２ｌ
７１１例初筛阴性献血者中，ＥＬＩＳＡ试剂复检阳性率为１．１５％（２４９／２１７１１），初筛漏检率为Ｉ．０７％（２４９／２３１９５）， 初筛操作
其中初筛试剂因素漏检率为０．９５％（２２０／２３１９５）；人为因素失误漏检２９例，占１１．６％（２９／２４９）。结论
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者应严格按照金标快速法试剂的操作要求进行操作，对进一步提高金标快速法试剂的灵敏性，减少血液的浪费，降低 输血传播疾病的风险。确保输血安全具有重要意义。 【关键词】 献血者ＨＢｓＡｇ金标快速试剂漏检
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分布为（＋＋），幽门螺杆菌数量多或成团分布为（＋＋ ＋）。 ２结果 将２００例病例进行分组，轻度慢性浅表性胃炎１１０例， ＨＰ检出的阳性率为８８．２％，中度慢性浅表性胃炎４０例， ＨＰ检出的阳性率为９０％，重度慢性浅表性胃炎３０例，ＨＰ 检出的阳性率为９３．３％，胃溃疡２０例，ＨＰ检出的阳性率 为９０％；其中胃窦部１５２例，ＨＰ检出的阳性率为９４．７％， ３６例于胃体，ＨＰ检出的阳性率为７７．８％，１２例于胃底部， ＨＰ检出的阳性率为５８．３％。检测结果见表１和表２。 表１ ＨＰ与病变严重程度关系
自１９９８年《中华人民共和国献血法》颁布实施以来， 本中心无偿献血主要来源是单位职工和街头自愿无偿献血 者。我国属肝炎高发区，人群乙肝表面抗原阳性率达８％ 一１０％，广东地区阳性率甚至高达１０％～１５％。为减少血 液浪费，保障血液安全，本中心采用金标快速法试剂对献 血者献血前进行ＨＢｓＡｇ初筛，初筛合格血液进一步采用 ＥＬＩＳＡ试剂检测ＨＢｓＡｇ。笔者对两种不同试剂进行比较， 现报告如下。 １材料与方法 Ｉ．Ｉ标本来源：２００６年１１月—２００７年２月间２１ ４５５例单 位和街头自愿无偿献血者，主要为在校大学生及普通市民， 年龄１８—５５岁。 １．２试剂及设备：ＨＢｓＡｇ初筛试剂为北京万泰金标快速试 剂，ＨＢｓＡｇ酶免试剂（ＥＬＩＳＡ法）为上海科华ＥＬＩＳＡ试剂 盒。Ｍｉｃｒｏｌａｂ ＳＴＡＲ全自动加样仪，Ｍｉｃｒｏｌａｂ ＦＡＭＥ自动酶 免分析仪（瑞士）。 １．３操作方法：金标法：将试纸条平放并用透明胶带将其 固定在纸板上，取６０—８０出末梢血，滴于试纸条加样端， 让血液自动通过滤纸膜向检测端移动。若血量少，可加一 滴样品稀释液起助推作用。在适宜温度下，室温１５ ｍｉｎ后 判读结果，合格者采集血液，并留取血样进行ＥＬＩＳＡ法复 检。ＥＬＩＳＡ法：严格按试剂盒操作说明书进行操作。 １．４初筛试剂复试：ＥＬＩＳＡ法阳性标本，经离心分离血浆 后采用金标快速试剂重新检测。 １．５试剂灵敏度检测：采用卫生部临检中心０．５ ｎｇ和１．０
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参考文献： ［１］任力，黄连贵，胡悦，等．湖北松滋地区乙型肝 炎病毒感染状况调查［Ｊ］．检验医学与临床，２００７， ４（３）：１８８． ［２］杨伯青．３种方法检测乙型肝炎表面抗原ｌ例［Ｊ］．
检验医学与临床，２００７，４（３）：２２４． ［３］ 王卓红．胶体全免疫层析法检测全血与血清标本中的 ＨＢｓＡｇ的比较［Ｊ］．福建医药杂志，１９９９，２１（５）：
Ｐ＜０．ｏｌ
［４］陆伟，孟黎明，李会英，等．ＢＡＭＢ胃幽门螺旋杆 菌染色法的临床应用［Ｊ］．天津医科大学学报， ２００２，８（２）：２３２． ［５］荆孟荔，陈玉丽．幽门螺旋杆菌两种检测方法的比较 ［Ｊ］．福建医药杂志，２００４，２６（５）：１３８—１３９． （收稿日期：２００８—０５—１２）
ＨＰ是一种微需氧革兰阴性杆菌，呈螺旋形。ＨＰ感染 是一个世界性的问题，我国属于感染率较高的国家，自然 人群的感染率为４０％一６０％呤Ｊ。因此，检测ＨＰ感染是ｆ临 床诊断，治疗ＨＰ感染和临床观察药效的重要方面。目前， 临床上检测ＨＰ的方法很多。但是国内外仍然公认，在胃
Ｂｉｏｓｃｉ－ １．５
ＰＣＲ体系：每个ＰＣＲ反应体系为５０“ｌ，其中包含基
０．５
因组ＤＮＡ
ｔｏ，１０×ＰＣＲ缓冲液５出，２５
ｍｍｏｌ／Ｌ
Ｍｇｃｌ２３一，１０
ｍｍｏｌ／Ｌ ｄＮＴＰ
ｌ一，５ Ｕ／ｔｏ Ｔａｑ酶（ｐｒｏｍｅｇａ
ｍｏｉ／
公司）０．５山。１０ Ｉｘｍｏｌ／ｔｏ特异性引物２．５山，１０ ｔｏ ｍ内对照引物０．７５一。
ＨＢｓＡｇ质控品对金标快速试剂和ＥＬＩＳＡ试剂进行对比分
析。 １．６结果判断：金标法判断：金标试纸条阳性对照线呈紫 红色判试剂有效，若对照线和检测线出现紫红色者为判初 筛阳性；若只有对照线出现紫红色反应判初筛阴性（合 格）。ＥｔＪＳＡ法判断：结果判读按照试剂盒说明书进行，ｓ／ ＣＯ≥１．０判定为结果阳性。Ｓ／ＣＯ＜１．０判定为结果阴性。 ２结果 ２．１初筛阳性率：２３ １９５例自愿无偿献血者中，金标快速 试剂初筛ＨＢｓＡｇ阳性１ ４８４例，初筛阳性率为６．４％。 ２．２复检阳性率：２１ ７１１例ＨＢｓＡｇ初筛阴性献血者中， ＥＬＩＳＡ试剂检测阳性２４９例，检出率为１．１５％（２４９／ ２１７１１）。初筛漏检率为１．０７％（２４９／２３１９５）。 ２．３初筛试剂因素漏检率：采用金标快速试剂复查２４９例 ＨＢｓＡｇ阳性血标本，仍然呈阴性反应２２０例，复检阳性２９ 例。金标快速试剂因素漏检率为０．９５％（２２０／２３１９５）；人 为因素失误漏检占１１．６％（２９／２４９）。 ２．４无偿献血者总阳性率：２３ １９５名献血者中，ＨＢｓＡｇ初 筛阳性１ ４８４例，ＥＬＩＳＡ试剂复检阳性２４９例，ＨＢｓＡｇ总阳
１．６
ＰＣＲ扩增：采用ＰＥ－９７００ ＰＣＲ扩增仪进行扩增，首先
９５℃变性２ ｒａｉｎ，接着变性、复性、延伸，循环３２次，最 后７２℃延伸１０ ｒａｉ产物１０山，在含１∥ｔｏ
ＨＢｓＡｇ阳性率达７．５％，而通过对捐血前献血者ＨＢｓＡｇ初 筛，可大大降低血液的ＨＢｓＡｇ检出率（１．１５％）。因此， 采用金标快速法对献血者进行ＨＢｓＡｇ筛查，对减少血液资 源的浪费，降低输血传播疾病的风险，确保输血安全具有 重要意义。 ＥＬＩＳＡ法具有较高的灵敏度和特异性，是目前临床公 认的乙肝病毒血清标志物诊断方法雌Ｊ。金标快速法与 ＥＬＩＳＡ法相比，具有操作简单、快速和不需复杂的仪器设 备等优点旧引。因此，ＨＢｓＡｇ金标快速法已广泛应用于献血 者捐血前的初筛。本文通过对２４９例ＥＬＩＳＡ法ＨＢｓＡｇ复检 阳性标本进行分析，再次采用进行检测，结果发现２９例金 标快速法复试呈阳性反应，提示金标快速法筛查献血者 ＨＢｓＡｇ，存在人为操作误差导致的漏检或试剂的批间差异。 笔者认为，金标快速法漏检的原因主要有以下几方面：① 取末梢血量少，导致弱阳性标本漏检。而且外出采血时取 献血者的末梢血，通常会滴加起助推作用的样品稀释液， 使受检血标本稀释。②操作者未按照金标快速试剂规定的 反应时间（１５—３０分钟）报结果，标本反应时间短，导致 弱阳性标本漏检。③人为因素误判结果或报告错误。④环 境因素导致弱阳性标本漏检。室外环境差，冬天温度低于 １５℃，夏天高于３０℃，对本实验的结果有一定的影响。⑤ 金标快速试剂可能存在批次间灵敏性差异。综合以上原因， 其中取末梢血量少，是造成弱阳性标本漏检的最重要的原 因。 综上所述，初筛操作者应严格按照金标快速法试剂的 操作要求进行操作，试剂反应时间充分，取血量充足，结 果观察认真。这样才能进一步提高金标快速法试剂的灵敏 性，减少血液的浪费，保证输血安全。
ｎｇ
性率为７．５％。 ２．５试剂灵敏度比较：金标快速试剂和ＥＬＩＳＡ试剂分别检 测０．５ ｎｇ和１．０ 表１
ｎｇ
ＨＢｓＡｇ质控品，结果见表ｌ。
卫生部临检中心质控品金标 法和ＥＬＩＳＡ法灵敏度比较
３讨论 我国属肝炎高发区，正常人群中ＨＢｓＡｇ阳性率为８％
～１０％Ｉｌ Ｊ。从本文筛查结果显示，广州地区无偿献血者中
３
个碱基缺失产生外，其他的ＨＰＡ基因均具有单核苷酸多态 性（ＳＮＰ）。ＨＰＡ可介导同种抗体的产生，引起同种免疫反 应，引发同种免疫性血小板减少，如输血后血小板减少性 紫癜（ＦｒＰ）、血小板输注无效（ＰＴＲ）及新生儿同种免疫 血小板减少性紫癜（ＮＡＩＴＰ），同时在临床器官移植中，还 会引起移植排斥等相关的疾病。故准确检测和鉴定ＨＰＡ， 对于临床医学和输血实践具有重要意义。由于不同的种族、 地区，ＨＰＡ特异性分布不同１１ Ｊ，我们采用ＰＣＲ．ＳＳＰ（序列 特异性引物）方法对部分机采血小板献血者进行ＨＰＡ－９基 因分型，检测报告如下。 １材料与方法 １．１样本：随机选取广州地区固定机采血小板供者１４４ 例，均为汉族（祖父母、父母均为汉族）相互间无血缘关系。 １．２仪器设备：ＰＥ一９７００ ＰＣＲ扩增仪（美国ＰＥ公司生 产）、ＧｅｎｅＱｕａｎｔ核酸蛋白测定仪（美国Ａｍｅｒｓｈａｍ
９２－９３．
（收稿Ｅｔ期：２００８—０７—２４）
广州汉族人群ＨＰＡ一９多态性调查
陈扬凯夏文杰 叶 欣 罗广平
付涌水徐秀章
丁浩强
邓
晶
广州血液中心临床输血研究所（广州５１００９５） 【摘要】
目的调查广州地区汉族人群血小板抗原ＨＰＡ－９多态性分布情况。方法 用ＰＣＲ—ＳＳＰ技术对１４４
例广州地区固定机采血小板供者进行ＨＰＡ－９基因分型。结果检出ＨＰＡ－９ａ １４４例，未检出ＨＰＡ－ｇｂｗ。研究人群ＨＰＡ－ ９的基因型分布与Ｈ．ｗ法则吻合。与不同国家和地区ＨＰＡ－９基因频率比较无显著性差异（Ｐ＞０．９００）。结论填补了 广州地区人群ＨＰＡ－９多态性分布数据的空白，可以作为本地区血小板供者ＨＰＡ资料库。
阴性例数
阳性例数鑫抟
阳性率 （％）
结果分析［Ｊ］．临床医学，２００５，２５（２）：３０－３１． ［２］黄彩儿．一种新的简便的幽门螺旋杆菌染色法［Ｊ］． 中华病理学杂志，１９９６，２５（５）：２６９． ［３］陈灏珠．实用内科学［Ｍ］．北京：人民卫生出版 社。１９９７．１５６６．
ｒ＝２２．１０３ ３讨论
窦和胃体取多块活检，同时进行尿素酶试验、组织学检查 及细菌培养，是诊断ＨＰ感染最可靠的方法。有研究报道 应用硼酸美蓝染色法对胃黏膜组织蜡块进行ＨＰ染色，可 取得满意效果，提高了ＨＰ诊断率∞Ｊ。本研究应用硼酸美 蓝染色改良法对我院２００例慢性胃炎及胃溃疡患者的纤维 内镜活检组织石蜡切片进行ＨＰ检测，结果发现慢性胃炎 与胃溃疡ＨＰ感染率无明显统计学意义（Ｐ＞０．０５），慢性 胃炎感染ＨＰ的数量与炎症严重程度、活动性和胃黏膜损 伤有关，即炎症越重，感染ＨＰ的数量就越多，但是无统 计学意义，可能与检测的病例数量有关，有待进一步研究。 胃窦、胃体、胃底部三个部位ＨＰ感染率具有明显的统计 学意义（Ｐ＜０．０１），胃窦部感染率明显高于胃体部，胃体 部高于胃底部，胃窦部感染率明显高于胃底部。有研究报 道，慢性胃炎中ＨＰ感染率为５４％～１００％，多数在７０％以 上，慢性活动性胃炎患者的ＨＰ感染率更高，在９０％以 上Ｈ１。本文应用硼酸美蓝染色改良法检测ＨＰ感染率为 ５８％一９４％，感染率与研究报道结果一致。硼酸美蓝染色 改良法由于其操作简单、省时、成本低，而且菌体显示清 晰，试剂不易变质，因此是一种比较理想的染色法，便于 病理科开展常规的ＨＰ检测。 参考文献： ［１］谢天舜，章小玲．不同部位活检检测幽门螺旋杆菌的