VitA
CH2
去水VitA（VitA3）
19:58:12
（三）TLC法 BP： 杂质对照品法 显色剂： 三氯化锑 USP： 显色剂：磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值
19:58:12
三、含量测定 （一）UV法 立体异构体 氧化产物及光照产物 合成中间体 去氢维生素A（ VitA2） 去水维生素A（ VitA3）
Fe +
3
N
19:58:12
2+
N Fe
N
3
红色
（三）UV法 0.01%无水乙醇中
λmax = 284nm λmin = 254nm
E11c%m＝41.0 ~ 45.5
19:58:12
（四）TLC法 薄层板： 硅胶G 展开剂 ：环己烷 -乙醚（4 ：1） 显色剂：硫酸（105℃ 5′）
VitE Rf = 0.7
19:58:12
• 判断 A300 /A325 是否大于0.73
否
是
计算A325(校正)
取未皂化样品采用 色谱法纯化后再测 定
19:58:12
A325校正 6.815A325 2.555A310 4.260A334
f A325(校正) A325 100%
A325
A325(校正）
A325
S KOH /乙醇 皂化液植Vit物A醋油酸酯甘油V和it脂A醇肪酸盐 乙醚提取除去植物油的干扰挥干乙醚 异丙醇 溶解 稀释至9～15IU / ml 于300、310、325、 334nm 处 测Ai
19:58:12
• 判断max是否在323～327nm之间
是 计算A300/A325
否
取未皂化样品 采用色谱法纯 化后再测定
100％
＝IU / g标平示均量丸重100％
A 换算因数 平均丸重
C
标示量
100％
19:58:12
(1)第一法 维生素A醋酸酯 • 方法：
S 环己烷 9～15IU / ml溶液 分别于300、316、328、340、360nm处测Ai
19:58:12
• 判断 max 是否在326～329nm之间
第三节 维生素E
O HO
苯并－二氢吡喃醇
19:58:12
CH3
R2
O*
*
HO
R1
名称
α-生育酚 β-生育酚 γ -生育酚 δ -生育酚
R1
CH3 CH3 H H
R2
CH3 H CH3 H
19:58:12
*
相对活性
1.0 0.5 0.2 0.1
生物效价: 右旋体 ：消旋体 = 1.4 ：10
（天然品） （合成品）
第一法： 等波长差法
328 316 340 328
A328校正 3.522A328 A316 A340
测定对象： VitA醋酸酯
19:58:12
19:58:12
第二法： 等吸收度法(皂化法)
6 7
A1
A2
A3
A325校正 6.815A325 2.555A310 4.260A334
19:58:12
三、检查 （一）原 理
游离生育酚
利用游离生育酚的还原性，将硫酸 铈还原成硫酸亚铈 生育酚 2Ce4 2Ce 3 对 生育醌
19:58:12
（二）试剂
硫酸铈滴定液（0.01mol/L）
二苯胺（亮黄→灰紫）
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
T CM n
（M生育酚= 430.8）
T 0.01 430.8 2.15（4 mg / ml） 2
19:58:12
• A300 ：0.354 • A316 ：0.561 • A328 ：0.628 • A340 ：0.523 • A360 ：0.216
A300 /A328 ：0.555 A316/A328 ：0.907 A328/A328 ：1.000 A340/A328 ：0.811
A360/A328 ：0.299
C(g / 100ml )
平均丸重 标示量 100%
0.605 1900
0.08262 100%
0.2399 2 1 100 10000
250 20
99.0%
19:58:12
（2）第二法 （等吸收度法）
【皂化法、6/7A法 】
适用于维生素A醇 第一法无法消除杂质干扰时用此法
19:58:12
药典规定
消耗硫酸铈液（0.01mol/L）≤1.0ml
若硫酸铈液浓度不是0.01000mol/L，应 重新计算硫酸铈的消耗量
设：应消耗硫酸铈液≤ V ml
0.01×1.0 ＝实际浓度× V
V（ml
）
0.011.0 硫酸铈实际浓度
19:58:12
例 Ce(SO4)2 = 0.01020mol/L V（ml） 0.01 1.0 0.98（ml） 0.01020
max
325.5 328 320.5 310.5
323 324
相对生物效价
100% 75% 24% 15% 21% 24%
19:58:12
❖ 易发生脱氢、脱水、聚合反应
VitA2
19:58:12
VitA3
19:58:12
鲸醇
（二）共轭多烯侧链易被氧化
VitA 紫外线、O2、氧化剂
环氧化
物[O]
条件： 无水无醇
19:58:12
+
19:58:12
+
CH2
-
SbCl5 RCOO
蓝色
CH2
-
SbCl5 RCOO
紫红
（二）UV法 （BP（1998）） VitA 无水乙醇 HCl 去水VitA
△
λmax为326nm 一个吸收峰
λmax为350～390nm 三个吸收峰
19:58:12
19:58:12
第二节 维生素A
R : -H
维生素A醇
-COCH3 维生素A醋酸酯
-COC15H31 维生素A棕榈酸酯
19:58:12
一、结构与性质 （一）为一个具有共轭多烯侧链的环己烯
❖ 具有UV吸收 ❖ 存在多种立体异构化合物
19:58:12
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 新维生素Ac 异维生素Aa 异维生素Ab
VitE H75N℃O153′生育酚 生育红[O]
橙红色
19:58:12
强氧化剂
H3C HO
CH3 O
CH3 C16H33
CH3
生育酚
HNO3
CH3
H3C
O CH3
C16H33 生育红 （橙红色）
O
O
19:58:12
取本品约30mg，加无水乙醇10mL溶 解后，加硝酸2mL，摇匀，在75℃加热15 分钟，溶液应显橙红色。
H3C
CH3 O CH3
CH3
CH3
H3C CO O
CH3
dl－α－生育酚醋酸酯
CH3 CH3
19:58:12
一、结构与性质 苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链 1、易溶于有机溶剂，不溶于水 2、UV 3、酯键 易水解
VitE HorOH 生育酚 △ 醌型化合物[O]
19:58:12
二、鉴 别 （一）硝酸反应
A325(校正）
－3% 0 3%
19:58:12
三氯化锑比色法 标准曲线法
VitA SbCl3 蓝色 λmax 618nm～620nm 优点： 简便、快速
缺点
呈色不稳定 （5 ~ 10s内） 水分干扰 SbCl 3 H2OSbOCl
与标准曲线温差≤1℃
专属性差 三氯化锑有腐蚀性
19:58:12
第九章 维生素类药物的分析
19:58:12
第一节 概 述
维生素： 是维持人体正常代谢机能所必需的 微
量营养物资。 人体不能合成维生素
19:58:12
脂溶性： VitA、D2、D3、 E、K1 等
水溶性： VitB族(B1、B2、B6、B12)
VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
19:58:12
19:58:12
（二）三氯化铁－联吡啶反应
VitE KOH 生育酚 Fe3
△
[O]
对 生育醌
Fe 2 联吡啶 红色
19:58:12
CH3
H3C
O CH3
生育酚
C16H33
HO
弱氧化
CH3
剂
FFee33＋+
[O]
对-生育醌
H3C O
CH3 O
OH
CH3 C16H33
CH3
19:58:12
N
2+
例 取本品0.10g，加无水乙醇5mL溶解后，加
二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）
滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过
1.0mL。
19:58:12
（三）限量 ≤2.15％
限量% V T 100% W
限量% 1.0 0.002154 100% 0.1
2.15%
19:58:12
19:58:12
四、含量测定 （一）GC法 1. GC特点 选择性好 灵敏度高 速度快 分离效能好
19:58:12
挥发性低、不稳定、 极性强→衍生化易受 样品蒸气压限制
2. VitE测定的色谱条件 载气→N2 固定液→硅酮（OV-17） 担体→硅藻土或高分子多孔小球 柱温→265℃ 检测器→氢火焰离子化检测器(FID) 内标→正三十二烷 n ≥ 500 R≥2
求本品中维生素A的含量？
19:58:12