龙葵果实生物碱成分的研究
【摘要】通过80%乙醇回流提取和酸碱处理从龙葵果实中得到总生物碱，采用硅胶柱层析和重结晶等方法分离得到3个生物碱成分。
通过质谱和核磁共振等波谱学技术鉴定其结构分别为澳洲茄碱（1），澳洲茄边碱（2）、β2-solamargine（3）。
【关键词】龙葵；澳洲茄碱；澳洲茄边碱
【中图分类号】r284.2 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2013）05-0150-01
龙葵为茄科植物龙葵或少花龙葵的干燥全草，又名苦葵、天茄子、黑天天、天泡果、野辣椒、黑茄子、野葡萄等[1]。
龙葵具有清热解毒、活血、利尿、消肿的功效，现代药理研究表明其具有较好的抗肿瘤、抑菌、抗病毒、解热镇痛、抗炎、降压和保肝等药理作用[2]。
近年来由于其具有较好的抗肿瘤作用而受到广泛的关注。
龙葵生物碱在未成熟果实中含量较高，目前，从龙葵中分离得到的生物碱成分主要为澳洲茄碱、澳洲茄边碱等甾体苷类生物碱。
本研究采用醇提、酸碱处理等方法从龙葵未成熟果实中得到总生物碱，通过柱层析和重结晶方法分离得到澳洲茄碱（1），澳洲茄边碱（2）和β2-solamargine（3）。
化合物1-4的结构（structures of compounds 1- 4）
1 仪器与材料
bruker avance 600 核磁共振仪（瑞士bruker公司），lc-ms联用仪（英国varian公司），小型提取浓缩机组（天津大明制药设备
厂）。
龙葵未成熟果实购于四川省成都市国际商贸城荷花池中药材市场，经西南科技大学生命科学与工程学院侯大斌教授鉴定；澳洲茄碱和澳洲茄边碱的对照品购于成都曼斯特生物科技有限公司，柱色谱硅胶（200-300目青岛海浪硅胶干燥剂生产厂），gi60
（0.015-0.040 mm，德国merck公司），其他试剂均为国产分析纯。
2 方法
2.1 总生物碱的提取
将龙葵未成熟果实干燥后粉碎成粗粉，取粗粉10kg，用100l80%乙醇在65 ℃条件下进行回流提取，每次4小时，共提取2次，合并提取液，减压回收溶剂后得总浸膏1500g。
将总浸膏用醋酸调节ph至5左右，离心去除沉淀，滤液用氢氧化钠调节ph至9左右，离心收集沉淀，将沉淀干燥后得到龙葵总生物碱150g。
2.2 生物碱的分离
取龙葵总生物碱100g，经硅胶柱层析（φ=15cm， h=20cm），二氯甲烷：甲醇梯度洗脱（20：1→3：1），tlc分析合并相同流份，得a1-a4部分。
再通过二氯甲烷和甲醇混合溶剂中进行重结晶操作，分别从a1-a3部分得到化合物1（5g），化合物2（6g），化合物3（8g）。
2.3薄层色谱分析
将分离所得生物碱成分与对照品澳洲茄碱和澳洲茄边碱分别点
样于薄层板，分别以二氯甲烷-甲醇（3：1）、石油醚-丙酮（1：1）、
二氯甲烷-甲醇（5：1）作为展开剂，碘化铋钾显色。
2.4化合物3的酸水解
取500mg化合物3，加5ml10%盐酸，5ml二氧六环，100 ℃条件下反应4 h。
氢氧化钠调ph至8左右，减压回收溶剂，用20ml二氯甲烷萃取3次。
减压回收二氯甲烷，经碱性硅胶gi60柱层析（二氯甲烷：甲醇=20：1-0：1梯度洗脱）得化合物4。
3 结构鉴定
化合物1：白色粉末（ch2cl2-methanol）。
碘化铋钾显橙红色。
ms m/z： 884.4 [m+h]+（结合其1h谱和13c谱数据，推测其分子式为波谱数据与澳洲茄碱基本一致，tlc分析结果表明该成分在3种条件下与澳洲茄碱对照品一致，故确定该化合物1为澳洲茄碱。
化合物2：白色粉末（ch2cl2-methanol）。
碘化铋钾显橙红色。
ms m/z： 868.4 [m+h]+（结合其1h谱和13c谱数据，推测其分子式为。
以上波谱数据与澳洲茄边碱基本一致，tlc分析结果表明该成分在3种条件下与澳洲茄边碱对照品一致，故确定该化合物2为澳洲茄边碱。
化合物3：白色粉末（ch2cl2-methanol）。
碘化铋钾显橙红色。
ms m/z： 722.4 [m+h]+（结合其1h谱和13c谱数据，推测其分子式为c39h63no11）；与化合物1相比，分子量减少了162，1h谱和13c数据也显示失去了1个葡萄糖基的信号。
将化合物3进行酸水解，得到其苷元（4）。
ms m/z： 414.6 [m+h]+（结合其1h谱和13c谱数据，推测其分子式为c27h42no2）； 1h nmr （dmso-600 mhz）
δ： 0.95 （1h， m，一致，故确定该化合物3为β2-solamargine。
致谢：特别感谢西南科技大学分析测试中心的索志荣副教授代测所有质谱，周志明博士代测所有核磁共振谱。
参考文献：
[1] chinese pharmacopoeia commission （国家药典委员会）. pharmacopoeia of the people’s republic of china （中华人民共和国药典）. beijing： china medical science press， 1977. vol ⅰ， 1978， 1541，
[2] li hn （李红念）， mei qx （梅全喜）， zhang zq （张志群）， et al. morel’s chemical composition and pharmacological effects were reviewed. pharm today （今日药学）， 2011， 21 （11）： 713-715.。