第8章 基因工程菌的培养
构建白蛋白基因工程菌是生物技术领域的重要应用。选择合适的宿主和表达系统是首要步骤,常用的宿主系统包括E.coli、G+细菌、低等真核细胞和哺乳动物细胞。其中,E.coli因其生理学和遗传学背景清晰、基因操作简单、生长速率高而成为广泛使用组成,对于G-细菌,大肠埃希菌是最常用的表达系统。此外,枯草芽孢杆菌作为G+细菌的代表,具有无致病性、人畜无毒等优点,但其质粒稳定性较差,在使用上有所限制。在构建过程中,还需考虑微生物表面表达系统,通过载体蛋白与目的蛋白的融合,实现目的蛋白在微生物细胞表面的展示。同时,基因工程菌的稳定性是实现高水平生产的关键因素,不稳定性主要表现为分离丢失、结构不稳定性和宿主细胞调节突变。因此,在培养基因工程菌时,需加入选择压力如抗生素以抑制基因丢失菌的生长,并分阶段进行菌体生长和诱导产物表达。这些步骤和注意事项为成功构建白蛋白基因工程菌提供了重要指导。