14
（二） UV法 BP（2005）
Vi t无 A 水 乙 H 醇 C l 去V 水 itA △
λmax为326nm 一个吸收峰
λmax为350～390nm 三个吸收峰 且在332nm的波长处 有较低的吸收峰或拐 点
2021
15
↓ HCl △
VitA
CH2
去水VitA（VitA3）
维生素A的含量用生物效价即国际单位 （IU/G）表示。维生素A的国际单位 表示如下：
1IU 0.34 g 4 维 生 A 醋 素 酸
效价（IU / g） 1 106 g 2907000 0.344g

换算因 效 数 价 ＝ IU （ /g） 2907000
E% 1cm
1530
1900
2021
26
三点校正法
1. 测定原理：本法是在三个波长处测得吸 收度，根据校正公式计算吸收度A校正 值后，再计算含量，故本法称为“三点 校正法”。主要基于以下两点：
（1）杂质的吸收在310~340nm波长范围内 几乎呈一条直线，且随波长的增大吸收 度减小；
（2）物质对光的吸收具有加和性。
2. 波长的选择： （1） 三点波长的选择原则为： 一点选择在Va的最大吸收波长处
0.344g /IU
换算因效 数价 E1＝ % cIm U （ /g） 21950370000
1900
1IU 0.30g0维生 A醇 素 效价（IU / g） 1106g 3330000
0.300g/IU
换算因效 数价 E1＝ % cIm U （ /g） 31383200000
1830
第四步：求标示量％
1IU 0.30g0维生 A醇 素 效价（IU / g） 1106g 3330000
0.300g/IU
换算因效 数价 E1＝ % cIm U （ /g） 31383200000
1830
2021
27
第二步 求 % 1cm(样)
% 1cm(样)
A C(%)l
注意： ➢ % 1cm (样 )% 1cm (纯 ) ➢ C 为混合样品的浓度
USP
显色剂 磷钼酸
规定斑点颜色和Rf值
三. 含量测定
(一)UV法 （三点校正法）
VitA在325-328nm处有最大吸收,可用 于含量测定.但是含有立体异构体;氧化降 解产物;光照产物；合成中间体; 副产物;稀 释用油等杂质会有紫外吸收,干扰VitA在紫 外区的测定.为了得到准确的测定结果，消 除非VitA产生的无关吸收所引起的误差， 故采用“三点校正法”测定。
讨论 维生素 A有五个共扼 双键，无水乙醇溶液在 326 nm处有最大吸收，盐酸催化加 热脱水，成6个双键，故，波 长红移，同时在350-390之间 出现3个吸收峰。
2021
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λmax为326nm 一个吸收峰
λmax为350～390nm 三个吸收峰
（三） TLC法 对照品法
BP 显色剂 三氯化锑
（即1 ） VitA的max
（2） 2 3 分别在1的两侧各选一点
第一法 等波长差法
3-1=1-2
1=328nm 2=316nm 3=340nm △=12nm
A 3校 2 8 3 .5 正 2 A 2 3 2 A 38 1 A 36 4
测定对象 纯度高的VitA醋酸酯
第二法 等吸收度法(皂化法)
第十二章
维生素类药物的 分析
维生素： 是维持人体正常代谢机能所
必需的微量营养物质。 人体不能合成维生素
脂溶性 VitA、D、 E、K等
水溶性 VitB VitC、叶酸、烟酸
第一节 维生素A
R : -H -COCH3 -COC15H31
维生素A醇 维生素A醋酸酯 维生素A棕榈酸酯
一、 性质
（一） 溶解性 不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等
76A1 A2 A3
1=325nm 2=310nm 3=334nm A 3校 2 5 6 .8 正 A 3 1 2 2 5 .5 5 A 3 5 1 4 5 .2 0 A 3 63
测定对象 VitA醇
3. 测定法 4. （1）基本步骤: ❖第一步 A值的选择 要求： 所选A值中杂质的干扰已基本消除
2021
4
（二）为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯
❖ 具有UV吸收 325-328nm ❖ VA主要为全反式VA,存在多种立 体异构化合物,如：新维生素Aa,新 维生素Ab,新维生素Ac,异维生素Aa， 异维生素Ab
维生素A 新维生素Aa 新维生素Ab 新维生素Ac 异维生素Aa 异维生素Ab
max
2021
28
第三步 换算因子
换算因数 效＝ 价I（ U/g） E%
1cm(纯)
换算因子的定义为单位
E% 1cm (纯 )
所相当
的效价
维生素A的含量用生物效价即国际单位（IU/G） 来表示。维生素A的国际单位表示如下：
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1IU 0.34g4维 生 A醋 素酸 酯 效价（IU / g） 1106g 2907000
325.5 328 320.5 310.5 323 324
相对生物效价
100% 75% 24% 15% 21% 24%
2021
6
❖ 易发生脱氢、脱水、聚合反应 VitA2
VitA3
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7
鲸醇
（三）共轭多烯侧链 易被氧化
VitA紫 外 线 、 O2 、 氧 化 剂 环 氧 化 物 [ O]VViittAA酸 醛
标 示 量标 I％ U/丸 示 ＝ 1量 0％ 0 ＝IU/g标 平示均量丸 1重 0％ 0 A W D 10 换 0L算 标因 W 示 1数 量 0％ 0
（2） 第一法 维生素A醋酸酯 • 方法：
S 环 己 烷 9～ 1I5U /m溶 l 液 分别 30、 于 301、 362、 384、 306n0m 处A 测 i
+
CH2
- 蓝色
SbCl5 RCOO
+
紫红 CH2
-
SbCl5 RCOO
条件 无水无醇 三氯化锑水解生成氯化氧锑 乙醇可与C+作用而使正电荷消失
方法 取维生素A油溶液1d， 加氯仿10 ml，振摇溶解，取 出两滴，加氯仿2 ml，与25% 三氯化锑氯仿液0.5 ml反应， 成蓝色，渐成紫红。
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❖ △或有金属离子存在时氧化↑ 维生素A醋酸酯在临床上较常用
环氧化物
VitA醛
VitA酸
2021
10
（四） 与三氯化锑发生呈色反应 Vi tA S b 3C 蓝 l 色 紫红
CHCl3
二、 鉴别 （一） 三氯化锑反应
Vi tA 无 无醇 S水 C b H3 CC l3 l蓝 色 紫红