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生物技术药物立项
国内外研究现状
• 现在国内学者的大部分研究仅局限于表达 银杏黄酮类物质，对于其他的黄酮类物质 的基因表达鲜有涉及。
• 鉴于银杏在进化上的特殊地位和药用功能， 本实验也注重于表达银杏中的黄酮类化合 物。利用基因工程克隆产生黄酮类物质的 酶，将其转染至于银杏叶的细胞之中。检 测黄酮类物质产量及其活性。
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2020/11/26
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• 心血管疾病，又称为循环系统疾病，是一 系列涉及循环系统的疾病，循环系统指人 体内运送血液的器官和组织，主要包括心 脏、血管（动脉、静脉、微血管），可以 细分为急性和慢性，研究发现心血管疾病 一般都与自由基有紧密联系。
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实验大致流程
• 菌体：大肠杆菌DH5α • 载体：克隆载体pMD-18T • 基因:GbC4H、GbC3H • 基因克隆、信息学分析，转染，表达 • 分析表达产物的产量和活性。
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• 1、选择黄酮类化合物生物合成途径上游的 苯丙酸途径中的肉桂酸-4-羟化酶的基因 GbC4H以及与黄酮类化合物合成途径并行的 术质素合成途径中的香豆酸-3-羟化酶的基因 GbC3H。
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不足之处
• 黄酮化合物可由植物提取但是含量很少， 如银杏叶中黄酮类化合物含量仅为1.4%-1.9%之间，而体外合成的方法，成分单一、 工艺复杂、成本高，其药效无法有天然产 物相比，成为制约其研究的瓶颈。
• 因此利用基因工程来提高其产量，丰富其 种类，保存其活性具有重大意义。
也可改善心脑血管疾病的症状。
• 被称为花色苷酸的黄酮化合物在动物实验中被证明可以降低26% 的血糖和39%的三元脂肪酸丙酯，这种降低血糖的功效是很神奇的， 但更重要的是它对稳定胶原质的作用，因此它对糖尿病引起的视网膜 病及毛细血管脆化有很好的作用。
• 黄酮可以抑制炎性生物酶的渗出，可以增进伤口愈合和止痛，栎 素由于具有强抗组织胺性，可以用于各类敏感症。
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黄酮类物质
二十世纪30年代初，欧洲一位药物化学 家在研究柠檬皮的乙醇提取物时发现了黄酮 类物质，其抗氧化能力超过维生素C 10倍。
直到世纪八十年代末，黄酮的药用价值才 被发现，近年来，黄酮的功效更是被科学研 究者逐一发现。
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黄酮
• 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与 B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列 化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。黄酮类化 合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异 戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。 多数科学家认为黄酮的基本骨架是由三个丙二酰 辅酶A和一个桂皮酰辅酶A生物合成而产生的。经 同位素标记实验证明了A环来自于三个丙二酰辅 酶A，而B环则来自于桂皮酰辅酶A。
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2020/11/26
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• 2、将其与克隆质粒连接，转进大肠杆菌， 是上述基因复制。
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• 3、提取其基因，测序验证，并分析其生物 信息学。
• 4、将其基因转至银杏的愈伤组织，培养。 • 5、分析产物的含量和活性。
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拟攻克菌的代谢物等对实验的干扰。
• 2、转染银杏的DNA 是否会被降解，是否会 造成共阻遏等现象。
• 3、黄酮类化合外的产量和活性。
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质量控制
• 其DNA是由基因工程克隆的，因此，其产 物DNA要进行质量控制。
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3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
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黄酮的药用价值
•
黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体
内的氧自由基，维生素E的十倍以上，这种抗氧化作用可以阻止细胞
的退化、衰老，对心血管疾病有效，也可阻止癌症的发生。
•
黄酮可以改善血液循环，可以降低胆固醇，向天果中的黄酮还含
有一种PAF抗凝因子，这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率，