华西药学院2009-2010学年上学期分子生物学考题答案2013年1月22日晚使用说明:此答案仅供参考,如有谬误,还请见谅!一、英文翻译【12*0.5=6分】1 SNP 单核苷酸多态性2 Transposon 转座子3 RNA splicing RNA剪接4 Attenuator 衰减子5 determination of DNA sequence DNA序列测定6 Interrupted gene 断裂基因7 DDRP DNA指导的DNA聚合酶8 CRP 分解代谢基因活化蛋白9 site-specific in vitro mutation 体外定向突变10 frameshift mutation 移码突变(这个过时了,不考)11 translocation 移位12 primase 引物酶二、名词解释【10*2=20分】1 Enhancer 增强子:指远离转录起点,决定基因表达的时空特异性,增强启动子转录活力的一段DNA序列。
2 Molecular chaperone 分子伴侣:细胞内能够帮助新生肽链正确折叠和装配组装成为成熟蛋白质的一类蛋白因子,在真核生物和原核生物中广泛存在。
3 semidiscontinous replication 半不连续复制:一条链上的DNA在DNA聚合酶的作用下以5'-3'方向连续合成一条长的DNA链,而另一条另一条链的DNA合成是不连续的,即先合成一段段短的DNA片段,再将这些短片段连成DNA长片段,这样的过程称为半不连续复制4 supergene family 超基因家族: 来源相同、结构相似,但功能却不尽相同的一大批基因,这一大批基因分属于不同的基因家族,总称为超基因家族5 promoter 启动子:RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列,是RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子6 mic RNA 干扰mRNA的互补RNA,即反义RNA,通过碱基互补和特定mRNA的SD序列、起始密码子AUG以及它们的上下游的部分核苷酸序列结合,从而抑制mRNA的翻译7 reverse transcription 逆转录:以RNA为模板合成DNA,这与通常转录过程遗传信息从DNA到RNA的方向相反,故称为逆转录作用,通常又叫做RNA指导的DNA合成。
8 stringent response 严紧反应(这个过时了,不考)9 gRNA(这个过时了,不考)10 physical map物理图谱:以一段已知的核苷酸序列的DNA为“位标”,以碱基对Mb或Kb 等物理距离为图距的基因组图。
三、填空【60*0.5=30分】1、RNA生物合成抑制剂有【】、【】、【】三种,其中碱基类似物是属于【】(这个过时了,不考)2、Southern印迹杂交是鉴别【DNA 】靶分子的杂交,Northern印迹杂交是鉴别【RNA】靶分子的杂交,而Western印迹杂交可以用来分析【蛋白质】3、端粒的复制依赖【端粒酶】的催化,以【RNA】为模板通过【逆转录】方式来完成4、RNA聚合酶对转录起始的调控主要是通过【σ亚基替换】来调控,这是因为【σ因子】能够识别DNA分子上的RNA合成的起始信号,不同的【σ因子】会竞争性的与核心酶结合,而且【环境】的变化可以诱导产生特定的【σ因子】,从而开启特定的基因。
5、DNA复制后修复主要有【重组修复】和【SOS修复】两大类,其中【SOS修复】属于差错倾向性修复。
6、根据突变带来的效果,DNA突变可分为【无义突变】、【同义突变】和【错义突变】,其中【同义】突变并没有改变蛋白质产物的氨基酸序列,是因为碱基的改变只是使一个密码子变成了它的【简并密码子】。
7、蛋白质的生物合成过程中,肽链的延长由若干个循环组成,每一个循环包括【进位】、【成肽】和【移位】三个步骤。
8、Trp操纵子结构基因E和D,B和A之间保持翻译步调一致的机制是通过【基因重叠】实现【翻译偶联】。
9、TaqDNA聚合酶是在【PCR】技术中使用的一个重要工具酶,其最大特点是【耐热】,但是由于TaqDNA聚合酶不具有【3'-5'外切酶】活力,因此其没有校对功能。
10、乳糖操纵子同时独立地受到【正】、【负】两个系统的调控,只有当【cAMP-CAP 】结合到【CAP结合位置】上和【阻遏蛋白】脱离【操纵基因】时,才开始结构基因的转录。
11、典型转座子都含有【】和【】两个基本序列,如果按【】分类,可以分为【】和【】。
(不考了,过时了)12、染色质从形态上可以分为【常染色质】和【异染色质】,其中【常染色质】是一种【松懈伸展】的DNA状态,可以进行活跃的复制和转录。
13、tRNA的功能位点有【氨基酸接受位点】、【识别氨酰-tRNA合成酶位点】【反密码子位点】和【核糖体识别位点】。
14、致癌RNA病毒是以【出芽】方式从细胞中释放,不会使宿主细胞裂解,其致癌机理是通过【前病毒的癌细胞基因编码的蛋白质】使细胞发生癌变,病毒RNA通过【逆转录】生成dsDNA并整合到宿主DNA序列中是病毒致癌的重要环节,因此【逆转录酶】是新药设计和疾病治疗的重要靶酶。
15、RDDP具有【依赖RNA的DNA聚合酶】、【依赖DNA的DNA聚合酶】和【RNaseH】活力。
16、保证DNA复制忠实性的三大防线是【复制系统的忠实性】、【损伤修复】、【复制后修复】。
四、不定项选择【7*2=14】【此处以往年判断并说明理由题代替】1、复制子是从启动子到终止子之间的一段DNA序列。
参考答案:错,因为复制子是从复制起点到复制终点的一段DNA序列,参与的是DNA的复制,而启动子和终止子参与的是转录过程。
2、顺反子与基因是同义语。
参考答案:错,因为顺反子是一段编码蛋白质的核苷酸序列,只是一段编码序列,而基因不仅包含编码序列,还应包括调控序列。
3、核酸分子杂交技术的目的是扩增DNA。
参考答案:错,因为核酸分子杂交技术的目的是定性或定量地测量特定的核苷酸序列4、从模版的使用情况来讲,DNA转录是对称的,全保留的。
参考答案:错,因为转录是不对称的5、经过剪接的mRNA遗传信息不全来自DNA。
参考答案:错,因为经过剪接的mRNA遗传信息全部来自DNA(自己再拓展一下吧,结合剪接的概念和特点)6、真核生物的mRNA是多顺反子RNA。
参考答案:错,真核生物的mRNA是单顺反子RNA7、PCR扩增产物的特异性是由模板的纯度确定的。
错,PCR扩增产物的特异性是由引物决定的。
五、简答题【30分】1、比较转录和复制的异同点 答:2、简述核糖体的活性中心答:A.mRNA 结合位点 B.Aa-tRNA 结合位点 C. 肽基-tRNA 结合位点 D.tRNA 排出位点 E 肽酰转移酶位点3、比较DDDP 、DDRP 、RDDPDDRPDDDPRDDP概念 DNA 指导的RNA 合成DNA 指导的DNA 合成RNA 指导的DNA 合成参与反应 转录 复制 逆转录 模板 DNA DNA RNA 原料 NTP dNTP dNMP 合成方向 5'-3'5'-3'5'-3' 特点 需镁离子,模板,不需要引物,能直接启动一条新链合成 需镁离子,模板,需要引物,不能直接启动一条新链合成需模板和引物 忠实性低,缺乏校对功能高低,缺乏校对功能4、抗肿瘤药物分为哪几种种类,每一种的作用机理是什么,请举例说明。
参考答案:(1)针对逆转录酶的抗肿瘤药,如AZT ,抗HIV 药 (2)RNA 合成抑制剂 如烷化剂 (3)抗代谢肿瘤药,如长春新碱。
5、请简述操纵子的基因表达调控思想。
参考答案(不一定对):操纵子水平的调控主要有以下三种类型: (1)诱导型操纵子(乳糖操纵子)(2)阻遏操纵子(色氨酸操纵子)(3)cAMP-CAP 正调控系统。
乳糖操纵子同时独立地受到正、负两个系统的调控,只有当cAMP-CAP 结合到CAP 结合位置上和阻遏蛋白脱离操纵基因时,才开始结构基因的转录。
其基因调控思想为:结构基因只是提供了编码蛋白质一级结构的一种潜在可能性。
6、【原文为英文】假设一个细菌DNA 复制水平较低,而其细胞内DNA 聚合酶I 、III ,连接酶、解链酶,SSB 和旋转酶均正常,dnaA 、B 、C 也均正常,染色体中oriC 区域也为正常水平,为何该细菌DNA 复制水平比较低。
参考答案(不一定对):缺少引物酶,同时也缺乏原料 7、构建一个已知分子大小氨基酸序列的真核生物蛋白的原核表达系统,经过以下三个步骤: 1)从组织和细胞中分离提取RNA转录复制概念 DNA 指导的RNA 合成DNA 指导的DNA 合成合成原料 NTP dNTP 聚合酶 DDRP DDDP 合成方向 5'-3'5'-3'模板 不对称转录,只有一条链做模板两条链分开各自同作为模板忠实性 低,DDRP 缺乏校对功能高 调控主要是转录起始主要是复制起始2)PCR扩增RNA并逆转录为DNA3)将DNA整合到载体上问:1)从组织细胞中提取的RNA应该是哪一种,为什么2)PCR扩增的引物有什么要求,为什么3)有人认为此过程过于繁琐,可直接用蛋白质来制作DNA序列,此方法是否可行,为什么参考答案(不一定对):(1)mRNA,因为只有mRNA才能逆转录为DNA(2)A.a.5'端引物应与待扩增片段5'端上游的一小段DNA序列相同,引导信息链的合成;b.3'端引物应与待扩增片段3'端上游的一小段DNA序列互补,引导互补链的合成B.因为引物决定PCR扩增产物的特异性和长度。
(3)不能,因为此系统为原核生物的基因系统,原核生物的基因为连续基因,不具内含子,而真核生物的基因为不连续基因,有内含子,在转录时需要进行加工,原核系统无法做到!补充:05-06年分子生物学(重题不再写)一翻译1.replicon 复制子2.SSB:单链结合蛋白3.nucleic acid hybridization核酸分子杂交4.DNA ligase DNA连接酶5.RDRP RNA指导的RNA聚合酶6.PDI 蛋白质二硫键异构酶7.nucleosome 核小体8.exon 外显子9.okazaki fragment 冈崎片段二、名解1.telomerase 端粒酶:是由一条RNA和蛋白质组成的复合物,为逆转录酶,能够以其自身携带的RNA为模板逆转录合成DNA2.分子伴侣(上面已有,不再赘述)3.semi-reservative replication 半保留复制:DNA在复制时,两条链解开分别作为模板,在DNA聚合酶的催化下按照碱基互补配对的原则合成两条与模板链互补的新链,以组成新的DNA分子,新合成的DNA分子与亲代DNA的碱基顺序完全一致,由于子代DNA中一条链是新合成的,一条链来自亲代DNA,故称为半保留复制。