实验动物基本操作
(二)固定
实验台固定:用特制的长柄铁钳夹住犬的颈 部后,麻醉动物。将麻醉的犬放在实验台上, 再用粗棉带(绳)固定四肢于实验台上。并将 犬舌拉出。此固定方法仰卧位适用于口腔、颈、 胸、腹、四肢等部位的实验,俯卧位适用于脑、 背部位的实验。
注意: 狗性情凶恶、咬人,特别是对陌生人有攻击性。 对刚购入的狗要特别小心,避免被其咬伤。 在缚嘴时,动作要迅速,捆绑松紧要适中。
日龄/d
初生
5
10
15
20
25
30
体重/g
1.8
4.0
6.0
11.0
15.0
21.0
24.0
⑵ 大鼠日龄与体重的对应
日龄/d
体重/g
初生
10
20
30
40
6~7 17~25 35~50 55~90 100~150
日龄/d 体重/g
50
60
70
80
150~210 170~240 210~270 240~320
打耳孔法:小型动物
4.7 剪趾法:小型动物
第四节 分组
随机化分组
• 避免人为影响
• 例:将14只小鼠随机分成两组。 • ①先将小鼠编为1~14号, • ②在随机数字表上任点一数,按任意方向连续抄 14个随机数字。 编排如下:
• • •
动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 随机数字 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23 归 组 B B A B A A B A B B A A A A
实验动物编号标记标准操作规程
1.目的:为了规范实验动物编号标记方法,对分组后的实验动物进行标记编号,制 定本程序。 2.范围:适用于实验动物编号标记的活动。 3.职责:所有实验人员应遵守本规程,动物实验室负责人负责监督和管理。 4.工作程序: 4.1良好的标记方法应满足标号清晰、耐久,简便、适用、无明显损伤、无毒和易辨 认等要求。常用的标记方法有染色法、耳缘剪孔法、烙印法、挂号牌法、挂环法 等。 4.2染色法:染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染,或 用不同颜色等代表一定的编号,来区别各组动物,是实验室最常用、最容易掌握 的方法。 4.2.1常用染色剂:黄色:3%~5%苦味酸溶液 红色:0.5%中性红或碱性品红溶液 咖啡色:2%硝酸银溶液(涂后需光照10分钟) 黑色:煤焦油的酒精溶液 紫色:龙胆紫溶液
六、实验猴
不管采用哪种抓取与固定方法,都应遵守的基本 原则是: 1.保证实验人员的安全。 2.防止动物意外损伤,禁止采取粗暴的动作。 因此在抓取与固定动物时,应了解动物的生活 习性,生理解剖结构,体重、体型,实验内容确定 动物的抓取与固定方法。
31
第二节 年龄的大致判断
(一)大、小鼠
1、根据形态鉴定日龄(大、小鼠情况基本一样)
• ③奇数代表A织,偶数代表B组 • ④A组: 3 5 6 8 11 12 13 14 • B组: 1 2 4 7 9 10 • ⑤调整分组:接刚才随机数字23继续抄表得随机数 字78,用78除以8(因为需要把A组的8个数字调整 掉一个),得余数6,所以把A组的第6个动物,即 12号动物调整到B组
• ⑥ 最终分组
第三节 性别鉴定
小鼠性别鉴定
小鼠性别鉴定
小鼠性别鉴定
兔的性别鉴定
初生兔仔如阴部孔洞扁圆而略大于肛门, 且与肛门相向、距离较近的是母兔;孔洞呈 圆形而略小于肛门,孔洞向前而距肛门较远 的是公兔。
三月龄以上的兔子,只要看有无阴囊即可 区别公母。
兔子的性别鉴定(雌)
兔子的性别鉴定(雄)
第三节 动物编号
2、周龄较大的大鼠可张开左手虎口,迅速将拇、食 指插入大鼠的腋下,虎口向前,其余三指及掌心握住 大鼠身体中段,并将其保持仰卧位,然后调整左手拇 指的位置,紧抵在下颌骨上即可进行实验操作 。
注意: 操作者第一次抓取大鼠时,最好戴防护手 套;不能捉提尾尖,也不能长时间将大鼠悬在 空中。
12
(二)固定
4.3 烙印法:用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的 墨黑在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。 4.4 号牌法:用金属制号牌固定于实验动物的耳上或系颈上。耳标签、项圈、 腿圈,中、大型动物。
4.5鼠尾标记编号 用苦味酸溶液涂擦在鼠尾部(图)。
4.6 孔法或剪口法: 耳孔法是用打孔机直接在实验动物的耳朵上打孔编号,根据打在动物耳朵上的 部位和孔的多少,来区分实验动物的方法。用打孔机在耳朵打孔后,必须用消毒 过的滑石粉抹在打孔局部,以免伤口愈合过程中将耳孔闭合。耳孔法可标记三位 数之内的号码。另一种耳孔法是用剪刀在实验动物的耳边上剪缺口的方法,作为 区分实验动物的标记。
4.2.2 编号的原则:如动物数在10只以下, 在左前腿上为 1,左腰部为2, 左后腿为3,头部为4,背部为5, 尾基部为6,右前腿为7,右腰部为8, 右后腿为9。如果动物编号超过10, 需要编10~100号码时, 可采用在上述动物的不同部位, 再涂染另一种涂染剂 (如0.5%中性红或品红溶液)斑点, 即表示相应的十位数, 即左前腿上为10,左腰部为20。 如在左前腿上标记红色和黄色斑点, 表示为11,如果红色标记在左前腿上, 而黄色标记在左腰部,是12, 以此类推。如图。 本设施大小鼠采用染色法编号标记。
防止被抓伤。另外抓取时不能只提兔耳或四肢,
也不能用单手只抓颈背部皮肤。
(二)固定
1、徒手固定:用一只手抓住兔的颈背部皮肤,另 一只手抓住兔的两后肢,固定在实验台上。
也可以坐在椅子上用一手抓住兔颈背皮肤和两耳, 大腿挟住兔的后半身,用另一只手抓住两前肢将 兔固定。此固定方法适用于腹腔、肌肉注射,及 经口给药。
• 动物实验时,当使用的动物数或实验分组数大于1 时,需要对动物个体间或组间区别开来,就需进 行编号与标记。因此编号与标记的目的就是动物 个体与组别的识别。 • 标记的方法很多,良好的标记方法应满足:号码 清楚、持久、简便易认和适用,不影响实验结果 ,对动物的刺激小,标记物对动物无毒性。编号 方法无定法,原则是使实验者能够识别动物个体 和组别。
• A组: 3 5 6 8 11 13 14 • B组: 1 2 4 7 9 10 12
例:12只大鼠随机分为3组 ① 大鼠编号1~12 ② 在随机数字表上任点一数,按任意方向连续抄12个随 机数字 ③ 每个数分别用3除,记录余数 ④ 根据余数分组
大鼠编号:1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 随机数字:08,27,01,50,15,29,39,39,43,79, 69,10 余数: 2, 0, 1, 2, 0, 2, 0, 0, 1, 1, 0, 1 组别: B, C, A, B, C, B, C, C, A, A,C, A
1、徒手固定:对体重较小的大鼠可用拇指、食指捏 住大鼠耳部及颈部皮肤,余下三指紧捏住背部皮肤, 置于掌心,调整好大鼠在手中的姿势即可进行实验 操作。如:灌胃、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射 等实验 。
2、固定板固定:方法与小鼠固定板固定相同,
只是需选择更大一些的固定板。 3、固定器(盒)固定:方法与小鼠固定器(盒) 固定相同,只是固定器较小鼠的大。同样适用 于大鼠尾静脉注射。
(2)准备一个15-20cm,边缘钉有5个钉子 的 方木板。 (3)将四肢用细绳固定在木版两侧的钉子 上, 在上颚切齿处用细绳 固定在木版前方的钉子上。
固定板固定适用于大多数动物手术。
小鼠固定器适用于尾静脉注射。
二、大鼠和地鼠
(一)抓取 1、 周龄较小的大鼠和地鼠,可以像小鼠一样 抓住尾部提起。
⑤ A:3,9,10,12 B;1,4,6 C:2,5,7,8,11 ⑥调整分组:接刚才随机数字10继续抄表得随机数字 61,用61除以5(因为需要把C组的5个数字调整掉 一个),得余数1,所以把C组的第1个动物,即2号 动物调整到B组。 ⑦最终分组 A:3,9,10,12 B;1, 2 ,4,6 C:5,7,8,11
(一)、抓取 用右手拇指和食指的指腹抓住尾部中央提起。
(二)、固定
1、徒手固定
(1)将小鼠提起放在饲养盒盖子上,轻轻向后拉住。 (2)用左手拇指和食指抓住颈、背部中央皮肤。
(3)翻转抓住颈背部的左手,右手拉住鼠尾再用 左手的小指压住尾根部,使整个小鼠呈一条直线。
2、固定板(器)固定
(1)将小鼠麻醉后,用细绳捆住小鼠四肢。
日龄/d 体重/g 日龄/d 体重/g 初生 7 20 30 60
60~80 100~120 150~200 170~220 240~300 90 120 180 520~600
330~400 400~470
(三)家兔
家兔的门齿和爪随年龄增长而增长,是年龄鉴 别的重要标志。 青年兔门齿洁白,短小,排列整齐;老年兔门 齿暗黄,厚而长,排列不整齐,有时破损。白色家 兔趾小基本呈红色,尖端呈白色。1岁家兔红色与白 色长度相等; 1 岁以下,红多于白; 1 岁以上,白多 于红。 还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔 趾爪较短,直平,隐在脚毛中,随年龄的增长,趾 爪露出于脚毛之外,而且爪尖钩曲。另外,家兔皮 薄而紧,眼神明亮,行动活泼的为青年兔;皮厚而 松,眼神颓废,行动迟缓的为老年兔。
(四)犬
犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程 度、外形颜色等情况综合判定。 仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿,2个 月以后开始由门齿→犬齿→臼齿顺序逐渐更换为 恒齿,8~l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后 才能长坚实。饲养场饲养的品种犬,可以根据记 录,明确了解年龄,而收购的杂种犬就无法知道 确切年龄。实际中,可根据犬齿更换和磨损情况, 估计犬的年龄。
年龄 2个月以下 2~4个月 4~6个月 6~10个月 1岁 2岁 3岁 4 ~5 岁 6 ~8 岁 9~10岁 10岁以上