落，随尿液排出，因此，收集尿液细胞作检查，对泌尿道肿痛及某些疾病 诊断有一定意义。 • 3．前列腺液涂片检查 采用前列腺按摩法取得分泌物作涂片，对前列腺炎 及癌的诊断有一定价值。 • 4．乳头溢液涂片检查 用于诊断乳腺病。
第一节 标本采集
标本采集是脱落细胞学检验的基础，也是细胞学诊断成败的关键之一。 一、标本采集的原则 • 正确选择采集部位，尽可能自病变区直接采取细胞。 • 采集的标本必须保持新鲜，以免细胞自溶或腐败。 • 尽可能避免干扰物，如血液、粘液等混入标本内。 • 采集方法应简便，病人少受痛苫，且不致引起严重的并发症或促使肿瘤扩散
重复送检。 • Ⅲ级：阳性。涂片中发现典型癌细胞，有时根据癌细胞形态特征及分
布，初步进行分类。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（2）四级分类法：将细胞学检查结果分为阴性、核异质，可疑和阳性四级。 • Ⅰ级：阴性。 • Ⅱ级：核异质。涂片中发现少量核异质细胞，由高度炎症增生所致。 • Ⅲ级：可疑。涂片中见重度核异质细胞，其形态基本符合恶性肿瘤细胞标准，
脱落细胞学检验 ---脱落细胞学基本技术
戚永孝
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
概述
脱落细胞学技术是本课程的重要内容。脱落细胞检验者除 要熟练掌握细胞形态学特征外，还必须掌握各项操作技术 和观察方法。包括标本的采集、制片、固定、染色、镜下 观察以及书写诊断报告等。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• 染色的化学作用是渗入组织细胞的染料与其相应的物质起化学反应，产生有 色的化合物。 各染料都具有两种性质，即产生颜色；与组织形成亲和力。这两种性质 主要由发色基因和助色基因所产生的。 发色基团：苯的衍生物具有可见光区吸收带。这些衍生物的吸收带与其 价键的不稳定性有关，如对苯二酚为无色，当其氧化后失去两个氢原子，它 的分子或则变为有黄色的对醌，这种产生颜色的醌式环称为发色基团。若一 种化合物含有几个环，只要其中有一个醌式环就会发出颜色，称此发色基团 为色原.
• 第六．标本一般应制片4张以上，并逐张固定、染色及镜检，以防遗漏。 • 第七，涂片应统一进行编号、登记，以免混淆。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
二、涂片的制备方法
（1）推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小 滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。 （2）涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布 ，由玻片中心经顺时针方向外转圈涂抹；或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹 要均匀，不宜重复。 （3）压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻 片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰 液。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• 第四，若液体标本内缺乏蛋白质时，在制片过程户，可先在玻片上涂上粘附 剂（如甘油血清、甘油蛋白、血清等）或直接在液体标本中加入粘附剂，以 防标本在固定及染色过程中脱落。
• 第五，应采取标本的各部分制片，特别是对于组织钳取物及较大组织的印片 ，并尽可能选取具有代表件的部位制片，以减少漏诊，提高阳性的检出率。
、发展或肿块放疗、化疗的疗效。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
第二节 涂片制作
良好、适宜的涂片是脱落细胞学能否正确诊断的重要条件之一。
一、涂片制备的原则：
• 第一，在标本制片之前，要把材料准备好，如载玻片、推片、盖玻片、滴管 等，各种用品均要求清洁、干燥，载玻片要求表面光滑，无油渍、无划痕及 破损等。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
第四节 涂片的染色
• 1．染色的目的和原理：染色的目的是借助于一种或多种染料，使组 织和细胞内结构分别着不同的染色，这样在显微镜下能清楚地观察细 胞内部结构，作出正确判断。 组织细胞染色原理至今尚无满意的解释，可能是物理作用，也可 能是化学作用，或者是两者综合作用的结果。 染色的物理作用是利用毛细管现象，渗透、吸收和吸附作用，使 染料的色素颗粒牢固地进入组织细胞，并使其显色。
张涂片，用推进器从左至右。自上而下移动，仔细观察每一个视野， 归后将盖片边缘亦做仔细检查，防止漏诊（图20-1）。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
图20-1 观察切片的移动法 A错误的玻片移动法 B正确的玻片移动法
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
• 涂片细胞学检查十分重视低倍观察，先宏观涂片中各种细 胞成分，发现异常细胞时，再转换高倍视野，仔细观察细 胞结构，明确性质，做出正确诊断。
实地反映细胞学所见。比较客观。目前有三级、四级、和五级三种分类方法。五级分 类法过于繁琐，实际应用中较难掌握。因此国内仍常用三级或四级分类法，该两种分 类 法较为简单明确，易于掌握，能够更准确地反映涂片的本质。
《脱落细胞学》
台州学院医学院检验系
（1）三级分类法：将细胞学检查结果分为阴性，可疑和阳性三级。 • Ⅰ级：阴性：无核异质细胞，涂片中均为正常细胞或一般退变细胞。 • Ⅱ级：可疑。涂片中发现核异质细胞，但不能肯定的是肿瘤细胞，应
适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。此方法
的缺点是染色程序比较复杂。
（2）苏木精—伊红（HE）染色法：该方法染色透明度好，核与胞质对比鲜
明。染色步骤简便，效果稳定。适用于痰液涂片，异质核呈紫蓝色，胞质淡