实验实训一种子(实)品质检验(一)种子净度的测定一、目的要求:学会测定计算种子净度的方法。
并进一步了解种子净度对种批质量的影响和相关关系。
二、材料器具1.材料本地区主要园林植物种子2—3种。
2.器具受皿天平、1/1000天平、种子检验板、直尺、毛刷、胶匙、镊子、放大镜、中小培养器皿、盛种容器、钟鼎式分样器等。
三、方法步骤1.测定样品的提取将送检样品用四分法或分样器法进行分样。
四分法是将种子倒在种子检验板上混拌均匀摆成方形,用分样板沿对角线把种子分成四个三角形,将对顶的两个三角形的种子再次混合,按前法继续分取,直至取得略多于测定样品所需数量为止。
测定样品可以是表1规定重量的一个测定样品(一个全样品),或者至少是这个重量一半的两个各自独立分取的测定样品(两个半样品)。
必要时也可以是两个全样品。
样品的称量精度要求见表2。
2.测定样品的分离将测定样品铺在种子检验板上,仔细观察,分离出纯净种子、其他植物种子、夹杂物三部分。
分类标准如下:(1) 纯净种子送检者陈述的种子是完整的、没有受伤害的、发育正常的种子;发育不完全的种子和不能识别出的空粒;虽已破口或发芽,但仍具有发芽能力的种子。
带种翅的种子中,凡加工时种翅容易脱落的,其纯净种子是指除去种翅的种子;凡加工时种翅不易脱落的,则不必除去,其纯净种子包括留在种子上的种翅。
壳斗科的纯净种子是否包括壳斗,取决于各个种的具体情况:壳斗容易脱落的不包括壳斗;难于脱落的包括壳斗。
(2) 其他植物种子分类学上与纯净种子不同的其他植物种子。
(3) 夹杂物 能明显识别的空粒、腐坏粒、已萌芽因而显然丧失发芽能力的种子;严重损伤(超过原大小的一半)的种子和无种皮的裸粒种子;叶片、鳞片、苞片、果皮、种翅、壳斗、种子碎片、土块和其他杂质;昆虫的卵块、成虫、幼虫和蛹。
3.各成分分别称重用天平分别称量纯净种子、其他植物种子和夹杂物的重量,称量精度同测定样品。
4.净度的计算净度(%)= 夹杂物重其他植物种子重纯净种子重纯净种子重++×100净度分析中各个成分应计算到两位小数,填表时按GB/T8170修约到一位小数。
成分少于0.05%的填报为“微量”,若成分为零时用“—0.0—”表示。
测定样品各成分总和必须为100%。
总和是 99.9%和100.1%时,可从百分率的最大值中加减0.1%。
5.误差分析一个全样品法测定时,实际差距=测定样品重—(纯净种子重+其它植物种子重+夹杂物重);容许差距=测定样品重×5%。
实际差距没有超过容许差距可以计算结果,否则需重做。
两个“半样品”法或两个全样品法测定时,分别算出每个成分的重量占各成分重量之和的百分率(至少保留两位小数),对应的百分数之差是实际差距;用对应的各成分的百分数平均值去查表3可得到容许差距。
如果各成分的实际差距均在容许范围内,可以计算并在质量检验证书中填报每个成分重量百分数的平均值。
任何一个成分的分析结果超过了容许差距,均按以下程序处理:在使用“半样品”的情况下,再分析一对“半样品”(但总共不必多于四对),直至一对“半样品”各成分的差距均在容许范围之内。
将其成分的差异超过容许差距两倍的成对样品舍去不计,根据其余各对的数据计算各个成分的百分数的平均值。
在使用两个全样品的情况下,再分析一个全样品。
只要最高值和最低值的差异未超过容许差距的两倍,就取这三次分析的平均值填报。
粘滞性种子是指容易相互粘附或容粘附在其他物体上,容易被其他植物种子粘附或容易粘附其他植物种子,不易被清选、混合或扦样的种子。
如果全部粘滞性结构(包括粘滞性杂质)占一个样品的三分之一或更多,就认为该样品是有粘滞性。
例如冷杉属、翠柏属、雪松属、扁柏属、柏木属、柳杉属、杉木属、落叶松属、云杉属、长叶松、刚松、黄杉属、红杉属、巨杉属、落羽杉属、铁杉属、槭属、臭椿属、桤木属、桦木属、鹅耳枥属、梓属、石竹属、桉属、水青冈属、银桦属、女贞属、枫香属、鹅掌楸属、悬铃木属、竹类、杨属、香椿属、丁香属、崖柏属、椴树属、榆属、榉属等都是粘滞性种子,应用容许差距表3时,应当使用粘滞性种子栏的容许误差。
四、作业1.将种子净度的测定结果填入净度分析记录表中。
2.写出测定净度时,应注意的问题。
表1 送检样品与净度测定样品量表表2 净度分析样品的总体及各个组成成分的称量精度表3 同实验室同送检样品净度分析容许差距(5%显著水平的两尾测定)续表3表4 净度分析记录表编号树种样品号样品情况测试地点环境条件:室内温度℃湿度% 测试仪器:名称编号本次测定:有效□测定人无效□校核人测定日期年月日(二)种子重量测定一、目的要求学会测定计算种子千粒重的方法。
并进一步了解种子千粒重对种批质量的影响和相关关系。
二、材料器具1.材料净度测定后的纯净种子2.器具受皿天平、1/1000天平、种子检验板、胶匙、镊子、中小培养皿、数粒器等。
三、方法步骤采用百粒法——即从纯净种子中不加选择的取出100粒种子为一组,重复取八组称量,并由此计算出每1000粒种子的重量。
1.测定样品的选取将净度测定后的纯净种子铺在种子检验板上,用四分法分到所剩下的种子略大于所需量。
2.点数和称量从测定样品中不加选择地点数种子,点数时将种子每5粒放成一堆,两个小堆合并成10粒的一堆,取10个小堆合并成100粒,组成一组。
共取8组,分别称各组的重量,记入重量测定记录表5中,各重复称量精度同净度测定时的精度。
3.计算重量根据八个重量的称量读数求八个组平均重量(x),然后计算标准差(S)及变异系数(C),公式如下:标准差(S )=)1()()(22--∑∑n n x x n式中:x ——每个重复的重量,g ;n ——重复次数。
变异系数(C )=xx Sx-_×100式中:_x —100粒种子的平均重量。
种粒大小悬殊的种子和粘滞性种子,变异系数不超过6.0,一般种子的变异系数不超过4.0,就可计算测定结果。
如变异系数超过上述限度,则应再数取8个重复,称重并计算16个重复的标准差。
凡与平均数之差超过两倍标准差的各重复舍弃不计,将八个或八个以上的100粒种子的平均重量乘以10(即10×-x )即为种子千粒重,其精度要求与称重相同。
还可以将整个测定样品通过数粒器,并读出显示的种子粒数。
也可以人工计数。
将计数后的测定样品称重,换算出1000粒种子重量。
四、作业1、将种子千粒重测定结果填入重量测定记录表中。
1、 写出测定千粒重时,应注意的问题。
表5 重量测定记录表编号 树种 样品号 样品情况 测试地点 环境条件:室内温度 ℃ 湿度 % 测试仪器:名称 编号第 组数据超过了容许误差,本次测定根据第 组计算。
本次测定:有效□测定人校核人测定日期年月日无效□(三)种子发芽测定一、目的要求种子发芽测定是为了确定播种量和一个种批的等级价值。
要求掌握种子发芽测定的操作技术,并学会计算种子发芽率的过程。
二、材料器具1.材料本地区主要园林植物种子3—5种。
2.器具及药品发芽箱、发芽盒、滤纸、纱布、脱脂棉、镊子、温度计(0—100℃)、取样匙、直尺、量筒、烧杯、福尔马林、高锰酸钾、标签、电炉、蒸煮锅、蒸馏水、滴瓶、解剖刀、解剖针等。
三、方法步骤1.测定样品的提取用四分法从测定净度时选出的纯净种子,每个三角形中数取25粒种子组成100粒,共组成四个100粒,即为四次重复,分别装入沙布袋中。
桦属、桉属、杨属、柳属等特小粒种子可用称量发芽测定法,每个重复称量大约0.25g,称量精度至毫克,4次重复。
2.消毒灭菌为了预防霉菌感染,干扰检验结果,检验所使用的种子和各种物件一般都要经过消毒灭菌处理。
(1)检验用具的消毒灭菌发芽盒、纱布、小镊子仔细洗净,并用沸水煮5—10分钟,供发芽试验用的发芽箱用喷雾器喷洒福尔马林后密封两三天然后使用。
(2)种子的消毒灭菌目前常用的有福尔马林、高锰酸钾。
药剂种类不同,处理的方法和时间也不一致。
福尔马林将纱布袋连同其中的种子测定样品放入小烧杯中。
注入0.15%的福尔马林溶液以浸没种子为度,随即盖好烧杯。
20分钟取出绞干,置于有盖的玻璃皿中闷半小时,取出后连同沙布用清水冲洗数次,即可进行浸种处理。
高锰酸钾用0.2—0.5%的高锰酸钾溶液浸2小时,取出用清水冲洗数次。
3.浸种落叶松、油松、马尾松、云南松、樟子松、杉木、侧柏、水杉、黄连木、胡枝子等,用始温为45℃水浸种24小时,刺槐种子用80—90℃热水浸种,待水冷却后放置24小时,浸种所用的水最好更换1—2次。
杨、柳、桉等则不必浸种。
4.置床将经过消毒灭菌、浸种的种子安放到发芽床上。
常用的发芽床有纱布、滤纸、脱纸棉。
为了向种子提供足够的水分,可以用多层的纸,也可以在纸下或纱布下加垫脱脂棉。
一般中、小粒种子可在发芽盒中放上纱布或滤纸作床。
每个发芽盒床上整齐地安放2个重复的种子,种粒之间保持的距离大约相当于种粒本身的1—4倍,以减少霉菌感染,种粒的排放应有一定的规则。
在发芽盒不易磨损的地方贴上小标签,写明送检样品号、重复号、姓名和置床日期,然后将发芽盒盖好放入指定的能调控温度、光照的发芽箱内。
5.管理经常检查测定样品及其水分、通气、温度、光照条件。
发芽所用温度执行GB2772—1999中的规定,表6列举部分树种发芽测定的主要技术规定。
轻微发霉的种粒可以拣出用清水冲洗后放回原发芽床。
发霉种粒较多的要及时更换发芽床或发芽容器。
6.观察记载发芽测定的情况要定期观察记载。
观察记载的间隔时间根据树种和样品情况自行确定,但初次记数和末次记数必须有记载。
发芽测定持续时间见表6中的末次计数天数,自置床之日起算,不包括预处理时间。
记载项目按发芽床的编号依次记载以下各点(见表7)。
达到正常幼苗标准的记数后从发芽床上拣出,严重腐坏的幼苗也应拣出。
正常幼苗是该树种应有的幼苗基本结构全都完整、匀称、健康、生长良好。
具有下列情况之一的幼苗为不正常幼苗a)初生根:生长停滞、粗短、缺失、断折、自顶端开裂、缢缩、纤细、束缚在种皮中、呈负向地性、玻璃状、因原发性感染而腐坏、禾木科植物种子无种子根或仅有一条孱弱的种子根;b)下胚轴、上胚轴和中胚轴;粗短、深度横裂或断折、完全纵裂、缺失、缢缩、极度扭曲、弯曲向下、呈环状或螺旋状、纤细、玻璃状、因原发性感染而腐坏;c)子叶(下述缺陷所占面积超过子叶面积的一半者为不正常,只占一半或不足一半者为正常,称为“50%规则”。
但只要损伤或腐坏出现在子叶同幼苗中轴的联结点上或茎尖附近,该幼苗就属于不正常幼苗,在这种情况下不考虑50%规则。
):肿胀或卷曲、畸形、断折或有其他损伤、断离或缺失、变色、坏死、玻璃状、因原发性感染而腐坏;d)初生叶:畸形、损伤、缺失、变色、坏死、外形正常但小于正常大小的四分之一、因原发性感染而腐坏;e)顶芽及其周围的组织:畸形、损伤、缺失、因原发性感染而腐坏(如果顶芽有缺陷或者缺失,即使已经生出一个或两个侧芽,该幼苗仍为不正常幼苗);f)芽鞘和第一片叶(禾本科、棕榈科)芽鞘:畸形、损伤、缺失、顶端损伤或缺失、极度向下弯曲、呈环状或螺旋状、严重扭曲,从顶端向下开裂长度超过全长的三分之一,基部开裂或有其他损伤。