增，保守序列是单拷贝的微卫星序列，其引物：玉米
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!""# 年第五期食品科技
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样品 -./ 的提取和定量 按常规方法提取 -./， -./ 含量可用紫外分光光 度计测定。
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建立内部参照反应体系
利用高纯度的
以相同的引物对其 378#!# 质粒 & 含两个 95 : 启动子 ’ ， 一为与常规 95 : 启动子一致 -./ 扩增可产生两条带， 的 #;523 带，另一为 5""23 带，是 -./ 链上两个 95: 启动子之间的序列扩增的产物。 将此质粒 -./ 与待测 样品 -./ 以同一对引物共扩增，分析扩增结果，有助 于减少实验中的误差， 得到可靠的半定量结果。例如， 非 0<= 样的 +), 结果无电泳带显示， 而非 0<= 样与 质粒 -./ 共扩增则显示 #;523 带和 5""23 的两条带， 从而消除假阴性现象的影响。
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,C>D * EFGC 定量 +), 法 此方法须设计一个内部探针，该探针包含 5H端荧
光报告因子和 9H端猝灭因子。 由于猝灭因 +), 反应前， 子与荧光报告因子的位置相近，使荧光受到抑制而检 测不到荧光信号。 随着 +), 反应从上游的 +), 引物开 始， 引物和标记探针与目标 -./ 分子中对应的互补序 列复性， 聚合酶与探针相遇， 利用其 5H核酸外切酶活性 使报告因子释放， 产生的荧光可被内设的激光器记录， 记录到的荧光强度可反映 +), 的产物量，从而实现实 时定量分析。 此方法需要专门的仪器， 如 +I /33DFCJ 7FKLMLECGL
+,- 特异 234 片段的定性 ./0 筛选方法已广泛应用 于 +,- ( +<=<>?@ABBC DEF?G?<F EH7A=?ID * 食品的检测，一
些国家将此作为本国有关食品法规的标准检测方法 。
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与已知含量的 ,AHQ<H 比较， 用 "O ;P 琼脂糖凝胶中电泳， 计算机凝胶成像分析系统处理结果，以确定所提取的
大豆 )1/0) 0/0)110)/1/111 ， +), 产物约 #$"23 ，
)01)/10)1/01) 4 4 10)/)01)///110)10， +), 产
物约 5""23，据此可确定获得纯化 -./ 的质量和模板 量， 同时判定 +), 反应抑制因素的影响。
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竞争 -./ 的构建 按常规分子生物学的方法，用基因重组技术构建
食品科技 !""# 年第五期
检测技术
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转基因食品达民 广州・:#"%#: * ( 广东省食品质量监督检测站