药物对离体豚鼠回肠的作用
1.3 仪器和装置 1.3.1 麦氏浴槽
固定钩
出水口
进水口
麦氏浴槽
1.3 仪器和装置 1.3.2 记录仪器 记录仪器 RM6240C微机生物信号处理系统
1.4 离体肠肌制备
1.4.1 用木槌击豚鼠头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部, 用木槌击豚鼠头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部, 然后在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置 处剪断,取出回肠约 左右一段, 然后在离回盲部 处剪断 左右一段 于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜, 于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠 剪成数小段( ),用注射器吸取台氏液将肠内容物 剪成数小段(约1~1.5 cm),用注射器吸取台氏液将肠内容物 ), 冲洗干净。 冲洗干净。
氯化钡
Ba2+经钙通道进入胞浆 胆碱能神经释 放ACh
触发肌浆网释放Ca2+ 触发肌浆网释放Ca
肌浆[Ca2+] ↑ 肌浆[Ca
平滑肌收缩↑ 平滑肌缩↑
实验目的( 实验目的(Objectives): )
1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法 1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法 2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M 2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M 熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌 胆碱受体和H 受体的激动作用, 胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它 们的受体拮抗剂阿托品和扑尔敏的阻 断作用。 断作用。
4.讨论 4.讨论
4.1 Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠使其张力升高,用 作用于离体豚鼠回肠使其张力升高, 作用于离体豚鼠回肠使其张力升高 atropine后,回肠张力 降低,atropine为肠平滑肌细胞膜 降低, 后 为肠平滑肌细胞膜 受体的阻断剂, 上M受体的阻断剂,由此可见, Acetylcholine作用于离 受体的阻断剂 由此可见, 作用于离 体豚鼠回肠平滑肌细胞膜上的M受体使平滑肌收缩 受体使平滑肌收缩。 体豚鼠回肠平滑肌细胞膜上的 受体使平滑肌收缩。 4.2 …
药物对离体豚鼠回肠的作用
实验原理( 实验原理(Principle) )
ACh
阿托品
回肠M 回肠M受体 平滑肌Ca2+通道开放 平滑肌Ca
内流↑ Ca2+内流↑
胞浆Ca 胞浆Ca2+ ↑
平滑肌收缩↑ 平滑肌收缩↑
组胺
扑尔敏
H1受体
G蛋白
肌浆网释放Ca 肌浆网释放Ca2+
Ca2+通道
平滑肌收缩
外Ca2+内流
1. 材料与方法 材料与方法(materials and methods):
1.1 实验动物 豚鼠 1.2 药品与试剂 10-2g/L acetylcholine chloride溶液, chloride溶液 溶液, sulfate溶液 溶液, 1g/L atropine sulfate溶液,10-2 g/L histamine phosphate溶液 溶液、 chlorpheniramine溶液 溶液、 phosphate溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、 溶液、台氏液。 10g/L BaCl2 溶液、台氏液。
取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中, 1.4.2 取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两 端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。 端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持 肠管通畅,勿使其封闭。 肠管通畅,勿使其封闭。 肠管固定:取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中, 肠管固定:取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中, 在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。 在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注 意保持肠管通畅,勿使其封闭。 意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于 浴槽固定钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。 浴槽固定钩上,然后放入 ℃麦氏浴槽中。再将肠 管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上。 管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上。 1.4.4 肠肌稳定:调节张力至 ,稳定10~30分钟 。 肠肌稳定:调节张力至1g,稳定1 分钟 1.4.3
Ach 换液
Ach Atr Ach
换液 His 换液 Chl His
Bacl2
Atr
稳定20min
Ach: acetylcholine,乙酰胆碱 His: histamine 组胺
(每次换液后稳定10min)
Atr: atropine 阿托品 Chl:chlorpheniramine 氯苯那敏
图1 药物对离体豚鼠回肠作用
2. 观察项目
2.1 ACh → 洗脱 2.2 ACh → atropine → 洗脱 2.3 histamine → 洗脱 2.4 2.5 chlorpheniramine → histamine → 洗脱 BaCl2 → atropine
3.结果 结果
3.1 Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠,其张力由1.1g增至3.5g, 在acetylcholine作用基础上向灌流夜中加入atropine,回肠张力由 3.5g 降低至1.1g。见表1和图1。 药物对离体豚鼠回肠张力的影响( 表1 药物对离体豚鼠回肠张力的影响(g) 项 目 acetylcholine acetylcholine + atropine histamine chlorpheniramine +histamine BaCl2 BaCl2 + atropine 处理前 处理后