1
0.5
混合细胞性白血病判断标准：每个系列积分>或=2.5分
示例：B-M型AL
示例：T-M型AL
示例：T-B-M型AL
免疫表型的预后价值
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 免疫分型在慢淋、淋巴瘤中的应用简介

肿瘤性B细胞鉴别关键：κ、λ轻链出现单克隆表达或双阴性或表达强 度明显异常。 肿瘤性T细胞鉴别关键：CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7中出现 抗原表达缺失或抗原表达强度的改变；CD45RA、CD45RO的表达情 况出现异常；表达TDT、CD10等幼稚抗原；TCRVβ系列抗原出现单 克隆表达。 浆细胞肿瘤鉴别关键：CD138+细胞表达CD56，不表达CD19，出现 cyκ、cyλ轻链的单克隆表达。 NK细胞肿瘤鉴别关键：出现CD16、CD56、CD7、CD2等抗原的缺失， CD45表达强度的改变 每种类型都必须关注异常细胞CD45表达强度、SSC、FSC的变化。
流式细胞术 在白血病、淋巴瘤免疫分型中的 应用
免疫分型的作用

区分淋系、髓系白血病 区分淋系白血病中的T、B-ALL 鉴定混合细胞性白血病的类型：

T-M、B-M、T-B、T-B-M


于治疗过程中监测MRD，评价疗效 提示某些遗传学异常：
CD56+APL---t（11；17）？ CD19+AML---t（8；21）（q22；q21）？ 提示预后：
正常成人骨髓标本
正常幼稚B细胞：<5.0%,表达CD10、 CD19、CD22、弱表达CD20，少量 CD10stCD34+TDT+
免疫分型常用的抗体

AML

CD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、 MPO 怀疑M6加做CD71、GPA 怀疑M7加做CD61、CD41 CD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a CD34、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、 HLA-DR 、CD1a、 TDT、 cCD3 CD16、CD56、CD57 CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56



CD7、CD11b、CD56等阳性的AML患者预后不良 CD15阳性的AML患者CR率高
免疫分型的原理

正常造血细胞
髓系:CD33+,T系:CD7+
白血病细胞
出现抗原跨系表达
髓系: CD33+ CD7+
抗原表达遵循系列保守性
抗原表达有一定的时序性
原始细胞:CD34+CD11B-
出现抗原时序混乱表达
急性早期T前体细胞 白血病 early T-precursor ALL
CD7
CD2
TdT
CD3c/m CD1a
FAB分 型
+
－
+
－/+
-
L1、L2
胸腺皮质T-ALL
+
+
+
+
+
L1、L2
急性T细胞白血病 T-ALL
+
+
－
+
-
L1、L2
示例：T-ALL 初筛CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-
B-ALL免疫亚型
亚型
early B-precursor ALL Common B-ALL
CD19
CD34
TdT
CD10
CyIg
SmIg
FAB分型
+
+
+
（－）
-
-
L1、L2
+
+
+
+
（－）
-
L1、L2
Pre B-ALL
+
－/+
+
+
（+）
-
L1
B-ALL
+
－
－
－
－/+
（+）
L3
T-ALL免疫亚型
分型

双表型：一种白血病细胞同时表达两个或 两个以上系列标志。
双克隆型：同时存在两种或两种以上异常 细胞，分别表达各自的系列特异性标志。 类型：T-M、B-M、T-B、T-B-M


白血病中各种抗原的积分情况
Points 2 B-lymphoid CD79a cCD22 cIgM CD19 CD10 CD20 TdT CD24 T-lymphoid Myeloid CD3 MPO TCR a/b TCR g/d CD2 CD8 CD117 CD13 CD5 CD10 CD65 CD33 TdT CD7 CD1a CD14 CD15 CD64
免疫分型的步骤二

第二步：确诊，进一步确定白血病类型，并且将 某一系别的白血病根据分化程度的不同再分为不 同亚型 根据初筛结果加做其他系别特异性标记

T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、 TDT、cCD3 B-ALL: CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79a AML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,怀 疑M6加做CD71、GPA,怀疑M7加做CD61、CD41
示例：MM
示例：浆样淋巴瘤
流式细胞术检测BCR-ABL融合蛋白




示例：正常淋巴细胞
正常T细胞
正常B细胞
正常NK细胞
示例：B-CLL/SLL
示例：MCL
示例：HCL
示例：Burkkit淋巴瘤
示例：FL
示例：脾边缘区淋巴瘤
示例：NK-T淋巴瘤
示例：T-NHL
82.5%
15.6%
示例：细针穿刺 B-NHL
示例：脑脊液标本 B-NHL
示例：正常浆细胞
成熟单核细胞：约占2-8%，表达 CD11b、CD64、CD14、HLA-DR， 不表达CD34、CD117

幼稚髓系细胞： 〈5.0％
成熟淋巴细胞：约占20-40%
有核红细胞： <50%,表达GPA
T细胞：表达CD3、CD4、CD8、CD CD5、CD7,不表达CD10、CD34、 TDT等
B细胞：表达CD19、CD20、CD22， 不表达CD10、CD34、TDT等 NK细胞：CD3-(CD16+CD56)+
示例：AML 初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+
示例：AML-M3 初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-
示例：AML-M3V 初筛CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-
混合细胞性白血病的免疫分型
原始细胞:CD34+CD11B+
各阶段细胞按一定的比例分布
原幼细胞<5%
出现分化阻滞
原幼细胞>20%
免疫分型需要掌握什么理论知识？

正常造血细胞的抗原表达规律
不同系列的细胞表达的抗原？ 同一系列不同阶段的细胞表达的抗原？ 每种抗原的表达强度？

正常B系细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
正常T系细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
正常粒细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
正常单核细胞分化图
源于王建中等编著的《临床流式细胞分析》
免疫分型中的重要抗原CD45
成熟粒细胞：约占40-60%， 表达CD11b、CD13、CD33、 CD15、CD16、CD10、CD64, 不表达CD34、HLA-DR、 CD14、CD117

B-ALL

T-ALL

NK细胞

浆细胞

免疫分型的步骤一

第一步：初筛，初步筛选白血病类型

CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45



CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑为T-ALL CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑为AML伴CD7+ CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑为B-ALL CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑为B-ALL伴CD33+ CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑为AML伴CD19+ CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑为AML CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑为APL
示例：AML伴CD7+ 初筛CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+
示例：B-ALL 初筛CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-
示例：BALL+CD33 初筛CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-
示例：AML+CD19 初筛CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+