动物实验的基本操作方法
上,麻醉力强,易抑 2 制呼吸。
15-20 40
15-20 80-100
50 750-1000 800-1000 0.1ml/100g 1ml/100g
2 1 1 2 2 30 20 20-25 10
15-30分钟,麻醉力 强,宜缓慢注射。
3-4小时,诱导期不 明显
2-4小时,毒性小, 主要适用小动物的麻 醉。
灌胃抓法 要点
这种抓法不要抓得太紧,以 免颈部皮肤向后拉,勒住食 管,灌胃针不易插直或容易 损伤食管;也不能抓得不紧, 否则鼠在受压迫时容易挣脱 掉而咬伤操作者的手指。也 可用左手食指及拇指抓紧鼠 右耳的方法来避免上述缺点。
灌胃要点
动物要固定好;进针方向正确, 要沿着口角进针,再顺着食管方向插入胃内, 绝不能进针不顺而强行向里插,否则会捅破食管, 甚至注入肺内而造成动物死亡。 常用灌胃量为0.1-0.2ml/10g。
几种动物不同给药途径的常用注射量(毫升)
注射途径 小鼠
大鼠
豚鼠
兔
狗
腹 腔 0.2-1.0 1-3
2-5
5-10 5-15
肌 肉 0.1-0.2 0.2-0.5 0.2-0.5 0.5-1.0 2-5
静 脉 0.2-0.5 1-2
1-5
3-10 5-15
皮 下 0.1-0.5 0.5-1.0 0.5-2 1-3 3-10
在小鼠双耳的不同部位上剪一三角口来表示不同号码。一般习惯是:左上为1, 左下为2,右上为3,右下为4,左耳两刀为5,左右耳各一刀为6,右耳两刀为 7,不剪为8
一横为1,两横为2,三横为3,四横为4,一竖为5,一竖一横为6,一竖两横 为7,一竖三横为8,一竖四横为9,不画为10。
9# 5#
三、实验动物的被毛去除方法
静脉注射(iv) 小鼠一般采用尾静脉注射 1、固定:用小鼠固定器将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功 的第一步。 2、血管的选择:小鼠尾部有三条静脉,左右两边的静脉比较浅,容 易穿刺;中间一条位置较深,建议不选择。穿刺先远后尽,不要一开 始就从尾根部,这样的好处是万一一次扎不进,还可以继续使用此血 管。选择尾下1/4-1/3处比较好(约距尾尖2-3cm,因为尾梢端皮薄静 脉浅,易于刺入;但不可离尾尖太近,防止尾巴碎断或不好固定)。 一般用75%酒精反复擦拭穿刺血管,使其充盈,并且使皮肤角质层软 化,利于穿刺。或者在注射之前用约50度温水泡大约2分钟,使血管 充分舒张,用干棉球擦干。或者直接用手握住尾巴,用手心的温度使 其血管充盈。
20ml 10号导尿管
0.4ml 5(1/2)
1ml 6
1ml 6(1/2)
2ml 6(1/2)
20ml 7
0.4ml 5(1/2)
0.4ml 6
0.5ml 6(1/2)
2ml 6(1/2)
2ml 7
1ml 5(1/2)
2ml 6
4ml 7
5ml 7
5ml 7
0.8ml 4
4ml 5
5ml 5
10ml 6
家 兔
1. 用右手把兔的两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤,把兔提起。 2. 然后用左手托住兔的臀部。
二、实验动物的编号标记方法
常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。 (一)颜料涂染
这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。 使用的颜料一般有:
3-5%苦味酸溶液(黄色) 2%硝酸银溶液(咖啡色) 0.5%中性品红(红色) 煤焦油的酒精溶液(黑色) 标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂上斑点,以示 不同号码。编号原则:先左后右,从上而下。
腹腔注射(ip)
用左手大拇指及食指抓住动物两耳及头部皮肤,腹部朝上,必
要时可用左手无名指及小指夹住鼠尾,为避免伤及内脏,应尽量将
动物头处于低位,使脏器移向横膈处,右手持注射器从下腹左或右
侧向头部方向刺入腹腔,抽注射器,如无回血或尿液,表明针头未
刺入肝、膀胱等脏器,即可进行注射。
⑴ 针头刺入部位不宜太接近上腹部或太深,以免刺 破内脏; ⑵ 针头与腹腔的角度不宜太小,否则容易刺入皮下; ⑶ 所用针头不要太粗,以防药液注射后从注射针孔 流出。注射后用棉球按一下注射部位。为避免注射后 药液从针孔流出,也可以在注射时先把针头在皮下。 向前推3-5mm,再将注射器沿45°角斜向穿过腹肌进 入腹腔。
常用实验动物的最大给药量和使用针头规格
动物名称 项 目
灌 胃 皮下注射 肌肉注射 腹腔注射 静脉注射
小白鼠 大白鼠
豚鼠 兔 猫
最大给药量 使用针头
最大给药量 使用针头
最大给药量 使用针头
最大给药量 使用针头
最大给药量 使用针头
1ml 9(钝头)
1ml 静脉切开针
3ml 静脉切开针
20ml 10号导尿管
动物麻醉后,常因麻醉药作用、肌肉松弛和皮肤血管扩张,致使体温缓 慢下降,所以应设法保温。巴比妥类对呼吸中枢有较强的抑制作用,麻 醉过深时,呼吸活动可完全停止。故应注意防止给药过多、过快。对心 血管系统也有复杂的影响,故这类药物不用于研究心血管功能的实验动 物麻醉。
常用麻醉剂的用法及剂量
麻醉剂
动物
戊巴比 妥钠
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尾静脉注射的注意要点
注射前尾静脉尽量充盈;针头刺 入后,务必使其与血管走行方向 平行
当针头进入顺利无阻时,要把针头和鼠 尾一起固定好,切勿晃动,以免出血造 成血肿或溶液溢出;注射部位尽量选用 尾下1/4-1/3处
皮下注射(sc 或H)
用左手拇指和食指轻轻提起动物颈背皮肤,右手持注射器, 使针头水平刺入皮下,若针头容易摆动,证明针头已在皮下,推 送药液使注射部位隆起,拔针时,以手指轻按针孔片刻,可防止 药液外漏。若两人合作,一人左手抓住小白鼠头部皮肤,右手拉 住鼠尾,另一人左手提起背部皮肤,右手持注射器刺入。
除毛的方法有剪毛、拔毛和脱毛三种。
固定动物后,用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时需注意以下几点: ⑴把剪刀贴紧皮肤剪,不可用手提起被毛,以免剪破皮肤; ⑵ 依次剪毛,不要乱剪; ⑶ 剪下的毛集中放在一个容器内,勿遗留在手术野和兔台周围, 以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛。 兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时,需用拇
二、实验动物的编号标记方法
(二)烙印法 用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号
上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。
(三)号牌法 用金属制的牌号固定于实验动物的耳上,大动物可系于颈上。 对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即
可。
用左手食指及拇指抓紧鼠左耳及左半边脸和颈部,背部朝上,用 酒精棉擦拭一下右耳,右手持装好耳钉的耳钉夹,将耳钉开口夹住尽量平展的 右耳,最好夹住耳朵中部到根部的位置防止太边上容易脱落,用力握紧耳钉夹, 使耳钉尖端扣入凹槽。注意动作要轻要稳以防用力过猛扯坏小鼠的耳朵;耳钉 有数字的一面尽量朝外方便读数。建议两个人共同完成。
硫喷妥钠 氯醛糖
乌拉坦
狗、兔
大小鼠、豚 鼠
狗、兔 大白鼠 小白鼠
兔 大白鼠
兔 大小鼠
蛙 蟾蜍
给药方法
静脉 腹腔
腹腔
静脉 腹腔 腹腔 静脉 腹腔 静脉 皮下或肌肉 淋巴囊注射 淋巴囊注射
剂量(mg/kg)
常用 浓度%
维持时间
30 40-50
40-50
ห้องสมุดไป่ตู้
3 2-4小时中途加上1/5 3 量,可维持1小时以
缺点:需要专人管理,在麻醉初期常出现强烈兴奋现象,对呼吸道有较强的刺激作 用,使粘液分泌增加,易阻塞呼吸道而发生窒息。对于经验不足的操作者,用乙醚 麻醉动物时,容易因麻醉过深而致动物死亡。另外乙醚易燃、易爆,对人亦有作用, 使用时应避火、通风,并注意安全。(已少用)
异氟烷(Isoflurane)为恩氟烷的异构体,为无色的澄明液体,易 挥发,具有轻微气味,属吸入性麻醉药,麻醉诱导和复苏均较快。 麻醉时无交感神经系统兴奋现象,可使心脏对肾上腺素的作用稍 有增敏,有一定的肌松作用。在肝脏的代谢率低,故对肝脏毒性 小。吸入麻醉异氟烷的雾化器要严格校准以使能准确控制投入的 麻醉剂的浓度。
颜色被毛涂擦标记法
编号的原则是:先左后右,
从上到下。一般把涂在左前 腿上的计为1号,左侧腹部 计为2号,左后腿为3号,头 顶部计为4号,腰背部为5号, 尾基部为6号,右前腿为7号, 右侧腰部为8号,右后腿计 为9号。若动物编号超过10 或更大数字时,可使用上述 两种不同颜色的溶液,即把 一种颜色作为个位数,另一 种颜色作为十位数,这种交 互使用可编到99号,假使把 红的记为十位数,黄色记为 个位数,那么右后腿黄斑, 头顶红斑,则表示是49号鼠, 其余类推。
指、食指将局部被毛拔去,以利操作。 脱毛系指用化学药品脱去动物的被毛,适用于无菌手术野的准备以及
观察动物局部皮肤血液循环和病理变化。
四、实验动物的给药途径和方法
(一)皮下注射 (二)皮内注射 (三)肌肉注射 (四)腹腔注射 (五)静脉注射 (六)经口给药 (七)其它途径给药
1.呼吸道给药 3.脊髓腔内给药 5.脑内给药 7.关节腔内给药
3、针的选择:4号1ml注射器 4、注射手法:注射时左手扯尾,用左手的食指,中指,无名指及大拇 指将小鼠尾巴固定。右手持注射器,从中指及无名指与拇指接触处 稍上方进针,进针时针尖朝下,使针头与尾部近似平行刺入尾静脉 (针头与尾部夹角小于10°)在尾静脉内平行推进少许。针扎入时 有落空感,针头沿血管进入,肉眼可观察到血液充盈针尖的那一瞬 间,这是关键。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅, 毫无阻力;若手感针行有阻力,注射部位皮下发白,说明针头未刺 入静脉内,应换部位重刺。但要尽量做到一次注射成功,因为重刺 会增加注射的困难;另外,第二次重刺,也可能失去了尾静脉注射 的最佳位置。进血管后注意保持稳定,左手的三指捏住尾巴,并连 针头和鼠尾一起捏住,以防鼠活动时针头脱出。