营养状况实验室检测
二、原理及步骤
1、实验原理
该染料在酸性溶液中 呈现红色，被还原后 为无色。在没有杂质 干扰时，一定量的食 物溶液还原标准染料 的量与其中的抗坏血酸 成正比。
2、实验步骤
用2, 6-二氯酚靛酚染料滴定标准维生素C溶液 （计算1ml二氯酚靛酚相当于多少mg抗坏血酸）
用2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原 型维生素C的浓度。
食物中还原型维生素C的测定 ----2, 6-二氯酚靛酚滴定法
一、目的
了解营养评价中实验室检查的意义 了解食物中还原型VitC测定方法
营养调查
目的: 了解不同生理状况、生活环境、劳动条件
下各种人群营养是否合理，针对具体情况对个 人（包括各种疾病患者）、家庭和集体按照合 理营养要求，提出改善措施以确保人群健康。
操作步骤
配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准液于50ml容 量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。（1mg/50ml）
空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定 至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次）
标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪 色为终点。记录所用染料Aml (两次)。
5 C样
=
1ml染料
B-C
A: 滴定标准维生素C溶液(5ml)+草酸（5ml，1%）的染料量
C: 滴定空白组为草酸（10ml，1%）的染料量
B: 滴定稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%）的染料量
四、注意事项
测定过程要迅速，因还原型维生素C易被氧化，一般 不超过2min;
样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚，但 还原速度比还原型维生素C慢，故滴定时以15s内粉红 色不褪去为止；
配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容 量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。
空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉 红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次）
标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草 酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。 记录所用染料Aml。1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg，T=0.1/（A－ C）。（两次）
果汁（水溶VitC100）稀释液制备：市售果汁饮料冰箱待用。使用前 用草酸溶液稀释N倍（已制备）。
果汁稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml果汁稀释液、 5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不 褪色为终点。记录结果B ml。（两次）
操作流程图
2, 6-二氯酚靛酚染液 无色变为淡红色 滴定（两次）
果汁稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml果汁稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪色为 终点。记录结果Bml。VitC=T×(B-C) ×N/5（两次）
维生素C标准品粉末：棕色干燥皿内保存；
维生素C标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏；
2热, 6溶-二液氯中酚，靛冷酚却溶后液4℃：过50夜m，g溶过解滤于后N用aH蒸C馏O水3(0定.2容g/ml) 250ml，然后短期、棕色瓶、冷藏；
所用到的试剂
0.1%抗坏血酸标准储备液（1mg/ml） 抗坏血酸标准应用液（1mg/50ml） 1%的草酸溶液 0.02%的2, 6-二氯酚靛酚溶液 N倍稀释的果汁样品（N=20)
各种蔬菜水果中的vic的含量
No.1 樱桃 50g 12粒 500mg No.2 番石榴 80g 1 个 216mg No.3 红椒 80g 1/3个 136mg No.4 黄椒 80g 1/3个 120mg No.5 柿子 150g 1 个 105mg
No.6 青花菜 60g 1/4株 96mg No.7 草莓 100g 6粒 80mg No.8 橘子 130g 1 个 78mg No.9 芥蓝 60g 1/3株 72mg No.10 猕猴桃 100g 1个 68mg
C: 空白组为草酸（10ml，1%） A: 标准维生素C溶液(5ml)+草酸（5ml，1%） B: 稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%）
三、结果计算
（1）1ml染料相当于还原型维生素C的mg
（2）样品中原型维生素C浓度
C样（mg/L）=
（B － C）× T 5 ml来自× N× 1000T mg
和孕晚期妇女每天维生素C摄入量标准应为130毫克。哺乳期妇女每 天维生素C摄入量标准也应为130毫克。
—— 《中国居民膳食指南》
五、评价与讨论
该水溶性C100中VitC含量是否符合标准？若 含量超过标准，又该如何解释？
该如何建议不同人群每天这种饮料摄入量，过 多摄入会有影响吗？
针对VitC缺乏或不足的病人，可以采取哪些治 疗措施？
人体每天维生素C摄入标准
0岁婴儿宝宝每天维生素C摄入量为40毫克。 半岁婴儿每天维生素C摄入量为50毫克。 1岁儿童每天维生素C摄入量为60毫克。 4岁以上儿童每天维生素C摄入量为70毫克。 7岁以上儿童每天维生素C摄入量为80毫克。 11岁以上儿童每天维生素C摄入量为90毫克。 18岁以上成年人每天维生素C摄入量为100毫克。 孕妇人群，在孕早期每天维生素C摄入量标准应为100毫克，孕中期