图像显示的即为放射性示踪剂在实验样品中的定位、分 布和数量情况，根据这些，我们可以进行定位和定量分 析。
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二、放射性自显影法中的潜影是怎么形成的？
1、发射电子：核射线与溴化银作用，使其电离，发射出
电子，向敏化中心移动形成阴电层。
AgBr+β粒子→Ag++Br-+e2、 Ag+的还原：Ag+向敏化中心移动，与e-结合，还原成 银原子。e-+Ag+ →Ag 3、潜影形成：还原的银原子起催化作用，致周围的Ag+被
示踪技术之放射性自显影法
(Autoradiography，ARG)
放射性自显影法
一、什么是放射性自显影法？
放射性自显影法是一种光化学过程。用作示踪剂的放射 性核素所产生的射线使乳胶感光形成潜影，经显影、定 影处理，就可将已形成潜影的银离子迅速还原为黑色的
银颗粒，而溶去未形成潜影的银离子，出现图像。
20世纪70年代后，低能量的放射性同位素的应用以及精密定标器的制成， 提高了其分辨率。同时结合了微量密度计的扫描手段和一定的数学处理， 使该项技术初步达到定量测量的要求。 20世纪80年代初以来，放射性自显影技术得到进一步完善，即根据Passioura 提出的计算方程式，研究放射性分布曲线与扫描所得的密度曲线之间的关系， 校正自显影图像。
四、为什么要使用放射性自显影法？
最大特点：*能定位放射性示踪剂在样品中的准确分布，生动、
直观，比起基于电离和闪烁作用的放射性探测器只能测定整个 样品进入探测器灵敏区的总放射性有很大的优越性。 *能精确定位微观区域中放射性物质的存在与分布；且探测效率较 高，可累积记录入射的放射性，在植物生长过程中可以反复形 成放射性影像，借此观察养分随时间的变化过程。此外这种方 法操作方便，设备简单，研究资料便于长久保存。
局限性：定量上误差较大，只能作相对定量，只能得到一个总
量的概念，对养分的状况无法区分，测定速度低，在微弱的放 射性条件下需要很长曝光时间。
五、自显影片的制备方法
重要制备 方法
接触法
液体核 乳胶浸 膜法
揭膜乳 胶法ຫໍສະໝຸດ 1、接触法在暗室中，将标本面与感光胶片或核乳胶干板 的乳胶面密切接触，进行曝光而制备自显影的方 法称为接触法。标本与感光材料均不接触水或有 机溶剂，不会造成示踪剂的扩散或流失，适用于
将一小块胰腺组织放在加有
放射性同位素标记氨基酸的培养
液中进行短暂培养，在此期间，
活细胞就会摄取具有放射性的氨 基酸并掺入到核糖体合成的消化 酶中，然后立即将组织进行固定 ，通过切片和放射自显影检测， 发现放射性出现在内质网，说明 蛋白质的合成始于内质网。
放射性自显影法在根际研究中的应用 例：放射性自显影法在根际研究中的应用： 采用薄层涂片自显影技术研究不同植物和 不同介质中养分的根际微域分布。 如在沙壤土、高岭土和蒙脱土的混合介质上 用86Rb和32P对玉米和箭筈豌豆根系的养分 吸收进行研究，以探求根系特性对根际养 分分布的影响，以及养分离子在根际的亏 缺趋势与介质的吸附性能之间存在的联系 等。
还原，形成潜影。
Ag ……Ag →nAg
潜影经显影液和定影液处理即成为自显影图像。
三、放射性自显影法的起源和发展
在生物学上的应用始于1940年伦登(E.S.London)的研究，他获得了 吸入镭气曝射过的青蛙皮的放射自显影。
20世纪20年代以来，在生物科学研究领域中逐渐应用广泛， 成为放射性同位素示踪法的一项常用实验技术。 20世纪60年代的Walker等人开始将这种方法应用于土壤根际微区的研究。
各种实验。
2、液体核乳胶浸膜法
在暗室中，将标本或载有标本的玻片浸入适当稀释的液 体核乳胶中，使标本表面敷上一层薄而均匀的乳胶膜，干
燥后曝光而制备处显影的方法称液体核乳胶浸膜法。在浸
膜过程中，标本要与含水的液体核乳胶接触，会造成扩散 性示踪剂一定程度的扩散和流失，故只适用于非扩散性示 踪实验。
3、揭膜乳胶法
将揭膜乳胶膜从玻璃基片上揭下来，在温水中展开， 浸透，然后将其贴于标本表面，干燥后曝光而制备自显影
。揭膜乳胶厚度均匀，该法常用于光镜自显影的定量研究
。因需在水中进行，故适用于非扩散性示踪实验。
放射性自显影法的应用
应用:用放射性自显影可动态观察生理 或病理状态下放射性核素标记的各 种试剂、毒物、营养物质等在脏器 、组织、细胞中的分布、转运、蓄 积和排泄，以研究其代谢规律、作 用部位及作用机理。
Thanks!
组员：陈姣姣、杨光琴、刘雪薇、秦 岭、张周波、蒲强、陶文广、汪家志 2013-12-3