选修一生物技术实践
第1讲微生物的培养和利用
1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )
①能够用相同的培养基②都需要使用接种针实行接种③都需要在火焰旁实
行接种④都能够用来计数活菌
A．①②B．③④
C．①③D．②④
解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①准确；平板划线法采用接种针实行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器实行操作，故②错误；
纯化时，要实行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③准确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。

答案 C
2．下列相关培养基和菌种鉴定的叙述不准确的是( ) A．植物组织培养常用的是固体培养基
B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
解析在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。

答案 D
3．通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作相关的叙述中，不．准确的是
( ) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．选择菌落数在300个以上的培养皿实行计数
解析检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，在确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板实行计数。

答案 D
4．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，准确的是( ) A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 解析在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不准确。

C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，此时，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。

答案 D
5．如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：
(1)该培养基含有微生物所需要的________类营养物质。

其中最主要的碳源是
葡萄糖，氮源是尿素。

(2)该培养基按物理性质划分是________培养基；按培养基的作用划分是选择
培养基，该培养基具有选择作用的原因是____、____________。

(3)在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原
理是________________________________________________________。

(4)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素，可在培养基中加入
________指示剂，尿素被分解后指示剂变________色。

(5)某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒，开始时向消过毒的罐头瓶中加
入了新鲜的葡萄汁和酵母菌，添加酵母菌的原因是________，添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供_________________________。

答案(1)4
(2)固体该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该
培养基上生长和繁殖
(3)在细菌分解尿素的过程中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养
基的pH升高
(4)酚红红
(5)酵母菌能分解葡萄糖形成酒精(或酵母菌实行无氧呼吸产生酒精) 所需的
各种营养物质(或碳源、氮源、水、无机盐和生长因子)
6．在日常生活中，一提到细菌、真菌及病毒这些微生物，人们往往首先想到它们的害处，其实，很多微生物对人类是有益的，它们与我们人类的关系非常密切，而且人类已经应用微生物造福于我们的生活。

请回答下列问题。

(1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序：配制培养基→接种→培养→观
察记录→纯化培养。

①采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是
________________________。

②若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成
醋酸？________，原因是______________________________________。

(2)在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用
的是________。

产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的________，________可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

(3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。

科学家利用培
养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌，经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。

土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌的常用方法有________和________。

虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、________。

解析(1)采用平板划线法接种，开始接种时要灼烧接种环，目的是灭菌；若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌不能将酒精转变成醋酸，原因是醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长。

(2)在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用
的是毛霉。

产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。

脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

答案(1)①灭菌②不能醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长(2)毛霉肽和氨基酸脂肪酶(3)平板划线法稀释涂布平板法无机盐、碳源、氮源
7．纤维素分解菌能够产生纤维素酶分解纤维素。

回答下列问题：
(1)在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用________染色法，这种方法能够通
过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。

甲同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于()
A．③B．①②
C．②③D．①②③
(2)乙同学打算从牛胃中分离纤维素分解菌并计数，与分离醋酸菌相比，进行
培养时除了营养不同外，最主要的实验条件差别是______________________，该同学采用活菌计数法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目________。

(3)丙同学在提取和分离纤维素酶的过程中，为了抵制外界酸和碱对酶活性的
影响，采取的措施是向提取液和分离液中添加________。

若探究纤维素酶活
性的最适温度，如何设置对照？___________________________________。

解析(1)刚果红与纤维素形成的红色复合物在纤维素被分解后将不再形成，则在培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

(2)牛胃是一个厌氧的环境，所以其中的纤维素分解菌与需氧的醋酸菌培养条件有所不同。

因是活菌计数法，所以部分死亡菌无法计数。

另外当两个或多个细菌连在一起时平板上只观察到一个菌落，所以偏小。

(3)探究最适温度可设置一系列的温度梯度相互对照，其他无关变量要适宜。

答案(1)刚果红A(2)保证无氧环境小(低)
(3)缓冲溶液不同的温度梯度之间相互对照。