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动物遗传学实验教学PPT课件


2021/3/7
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四、实验步骤(2)
(4) 用移液器吸取总DNA或质粒样品4μl于封口膜 上,再加入2μl 的6X载样缓冲液,混至3-5V/cm,可见到 溴酚蓝条带由负极向正极移动,电泳约30min60min。
⑹ 将凝胶放入EB染液中染色5-10min,用清水稍微 漂洗。
⑺ 将染色后的凝胶置于紫外透射检测仪上,盖上 防护观察罩,打开紫外灯,可见到发出荧光的 DNA条带。
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结果与分析
图1 猪基因组DNA1%琼脂凝胶电泳图
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结果与分析
图2 PCR产物琼脂凝胶电泳图 (1、2、3、4为PCR产物,M为DL2000Marker)
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二、实验目的
掌握琼脂糖凝胶电泳分离DNA 的原理和方法
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三、实验材料、器具及药品
➢ 猪基因组DNA及PCR产物 ➢ 电泳仪,电泳槽,电子天平,移液器,枪头,
微波炉,紫外透射检测仪等。 ➢琼脂糖,1XTAE电泳缓冲液,溴化乙锭(EB),6X载 样缓冲液 :Ⅰ 0.25%溴酚蓝 ,0.25%二甲苯青 ,40% 蔗糖水溶液;Ⅱ 0.25%溴酚蓝 ,0.25%二甲苯青 ,30% 甘油水溶液
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四、实验步骤(1)
⑴ 1g 琼脂糖加入100ml 1×TAE电泳缓冲液中,摇匀。 在微波炉中加热至琼脂糖完全溶解。(冷却到60℃, 加入100μl的0.5mg/ml EB,并摇匀。)
⑵ 用胶带将制胶板两端封好,插入适当梳子,将溶解的 琼脂糖(约50℃)倒入,室温冷却凝固
⑶ 充分凝固后撕掉两端的胶布,将凝胶置入电泳槽中, 加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶1-2mm,小心垂 直向上拔出梳子。
动物遗传学实验
实验六 琼脂糖凝胶电泳
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一、实验原理
➢ 琼脂糖是一种天然聚合长链状分子,可以形成具有刚 性的滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度
➢ DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用 下向正极泳动
➢ DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应与分子 筛效应。不同DNA的分子量大小及构型不同,电泳时 的泳动率就不同,从而分出不同的区带
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