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补体结合试验步骤

补体结合试验步骤
补体结合试验常用于检测某种物质对于免疫反应的影响,通常用于检测抗原-抗体结合。

以下是补体结合试验的基本步骤:
1. 准备试剂:包括抗原、抗体、补体、底物等。

2. 样本处理:如果需要检测某种样本中的特定抗原,需要对样本进行处理,比如离心去除沉淀物。

3. 制备试管:将适量的待测物/正常对照物添加到试管中,通常每组设立多个试管重复实验。

4. 添加抗体:将待测物加入试管后,加入特异性抗体,使其与待测物发生特异性结合。

5. 添加补体:将适量的补体加入试管中,使其与待测物-抗体复合物发生结合反应。

6. 孵育反应:将试管置于恒温孵育条件下,使其在适当的温度和时间下进行反应。

7. 增加底物:在反应结束后,添加适量的底物。

补体结合活性较高的试管中,底物被完全反应,出现显色或荧光信号。

8. 结果分析:通过测量底物的信号强度,可以判断待测物与抗体及补体的结合活性。

需要注意的是,补体结合试验的步骤可能根据具体实验目的和样本类型有所调整和变化,上述步骤仅供参考。

实验中应遵循相关实验室操作规程,并注意操作安全。

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